私たちは、一貫した全層熱傷を作成するための、シンプルで費用対効果が高く、ユーザーフレンドリーなマウス火傷動物モデルを開発しました。この研究は、火傷の新しい治療法の開発を促進するための重要なツールを研究者に提供します。火傷面の作成に使用される方法は、実験動物モデルによって異なります。
しかし、火傷の負わせる技術と生成された火傷の深さも一貫性がなく、以前の研究では十分に説明されておらず、これは火傷の重症度と火傷の治療方法を決定する上で重要です。このプロトコルでは、便利なデジタル加熱装置を使用して、マウスの背部にチェス盤のような火傷の傷を作成しました。正確な温度制御を提供し、他の可変技術と比較して安全性と再現性を向上させるため、動物の使用を最小限に抑え、信頼性の高い創傷治癒研究が可能になります。
まず、デジタル加熱装置の温度を摂氏97度に調整します。マウスに深く麻酔をかけたら、腹臥位で加熱したパッドに移します。Employは、目的の傷口を正確に特定するために、直径9mmの1ミリリットルのピペットチップを滅菌しました。
以前にトリミングした滅菌ドレープで皮膚を覆い、手術領域を露出させます。耐熱手袋を着用し、デジタル加熱装置の温度を確認してください。次に、加熱装置の先端を位置する創傷部位の中心に摂氏97度で10秒間適用し、直径4ミリメートルの6つの丸い創傷を作成します。
次に、火傷の傷口に氷を塗り、潜在的な痛みを管理します。マウスをリカバリーケージに入れ、5〜10滴の飲料水で餌のペレットを柔らかくし、ケージの床に置いて摂食を容易にします。火傷誘発の24時間後、生理食塩水で湿らせた滅菌ガーゼですべての傷をきれいにします。
ガーゼで皮膚を拭き取り、注射器を使用して少量のTKHヒドロゲル抗菌ジェルを塗布して火傷の傷を覆います。火傷誘発後の特定の日に、滅菌済みの1ミリリットルピペットチップの先端で傷口に印を付け、デジタルカメラで画像を撮影します。動物を安楽死させた後、ハサミを使用して、創傷部位とその下の筋肉組織を含む周囲の皮膚を1センチメートルずつ測定します。
顕微鏡分析では、表皮の完全な破壊と、皮下脂肪と筋肉層にまで及ぶ全層の皮膚損傷が示されました。3日目までに、創傷は血管拡張と炎症細胞の著しい浸潤を伴う炎症段階にありました。7日目までに、創傷面積の顕著な減少が観察され、14日目には、リモデリング段階を示す高密度のコラーゲン沈着を伴う肉芽組織が形成されました。
TKHペプチドハイドロゲルで治療された創傷では、未治療の創傷と比較して7日目、10日目、および14日目の創傷領域が小さいことからも明らかなように、創傷治癒能力が有意に改善されました。