Desenvolvemos um modelo animal de queimadura de rato simples, econômico e fácil de usar para criar queimaduras consistentes de espessura total. Este estudo fornecerá aos pesquisadores ferramentas essenciais para facilitar o desenvolvimento de novos tratamentos para queimaduras. Os métodos usados para produzir superfícies de queimadura variam entre os modelos animais experimentais.
No entanto, a técnica de inflição de queimadura e as profundidades de queimadura produzidas também são inconsistentes e mal descritas em estudos anteriores, o que é crucial para determinar a gravidade da queimadura e os métodos de tratamento da queimadura. Neste protocolo, usamos um dispositivo de aquecimento digital conveniente para criar uma queimadura semelhante a um tabuleiro de xadrez no dorso do camundongo. Ele fornece controle preciso da temperatura, aumentando a segurança e a reprodutibilidade em comparação com outras técnicas variáveis, o que minimiza o uso de animais e permite estudos confiáveis de cicatrização de feridas.
Para começar, ajuste a temperatura do dispositivo de aquecimento digital para 97 graus Celsius. Assim que o mouse estiver profundamente anestesiado, transfira-o para a almofada aquecida em decúbito ventral. A Employ esterilizou a ponta da pipeta de um mililitro com um diâmetro de nove milímetros para identificar com precisão os locais de ferimento desejados.
Cubra a pele com um campo estéril previamente aparado, deixando a área cirúrgica exposta. Coloque luvas resistentes ao calor e verifique a temperatura do dispositivo de aquecimento digital. Em seguida, aplique a ponta do dispositivo de aquecimento no centro dos locais da ferida localizada por 10 segundos a 97 graus Celsius para criar seis feridas redondas, cada uma com um diâmetro de quatro milímetros.
Em seguida, aplique gelo na ferida da queimadura para controlar a dor potencial. Coloque o rato em uma gaiola de recuperação, amoleça alguns pellets de comida com cinco a 10 gotas de água potável e coloque-os no chão da gaiola para facilitar a alimentação. Após 24 horas da indução da queimadura, limpe todas as feridas com gaze estéril umedecida com solução salina.
Seque a pele com gaze e aplique uma pequena quantidade de gel antibacteriano de hidrogel TKH usando uma seringa para cobrir as feridas de queimadura. Em dias específicos após a indução da queimadura, marque a ferida com a ponta de uma ponta de pipeta estéril de um mililitro e capture uma imagem com uma câmera digital. Após a eutanásia do animal, usando uma tesoura, isole o local da ferida e a pele circundante, incluindo a musculatura subjacente, medindo um por um centímetro.
A análise microscópica mostrou destruição completa da epiderme e dano dérmico de espessura total estendendo-se às camadas subcutânea de gordura e músculos. No terceiro dia, as feridas estavam no estágio inflamatório com vasodilatação e infiltração significativa de células inflamatórias. No sétimo dia, foi observada uma redução notável na área da ferida e, no 14º dia, o tecido de granulação se formou com densa deposição de colágeno marcando o estágio de remodelação.
As habilidades de cicatrização de feridas foram significativamente melhoradas em feridas tratadas com hidrogel de peptídeo TKH, conforme evidenciado por áreas menores de feridas nos dias sete, 10 e 14 em comparação com feridas não tratadas.
