Мы разработали простую, экономичную и удобную в использовании модель животного для создания последовательных ожогов на всю толщину. Это исследование предоставит исследователям необходимые инструменты для содействия разработке новых методов лечения ожоговых травм. Методы, используемые для получения ожоговых поверхностей, различаются в зависимости от экспериментальных моделей на животных.
Тем не менее, техника нанесения ожога и глубина полученного ожога также противоречивы и плохо описаны в предыдущих исследованиях, что имеет решающее значение при определении тяжести ожога и методов лечения ожогов. В этом протоколе мы использовали удобное цифровое нагревательное устройство, чтобы создать ожоговую рану, похожую на шахматную доску, на спинке мыши. Он обеспечивает точный контроль температуры, повышая безопасность и воспроизводимость по сравнению с другими вариативными методами, что сводит к минимуму использование животных и позволяет проводить надежные исследования заживления ран.
Для начала отрегулируйте температуру цифрового нагревательного прибора до 97 градусов по Цельсию. Как только мышь будет глубоко обезболиваена, перенесите ее на нагревательную подушку в положении лежа. Employ имеет стерилизованный наконечник пипетки объемом один миллилитр диаметром девять миллиметров для точного определения желаемых мест ранения.
Накройте кожу предварительно обрезанной стерильной простыней, оставив операционную область открытой. Наденьте термостойкие перчатки и проверьте температуру цифрового нагревательного прибора. Затем приложите наконечник нагревательного прибора к центру расположенных мест раны на 10 секунд при температуре 97 градусов Цельсия, чтобы создать шесть круглых ран, каждая диаметром четыре миллиметра.
Затем приложите лед к ожоговой ране, чтобы справиться с потенциальной болью. Поместите мышь в клетку для восстановления, затем размягчите несколько гранул пищи пятью-10 каплями питьевой воды и положите их на пол клетки, чтобы облегчить кормление. Через 24 часа после индукции ожога очистите все раны стерильной марлей, смоченной в физрастворе.
Промокните кожу марлей, и нанесите небольшое количество гидрогелевого антибактериального геля TKH с помощью шприца, чтобы закрыть ожоговые раны. В определенные дни после индукции ожога отметьте рану кончиком стерильного наконечника пипетки объемом один миллилитр и сделайте снимок с помощью цифровой камеры. После усыпления животного с помощью ножниц изолируйте место раны и окружающую кожу, включая нижележащую мускулатуру, размером один на один сантиметр.
Микроскопический анализ показал полное разрушение эпидермиса и повреждение кожи на всю толщину, распространяющееся на подкожно-жировые и мышечные слои. К третьему дню раны находились в воспалительной стадии с вазодилатацией и значительной инфильтрацией воспалительных клеток. К седьмому дню наблюдалось заметное уменьшение площади раны, а на 14-й день образовалась грануляционная ткань с плотным отложением коллагена, отмечающая стадию ремоделирования.
Способность к заживлению ран значительно улучшилась в ранах, обработанных пептидным гидрогелем TKH, о чем свидетельствуют меньшие площади раны на седьмой, 10-й и 14-й дни по сравнению с необработанными ранами.
