Per iniziare posizionare un cuore specchiante incorporato agross e una soluzione di metanolo al 20% per un'ora. Trasferire sequenzialmente il cuore a concentrazioni crescenti di metanolo per disidratarlo. Mettere le soluzioni con il cuore su un mixer a 60 hertz durante la disidratazione, trasferire il cuore disidratato in una soluzione fresca di metanolo al 100%.
Dopo aver sostituito la soluzione con metanolo fresco al 100%, posizionare il cuore a quattro gradi Celsius per 10 minuti. Ora aspira la soluzione. Quindi aggiungere 200 millilitri di perossido di idrogeno al 5% in metanolo per sbiancare il cuore.
Incubare il cuore nella soluzione per una notte a quattro gradi Celsius. Il giorno successivo, trasferire il campione in metanolo al 100% dopo l'incubazione, trasferirlo in una soluzione contenente il 66% di diclorometano e il 33% di metanolo. Il cuore dovrebbe affondare sul fondo del flaconcino.
Posizionare il campione su un mixer per tre ore per garantire la completa fatiscenza del cuore. Infine, incubare il campione in dibenziletere per la corrispondenza dell'indice di rifrazione. Il tessuto del cuore del topo P1 è stato reso trasparente in quattro giorni, mentre un topo di otto settimane è stato reso trasparente in sette giorni.
