Isolement, expansion et nucléofection de cellules souches neurales de la zone sous-ventriculaire murine adulte

Notre recherche se concentre sur l’étude de la façon dont la population de cellules souches neurales est régulée dans le cerveau des mammifères adultes. Il est important de comprendre les mécanismes moléculaires intrinsèques et extrinsèques qui régulent les cellules souches neurales au sein des niches neurogènes pour comprendre la biologie et développer de futures applications thérapeutiques potentielles. Pour étudier le comportement des cellules souches neurales, des approches in vivo et in vitro sont largement utilisées.

Les cultures de cellules souches neurales in vitro offrent des environnements contrôlés et la possibilité de manipuler et de surveiller facilement cette population de cellules. Les techniques de préservation de l’expression génique in vitro constituent une approche polyvalente pour étudier les mécanismes moléculaires régissant la biologie cellulaire. Cependant, une méthode efficace et reproductible pour surexprimer et éliminer les gènes candidats dans les cellules souches neurales reste difficile dans le domaine.

Les méthodes traditionnelles de transfection pour l’administration de gènes se sont avérées efficaces dans les cellules du système nerveux central. De plus, ces méthodes affectent la viabilité et la fonctionnalité des cellules. Ainsi, le raffinement des approches alternatives est crucial pour manipuler l’expression des gènes dans les cellules souches neurales.

Avec ce protocole, nous présentons un système de nucléofection amélioré qui atteint une grande efficacité de livraison de gènes dans les cultures de cellules souches neurales de la zone sous-ventriculaire murine adulte, ainsi que des taux de survie supérieurs à 80%