Un modèle de fibrillation ventriculaire à long terme dans des cœurs de rats isolés

Résumé

Ce protocole présente un modèle de fibrillation ventriculaire à long terme dans le cœur de rat induite par une stimulation continue avec un courant alternatif basse tension. Ce modèle a un taux de réussite élevé, est stable, fiable et reproductible, a un faible impact sur la fonction cardiaque et ne provoque que des lésions myocardiques légères.

Résumé

La fibrillation ventriculaire (FV) est une arythmie mortelle avec une incidence élevée chez les patients cardiaques, mais l’arrêt de la FV sous perfusion est une méthode négligée d’arrêt peropératoire dans le domaine de la chirurgie cardiaque. Avec les progrès récents de la chirurgie cardiaque, la demande d’études prolongées de FV sous perfusion a augmenté. Cependant, le domaine manque de modèles animaux simples, fiables et reproductibles de fibrillation ventriculaire chronique. Ce protocole induit une FV à long terme par stimulation électrique en courant alternatif (CA) de l’épicarde. Différentes conditions ont été utilisées pour induire la FV, y compris la stimulation continue avec une basse ou haute tension pour induire la FV à long terme et la stimulation pendant 5 minutes avec une tension basse ou haute pour induire une FV spontanée à long terme. Les taux de réussite des différentes affections, ainsi que les taux de lésions myocardiques et de récupération de la fonction cardiaque, ont été comparés. Les résultats ont montré que la stimulation continue à basse tension induisait une FV à long terme et que 5 minutes de stimulation basse tension induisaient une FV spontanée à long terme avec une lésion myocardique légère et un taux élevé de récupération de la fonction cardiaque. Cependant, le modèle VF à basse tension et stimulé en continu à long terme a eu un taux de réussite plus élevé. La stimulation à haute tension a fourni un taux plus élevé d’induction de la FV, mais a montré un faible taux de réussite de la défibrillation, une mauvaise récupération de la fonction cardiaque et une lésion myocardique grave. Sur la base de ces résultats, la stimulation épicardique continue à basse tension est recommandée pour son taux de réussite élevé, sa stabilité, sa fiabilité, sa reproductibilité, son faible impact sur la fonction cardiaque et ses lésions myocardiques légères.

Introduction

La chirurgie cardiaque est généralement réalisée par thoracotomie, avec blocage de l’aorte et perfusion avec une solution cardioplégique pour arrêter le cœur. La chirurgie cardiaque répétée peut être plus difficile que la chirurgie initiale, avec des taux de complications et de mortalité plus élevés ^1,2,3. De plus, l’approche conventionnelle de la sternotomie médiane peut endommager les vaisseaux du pont derrière le sternum, l’aorte ascendante, le ventricule droit et d’autres structures importantes. Des saignements étendus dus à la séparation du tissu conjonctif, une....

Protocole

Toutes les procédures et protocoles expérimentaux utilisés dans le cadre de cette enquête ont été examinés et approuvés par le Comité de soin et d’utilisation des animaux de l’Hôpital général de l’APL.

1. Préparation de l’appareil Langendorff

1. Préparez le tampon Krebs-Henseleit (K-H). Pour préparer le tampon K-H, ajouter ce qui suit à l’eau distillée : 118,0 mM NaCl, 4,7 mM KCl, 1,2 mM MgSO4, 1,2 mM NaH₂PO₄, 1,8 mM CaCl2, 25,0 mM NaHCO₃, 11,1 mM glucose et_0,5 mM EDTA.
2. Préparez le système de perfusion Langendorff modifié.
   1. Gazer en continu la fio....

Résultats

Au total, 57 rats ont été utilisés dans les expériences, dont 30 remplissaient les critères d’inclusion. Les animaux inclus ont été divisés en cinq groupes, avec six animaux dans chaque groupe: le groupe témoin (groupe C), le groupe VF à long terme stimulé en continu à basse tension (groupe LC), le groupe VF à long terme stimulé en continu à haute tension (groupe HC), le groupe VF spontané à long terme induit par basse tension (groupe LI) et le groupe VF spontané à long terme induit par haute tension.......

Discussion

Ce protocole établit un modèle animal de FV à long terme dans des cœurs de rats isolés qui n’a pas été signalé auparavant. De plus, différentes conditions de stimulation électrique ont été comparées dans cette étude. Cette étude fournit un modèle pour les études liées à l’arrêt de la fibrillation ventriculaire pendant la chirurgie cardiaque.

Le taux de réussite du modèle est un indicateur très important qui est lié au personnel, au temps et aux coûts économiques. .......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
0 Non-absorbable suture	Ethicon, Inc.		Preparation of the isolated heart
95% O2 + 5% CO2	Beijing BeiYang United Gas Co., Ltd.		K-H buffer
AcqKnowledge software	BIOPAC Systems Inc.	Version 4.2.1	Software
Automatic biochemistry analyzer	Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.	Chemray 800	CK-MB assay
BIOPAC research systems	BIOPAC Systems Inc.	MP150	Hardware
Blunt needle (20 G, TWLB)	Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.	H-113AP-S	Modified Langendorff perfusion system
Calcium chloride	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10005861	K-H buffer
CK-MB assay kits	Changchun Huili Biotech Co., Ltd.	C060	CK-MB assay
Curved forcep	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
EDTA	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10009717	K-H buffer
Electrical stimulator	BIOPAC Systems Inc.	STEMISOC	Hardware
Filter	Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.	H-113AP-S
Glucose	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	63005518	K-H buffer
Heparin sodium	Tianjin Biochem Pharmaceutical Co., Ltd.	H120200505	Preparation of the isolated heart
Isoflurane	RWD Life Science Co.,LTD	21082201	Preparation of the isolated heart
Magnesium sulfate	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	20025118	K-H buffer
Needle electrodes	BIOPAC Systems Inc.	EL452	Hardware
Ophthalmic clamp	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Ophthalmic forceps	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Ophthalmic scissors	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Perfusion tube	Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.	H-113AP-S	Modified Langendorff perfusion system
Potassium chloride	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10016318	K-H buffer
Sodium bicarbonate	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10018960	K-H buffer
Sodium chloride	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	10019318	K-H buffer
Sodium dihydrogen phosphate dihydrate	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd	20040718	K-H buffer
Sprague-Dawley (SD) rats	SPF (Beijing) biotechnology Co., Ltd.	Male, 300-350g	Preparation of the isolated heart
Thermometer	Jiangsu Jingchuang Electronics Co., Ltd.	GSP-6	Modified Langendorff perfusion system
Tissueforceps	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Tissue scissors	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Toothed forceps	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.		Preparation of the isolated heart
Ventilator	Chengdu Instrument Factory	DKX-150	Preparation of the isolated heart
Water bath1	Ningbo Scientz Biotechnology Co.,Ltd.	SC-15	Modified Langendorff perfusion system
Water bath2	Shanghai Yiheng Technology Instrument Co., Ltd.	DK-8D	Modified Langendorff perfusion system