Pour commencer, placez l’ambystoma Mexicanum sous sédatif avec le côté ventral vers le bas sur des serviettes en papier humides imbibées d’une solution de benzocaïne à 0,03 %. Couvrez l’animal avec des serviettes en papier imbibées de benzocaïne. Utilisez une paire de pinces à anneau pour étirer le membre postérieur en opération.
À l’aide d’un scalpel, faites une incision longitudinale latérale au-dessus de l’os du fémur qui s’étend sur toute la cuisse dans la partie supérieure du membre postérieur. Déplacez soigneusement les muscles et les nerfs du site de chirurgie sans couper. Placez doucement la pince Bode sous le fémur pour l’exposer pour la chirurgie.
Placez maintenant une plaque de fixation rigide à quatre trous de 7,75 millimètres le long de la diaphyse du fémur sans toucher les articulations et fixez-la en position alignée avec une pince. Utilisez quatre vis en titane de deux millimètres pour fixer l’os à la plaque. Sous irrigation, avec 0,7 fois PBS et 1% de pénicilline streptomycine, percez manuellement pour créer le premier trou dans l’os pour l’insertion de la vis.
Placez ensuite la première vis dans le trou. Appliquez le dispositif de guidage de scie sur la première vis et alignez-le avec l’os et la plaque. Utilisez le dispositif de guidage de scie pour percer et insérer les vis restantes.
Après vous être assuré de l’alignement de la plaque avec l’os, retirez le guide de scie et utilisez un tournevis pour casser les poignées des vis. Placez un morceau de film plastique stérilisé sous le fémur pour éviter d’endommager les tissus mous pendant le processus d’ostéotomie. Placez ensuite une scie à fil Gigli entre l’os et le film de protection.
Coupez l’os à l’aide d’une scie à fil Gigli en créant une seule coupe de 0,7 millimètre dans le fémur. Retirez la scie et le film de protection et irriguez le site de l’opération avec 0,7 fois PBS et 1% de pénicilline streptomycine. Couvrez le haut de la plaque et les vis avec de la cire d’os stérile pour protéger la peau et les muscles de l’irritation par les bords des vis.
Placez les muscles et la peau sur la cire. Fermez le site d’incision avec une suture synthétique de taille 7,0 à l’aide de simples points de suture interrompus. Après l’opération, pour se réveiller, placez l’animal dans un réservoir d’eau artificielle fraîche d’étang complété par de la pénicilline, de la streptomycine et du butorphanol.
La micro-tomodensitométrie et l’analyse histologique ont facilité la visualisation de l’os, de la position des fragments et de la taille des espaces, ainsi que de l’état de cicatrisation. Notamment, Ambystoma Mexicanum n’a montré aucune formation de callosité trois semaines après l’opération, contrairement aux mammifères. Une callosité cartilagineuse était visible à trois mois et une callosité osseuse ossifiée est apparue six mois après l’opération.
