Nous avons développé un modèle animal simple, rentable et convivial pour créer des brûlures constantes sur toute l’épaisseur. Cette étude fournira aux chercheurs des outils essentiels pour faciliter la mise au point de nouveaux traitements pour les brûlures. Les méthodes utilisées pour produire des surfaces de brûlure varient selon les modèles animaux expérimentaux.
Cependant, la technique d’infliction des brûlures et les profondeurs de brûlure produites sont également incohérentes et mal décrites dans les études précédentes, ce qui est crucial pour déterminer la gravité de la brûlure et les méthodes de traitement des brûlures. Dans ce protocole, nous avons utilisé un appareil de chauffage numérique pratique pour créer une brûlure semblable à un échiquier sur le dos de la souris. Il fournit un contrôle précis de la température, améliorant la sécurité et la reproductibilité par rapport à d’autres techniques variables, ce qui minimise l’utilisation d’animaux et permet des études fiables de cicatrisation des plaies.
Pour commencer, réglez la température de l’appareil de chauffage numérique à 97 degrés Celsius. Une fois la souris profondément anesthésiée, transférez-la sur le coussin chauffant en position couchée. Employ a stérilisé une pointe de pipette d’un millilitre d’un diamètre de neuf millimètres pour localiser avec précision les sites de blessure souhaités.
Couvrez la peau avec un champ stérile préalablement coupé, en laissant la zone chirurgicale exposée. Mettez des gants résistants à la chaleur et vérifiez la température de l’appareil de chauffage numérique. Appliquez ensuite la pointe de l’appareil chauffant au centre des sites de plaie localisés pendant 10 secondes à 97 degrés Celsius pour créer six plaies rondes, chacune d’un diamètre de quatre millimètres.
Ensuite, appliquez de la glace sur la brûlure pour gérer la douleur potentielle. Placez la souris dans une cage de récupération, puis ramollissez quelques granulés de nourriture avec cinq à 10 gouttes d’eau potable et placez-les sur le sol de la cage pour faciliter l’alimentation. Après 24 heures d’induction de la brûlure, nettoyez toutes les plaies avec de la gaze stérile imbibée de solution saline.
Épongez la peau avec de la gaze et appliquez une petite quantité de gel antibactérien hydrogel TKH à l’aide d’une seringue pour couvrir les brûlures. Certains jours après l’induction de la brûlure, marquez la plaie avec l’extrémité d’une pointe de pipette stérile d’un millilitre et capturez une image avec un appareil photo numérique. Après avoir euthanasié l’animal, à l’aide de ciseaux, isolez le site de la plaie et la peau environnante, y compris la musculature sous-jacente, en mesurant un par centimètre.
L’analyse microscopique a montré une destruction complète de l’épiderme et des lésions cutanées de pleine épaisseur s’étendant à la graisse sous-cutanée et aux couches musculaires. Le troisième jour, les plaies étaient au stade inflammatoire avec vasodilatation et infiltration importante de cellules inflammatoires. Au septième jour, une réduction notable de la surface de la plaie a été observée, et au 14e jour, du tissu de granulation s’est formé avec un dépôt dense de collagène marquant la phase de remodelage.
Les capacités de cicatrisation des plaies ont été significativement améliorées dans les plaies traitées avec l’hydrogel peptidique TKH, comme en témoignent les zones de plaie plus petites aux jours sept, 10 et 14 par rapport aux plaies non traitées.
