Pour commencer l’extraction du cerveau de la souris correctement euthanasiée, après avoir séparé la tête du reste du corps, exposez le cerveau en coupant d’abord le crâne le long de la suture sagittale. À l’aide d’une pince à épiler fine, retirez les os. Veillez à ne pas endommager le tissu cérébral sous le crâne lors de cette étape.
À l’aide d’une spatule, extrayez soigneusement le cerveau du crâne. Placez-le dans une plaque à 12 puits contenant de la solution saline tamponnée au phosphate Dulbecco’s froide, ou DPBS. Ensuite, transférez tout le cerveau sur le tampon de silicium, où la dissection aura lieu.
À l’aide d’un scalpel, vous pouvez retirer le bulbe olfactif situé à l’extrémité rostrale du cerveau et le cervelet situé dans la partie dorlotée tout en conservant la partie centrale du cerveau contenant les deux ventricules latéraux. Ensuite, divisez le cerveau le long de la fissure longitudinale en deux hémisphères avant de procéder à la dissection des deux hémisphères séparément. En travaillant avec un hémisphère, réorientez-le de manière à ce que la zone médiane soit tournée vers le haut.
Ouvrez le cerveau le long de la ligne du corps calleux, séparant le cortex et le striatum de l’hippocampe, du septum et du diencéphale, exposant ainsi les ventricules latéraux. Retirez l’hippocampe, le septum et l’encéphale, en suivant la limite ventrale des ventricules. Ensuite, retirez le tissu au-delà des extrémités rostrale et du dorlotement de la zone sous-ventriculaire ou SVZ, et du cortex, en suivant le corps calleux.
Inclinez le tissu de manière à ce que la SVZ soit tournée vers le côté. Retirez le tissu striatal sous la SVZ pour obtenir un mince morceau de tissu contenant les cellules souches neurales. Stockez les deux SVZ disséquées de la souris dans une plaque à 12 puits contenant des DPBS froids jusqu’au traitement des tissus.
