Pour commencer, placez un cœur miroir intégré et une solution de 20% de méthanol pendant une heure. Transférez séquentiellement le cœur à des concentrations croissantes de méthanol pour le déshydrater. Placez les solutions avec le cœur sur un mélangeur à 60 hertz pendant la déshydratation, transférez le cœur déshydraté dans une solution fraîche à 100% méthanol.
Après avoir remplacé la solution par du méthanol frais à 100 %, placez le cœur à quatre degrés Celsius pendant 10 minutes. Aspirez maintenant la solution. Ajoutez ensuite 200 millilitres de peroxyde d’hydrogène à 5% dans du méthanol pour blanchir le cœur.
Incuber le cœur dans la solution pendant la nuit à quatre degrés Celsius. Le lendemain, transférez l’échantillon dans du méthanol à 100 % après l’incubation, transférez-le dans une solution contenant 66 % de dichlorométhane et 33 % de méthanol. Le cœur doit couler au fond de la fiole.
Placez l’échantillon sur un mélangeur pendant trois heures pour assurer une dilapidation complète du cœur. Enfin, incubez l’échantillon dans du dibenzyléther pour l’appariement de l’indice de réfraction. Le tissu du cœur de souris P1 a été rendu transparent en quatre jours, tandis qu’une souris âgée de huit semaines a été rendue transparente en sept jours.