This work was supported by Grants-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) (26461185 and 25460137).

NOTE: Cette étude a été approuvée par les comités d&#39;éthique appropriés. 1. Culture primaire des fibroblastes pulmonaires humains <ol><li> Collecte de tissu pulmonaire: <ol><li> Obtenir des échantillons humains de tissus pulmonaires de la salle d&#39;opération chirurgicale directement. Prélever environ 1 cm 3 pâtés de maisons de tissus pulmonaires cancéreuses et non-cancéreuses, avec l&#39;échantillon non-cancéreuse recueillies aussi loin de la tumeur que possible. </li><li> Suspendre les échantillons dans du milieu de Eagle modifié par Dulbecco (DMEM) supplémenté avec 100 unités / ml de pénicilline, 100 ug / ml de streptomycine et 0,25 pg / ml d&#39;amphotéricine B (milieu sans sérum). Maintenir les échantillons en suspension dans 50 ml tubes stériles et de transférer au laboratoire. NOTE: Les fibroblastes sont hautement migratoires et proliférative rapport à d&#39;autres types de cellules, comme épithéliales, endothéliales et les cellules musculaires lisses. Le procédé de l&#39;excroissance tire profit de ces caractéristiques de fibroblastes, et outgrocellules de l&#39;aile de coupes de tissus sont abondants dans les fibroblastes. Après plusieurs passages cellulaires, d&#39;autres types de cellules ne parviennent pas à survivre et à se propager dans du DMEM avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS), ce qui entraîne dans des cultures cellulaires de fibroblastes purifiés. Les cellules pourraient être utilisées 3-7 passages suivants culture primaire. </li></ol></li><li> Explantation culture et de conditionnement pour excroissance de cellules: <ol><li> Effectuer culture primaire de fibroblastes en utilisant un protocole indiqué précédemment avec des modifications 5. </li><li> Dans le laboratoire, placer l&#39;échantillon de tissu sur une boîte de 10 cm de culture de tissu sans milieu de culture et les couper en petites sections ~ 2-3 mm de taille à l&#39;aide de pinces stériles et un scalpel. Pendant ce processus, éviter de faire la section sèche, sinon l&#39;efficacité de l&#39;excroissance des cellules est altérée. </li></ol></li><li> La séparation de la couche de cellules epitheliales et du tissu conjonctif: <ol><li> Faire tremper les coupes de tissus de coupe dans un milieu de culture contenant 2000 PU / ml dispase I et la culture pendant 16 heures à 4 ° C. &lt;/ Li&gt; <li> Transférer les sections de tissu à plat, et on sépare la couche de cellules épithéliales à partir du tissu conjonctif adjacent. Traiter les sections dans un banc propre pour éviter la contamination des micro-organismes. NOTE: Si la culture primaire de cellules épithéliales est nécessaire, effectuer l&#39;étape 1.3. Si seulement les fibroblastes sont d&#39;être isolé, omettre l&#39;étape 1.3, car les Explant et cellulaires passages ultérieurs sont défavorables pour les cellules épithéliales, qui donnent populations de fibroblastes purifiés. </li></ol></li><li> Fixation des coupes de tissus: <ol><li> Émincer les tissus en morceaux de 1 mm à l&#39;aide de deux scalpels. Si les pièces ne sont pas assez petit, elles se détachent plus facilement de l&#39;antenne, et les cellules ne parviennent pas à dépasser sur la surface de la boîte. </li><li> Passer petites sections de tissu pulmonaire les unes des autres pour maintenir une zone vide entourant chaque pièce. Assurez-rayures sur la surface de la boîte de culture tissulaire en utilisant une lame de scalpel pour faciliter la fixation des coupes de tissus. REMARQUE: Grattersemble également faciliter l&#39;excroissance des cellules, fournissent des pistes le long de laquelle les cellules peuvent migrer. <ol><li> Alternativement, placer des morceaux de tissus hachés individuellement dans chaque puits d&#39;une plaque à 6 puits, et les couvrir avec une lamelle. Fixez la lamelle à la surface de la plaque avec de la graisse de silicone. </li><li> Placez la graisse de silicone à deux points 1,5 cm à part dans chaque puits en utilisant une goupille stérile. Couverture des morceaux de tissu améliore l&#39;efficacité de l&#39;excroissance des cellules et la propagation des cellules après plusieurs passages. </li></ol></li></ol></li><li> Explant ultérieure: <ol><li> Ajouter délicatement milieu de culture à l&#39;antenne avant les coupes de tissus se dessèchent, aussi efficace excroissance cellulaire est perdu pour la plupart si les échantillons sécher. Ne versez pas le support trop rapidement que les coupes de tissus seraient détacher. </li><li> des cellules de culture dans du DMEM avec 10% de FBS. Utiliser suffisamment de support pour couvrir tout le tissu, mais pas trop qu&#39;il permet flottant, comme la flottabilité supplémentaire favorise le détachement duplat. </li></ol></li><li> Cellule passage: <ol><li> Manipulez le milieu de culture avec soin en tout temps que les mouvements répétés de la boîte de culture peuvent conduire au détachement des sections de tissus. </li><li> Placez les boîtes de culture dans un incubateur à 37 ° C pendant 5-7 jours. Actualiser le milieu tous les deux jours, et de gérer les boîtes de culture minimale pendant les moyennes changements. Fibroblastes grandissent à partir du bord des sections de tissus au cours des prochaines semaines. REMARQUE: Après ~ 2-3 semaines, les fibroblastes excroissance presque atteignent la confluence, en fonction de la quantité d&#39;aire de surface. </li><li> Laver les cellules avec PBS 1x, et ajouter 1 ml de trypsine I de la plaque. </li><li> Après trypsinisation, détacher les cellules en utilisant 9 ml de DMEM supplémenté avec 10% de FBS. Recueillir les cellules en suspension dans le milieu dans un tube de 10 ml, ainsi que les coupes de tissu. Après centrifugation pour former des pastilles de cellules, remettre en suspension les culots obtenus dans le nouveau milieu. </li><li> Ensemencer les cellules et des coupes de tissus sur un nouveau culplat de ture, à quel point les tissus ne parviennent pas à fixer à la boîte tandis que les cellules adhèrent et se développent. Le lendemain, retirez les morceaux de tissu flottant par aspiration, et de changer le milieu. Fibroblastes attachés propagent avec les cultures suivantes. </li></ol></li></ol> 2. Trois dimensions Co-culture de fibroblastes de poumon humain et les cellules cancéreuses <ol><li> Préparation des cellules et des réactifs: <ol><li> Utiliser environ 2 x 10 5 cellules épithéliales et 2,5 x 10 5 fibroblastes par puits. Préparation de collagène de type IA (3 mg / ml, pH 3), FBS (100%), un tampon de reconstitution (NaOH 50 mM, 260 mM NaHCO 3 mM, HEPES 200), 5x DMEM, DMEM complété avec 10% de FBS pour la culture des fibroblastes, et un milieu de co-culture en 3D (un mélange 1: de milieu de culture de fibroblastes et une milieu de culture pour les cellules cancéreuses). </li><li> Des cellules d&#39;adénocarcinome du poumon A549, la culture des fibroblastes et la co-culture 3D A549 dans du DMEM supplémenté avec 10% de FBS. </li></ol></li><li> Collagène gel formation: <ol><li> Laver les fibroblastes cultivés sur 10 cm plat avec 1x PBS, et ajouter 1 ml de trypsine I de la plaque. Après trypsinisation de ~ 5 min à 37 ° C, de détacher les cellules en utilisant 9 ml de DMEM supplémenté avec 10% de FBS. Recueillir les cellules en suspension dans le milieu dans un tube de 10 ml, et les centrifuger à 200 à 300 xg pour former des pastilles cellulaires. </li><li> Remettre en suspension les pastilles résultantes à 100% de FBS à une densité de 5 x 10 5 / ml. </li><li> Préparer le gel de collagène sur de la glace. Refroidir les réactifs, pipettes et les tubes dans un réfrigérateur avant la procédure suivante. Même sur de la glace, le mélange se solidifie dans une certaine mesure, et le volume total est inférieur à la somme de tous les constituants. </li><li> Dans chaque puits, de préparer le gel de collagène en mélangeant 0,5 ml de suspension de fibroblastes (2,5 x 10 5 cellules) de FBS, 2,3 ml de collagène de type IA, 670 ul de DMEM 5x, et 330 ul de tampon de reconstitution. Laisser les gels de mettre facilement à la température ambiante. <ol><li> Pipette vigoureusement pour assurer un km homogènexture. Éviter de créer des bulles pendant le processus de pipetage. </li></ol></li><li> Ajouter le mélange (3 ml) à chaque puits d&#39;une plaque à 6 puits et laisser gélifier dans l&#39;incubateur à 37 ° C sans perturbation pendant 30 à 60 min. </li></ol></li><li> culture de cellules de cancer sur le gel de collagène: <ol><li> Effectuer co-culture en trois dimensions en utilisant un protocole indiqué précédemment, avec les adaptations 6. </li><li> Resuspendre les cellules cancéreuses dans le milieu de co-culture en 3D (ou dans du DMEM avec 10% de FBS dans le cas des cellules A549) à une densité de 1 x 10 5 / ml. </li><li> Verser 2 ml de la solution de cellules remis en suspension (2 x 10 5 cellules) sur la surface de chaque gel. Modifier le nombre de cellules des cellules cancéreuses ou des fibroblastes en co-culture en fonction des conditions expérimentales. </li></ol></li><li> Gel contraction: <ol><li> Incuber des gels pendant une nuit à 37 ° C de sorte que les cellules cancéreuses peuvent adhérer au gel de collagène. Détachez chaque gel, et de générer une «culture flottant» dans chaque puits of la plaque de 6 puits. NOTE: En utilisant une culture flottante, divers changements dans la taille du gel sont induits par une tension mécanique et la dégradation du collagène, qui sont médiés par l&#39;interaction cellulaire entre les cellules cancéreuses et des fibroblastes co-cultivés. </li><li> Utilisez une aiguille 21 G angle ou petite spatule pour séparer chaque gel à partir du bord du puits. Tous les 2-3 jours, rafraîchir les puits avec 2 ml de 3D milieu de co-culture. Mesurer la taille de chaque gel tous les jours pendant 5 jours. </li></ol></li><li> L&#39;analyse des gels de collagène: <ol><li> Mesure de la teneur en collagène de chaque gel en utilisant des méthodes de quantification de collagène, tels que le dosage Sircol. Effectuer une analyse transcriptomique ou RT-PCR quantitative après avoir recueilli l&#39;ARN à partir des gels 5. </li></ol></li></ol> 3. Air-liquide Interface Culture et Invasion Assay <ol><li> Après la culture des gels de collagène à 37 ° C pendant 5 jours, exposer les gels contractés à l&#39;air en les plaçant sur un maillage (70 um taille des pores) dans la nouvelle 6-plaques à puits. Faire le maillage du tamis cellulaires disponibles dans le commerce utilisés pour la cytométrie de flux. </li><li> Versez doucement chaque puits avec 11 ml de 3D milieu de co-culture. </li><li> Placez les gels sur le maillage en utilisant une cuillère stérile, et retirer tout support restant dans les gels. A cette condition, gels immerger dans le milieu tandis que d&#39;exposer la surface supérieure du gel à l&#39;air. Définir cette condition de la culture comme interface air-liquide. REMARQUE: Après 5-7 jours de culture en maintenant l&#39;interface air-liquide à 37 ° C dans l&#39;incubateur, les cellules cancéreuses invasives migrent dans le gel. Selon le type de cellule et à la suite d&#39;interactions cellulaires, des degrés variables de changement morphologique cellulaire dans les cellules cancéreuses sont induits par la culture d&#39;interface air-liquide. </li><li> Pour l&#39;évaluation histologique, fixer le gel dans une solution de formol nuit à la température ambiante et l&#39;intégrer dans de la paraffine. Colorer sections verticales (4 um) avec hématoxyline et l&#39;éosine (H &amp; E). Effectuer une analyse immunohistochimique on les sections 4. </li></ol>

<ol>
	<li>Strell, C., Rundqvist, H., Ostman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblasts-a+key+host+cell+type+in+tumor+initiation,+progression,+and+metastasis.">Fibroblasts-a key host cell type in tumor initiation, progression, and metastasis.</a> Ups. J. Med. Sci. 117 (2), 187-195 (2012).</li><li>Augsten, M., H&#228;ggl&#246;f, C., Pe&#241;a, C., Ostman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+digest+on+the+role+of+the+tumor+microenvironment+in+gastrointestinal+cancers.">A digest on the role of the tumor microenvironment in gastrointestinal cancers.</a> Cancer Microenviron. 3 (1), 167-176 (2010).</li><li>Augsten, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-Associated+Fibroblasts+as+Another+Polarized+Cell+Type+of+the+Tumor+Microenvironment.">Cancer-Associated Fibroblasts as Another Polarized Cell Type of the Tumor Microenvironment.</a> Front. 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Res. 89 (11), 1315-1321 (2010).</li><li>Ikebe, D., Wang, B., Suzuki, H., Kato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+keratinocyte+stratification+by+a+dominant+negative+JunB+mutant+without+blocking+cell+proliferation.">Suppression of keratinocyte stratification by a dominant negative JunB mutant without blocking cell proliferation.</a> Genes Cells. 12 (2), 197-207 (2007).</li><li>Orimo, A., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+fibroblasts+in+cancer:+a+novel+tumor-promoting+cell+type.">Stromal fibroblasts in cancer: a novel tumor-promoting cell type.</a> Cell Cycle. 5 (15), 1597-1601 (2006).</li><li>Paulsson, J., Micke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+relevance+of+cancer-associated+fibroblasts+in+human+cancer.">Prognostic relevance of cancer-associated fibroblasts in human cancer.</a> Semin. Cancer Biol. 25, 61-68 (2014).</li><li>Navab, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+gene-expression+signature+of+carcinoma-associated+fibroblasts+in+non-small+cell+lung+cancer.">Prognostic gene-expression signature of carcinoma-associated fibroblasts in non-small cell lung cancer.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 108 (17), 7160-7165 (2011).</li><li>Herrera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+cancer-associated+fibroblasts+from+human+colon+tumors+shows+specific+prognostic+gene+expression+signature.">Functional heterogeneity of cancer-associated fibroblasts from human colon tumors shows specific prognostic gene expression signature.</a> Clin. Cancer Res. 19 (21), 5914-5926 (2013).</li><li>H&#228;ggl&#246;f, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+PDGFRbeta+expression+in+prostate+tumors+and+non-malignant+prostate+tissue+predicts+prostate+cancer+survival.">Stromal PDGFRbeta expression in prostate tumors and non-malignant prostate tissue predicts prostate cancer survival.</a> PLoS One. 5 (5), e10747 (2010).</li><li>Saito, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forkhead+box+F1+regulates+tumor-promoting+properties+of+cancer-associated+fibroblasts+in+lung+cancer.">Forkhead box F1 regulates tumor-promoting properties of cancer-associated fibroblasts in lung cancer.</a> Cancer Res. 70 (7), 2644-2654 (2010).</li><li>Kalluri, R., Zeisberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblasts+in+cancer.">Fibroblasts in cancer.</a> Nat. Rev. Cancer. 6 (5), 392-401 (2006).</li><li>Calvo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanotransduction+and+YAP-dependent+matrix+remodelling+is+required+for+the+generation+and+maintenance+of+cancer-associated+fibroblasts.">Mechanotransduction and YAP-dependent matrix remodelling is required for the generation and maintenance of cancer-associated fibroblasts.</a> Nat. Cell Biol. 15 (6), 637-646 (2013).</li><li>Horie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histamine+induces+human+lung+fibroblast-mediated+collagen+gel+contraction+via+histamine+H1+receptor.">Histamine induces human lung fibroblast-mediated collagen gel contraction via histamine H1 receptor.</a> Exp. Lung Res. 40 (5), 222-236 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

CAF forment une composante majeure de l&#39;ECM entourant les cellules cancéreuses et non seulement fournir un échafaudage pour la tumeur, mais aussi participer activement au développement de la tumeur 7. L&#39;accumulation de preuves dénoue l&#39;impact de la CAF ou de leurs molécules apparentées sur le pronostic éventuelle, en soulignant le rôle crucial de la progression tumorale CAF médiation 8. Dans l&#39;étude précédente, nous avons utilisé la méthode...

Cancer tissue can be perceived as a type of organ, which evolves through close interactions between the cancer and the tumor stromal microenvironment, composed of cancer-associated fibroblasts (CAFs), immune cells, tumor vessels and the extracellular matrix (ECM). CAFs are the major source of soluble factors (cytokines, growth factors and chemokines) that exert mitogenic, pro-migratory and pro-invasive effects on cancer cells. They also stimulate tumor vessel formation and recruit precursor cells, such as bone marrow-derived cells (BMDC). Activated CAFs are involved in the production and remodeling of the ECM, thereby promoting the growth and spread of cancer cells1. CAFs also provide a niche that facilitates tumor cell colonization and metastasis and are capable of conferring stem cell phenotypes onto neighboring cancer cells. Pathological observations suggest that stromal reactions or fibrotic changes in cancer tissues are indicative of a poor prognosis. Recent studies have also demonstrated that tumor stromal features, such as the gene signature, can predict patient prognosis. Furthermore, CAF-derived factors can modulate sensitivity to chemotherapy, highlighting the role of CAFs in determining drug sensitivity and resistance2.
As CAFs play a multifaceted role in the promotion of tumor progression through signaling pathways that mediate interactions between CAFs and different cell types within the tumor microenvironment, they have attracted increasing attention as novel targets for cancer therapies. The heterogeneity of the cell populations within the cancer microenvironment presents an obstacle for targeting CAFs. Several markers for CAFs have been proposed, such as &#945;-smooth muscle actin (&#945;-SMA), fibroblast activation protein (FAP), and fibroblast specific proten-1 (FSP-1: also called S100A4); however, these molecular markers are not specific for distinguishing CAFs from other cells present in non-cancerous tissues3. Therefore, further studies are needed to obtain more knowledge about the specific properties of CAFs. To this end, it is informative to characterize primary cultured CAFs compared with patient-matched normal fibroblasts.
Recently, analyses on patient-derived CAFs have been reported in several cancer types, revealing unique gene expression patterns and cell behaviors compared with fibroblasts derived from non-cancerous tissues. Using isolated CAFs from human lung cancer tissues, we developed a three-dimensional co-culture method, enabling us to evaluate the properties of lung CAFs. In this model, we investigated the effects of the CAFs on lung cancer cell invasion, proliferation and collagen gel contraction, which experimentally recapitulated the tumor-promoting roles of lung CAFs4.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1035">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:267px;">Name</td>
			<td style="width:297px;">Company</td>
			<td style="width:471px;">Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">DMEM</td>
			<td style="width:297px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:471px;">D5796</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">FBS</td>
			<td style="width:297px;">GIBCO</td>
			<td style="width:471px;">10437</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Collagen type IA</td>
			<td style="width:297px;">Nitta gelatin Inc.</td>
			<td style="width:471px;">CELL-1A</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Reconstitution buffer</td>
			<td style="width:297px;">Nitta gelatin Inc.</td>
			<td style="width:471px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Cover slip</td>
			<td style="width:297px;">NUNC</td>
			<td style="width:471px;">174934</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Silicone grease</td>
			<td style="width:297px;">Dow Corning Toray</td>
			<td style="width:471px;">High vacuum grease</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Dispase I</td>
			<td style="width:297px;">WAKO</td>
			<td style="width:471px;">386-02271</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">6-well plate</td>
			<td style="width:297px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:471px;">353046</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:267px;">Cell strainer (70 &#956;m)</td>
			<td style="width:297px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:471px;">352350</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional co-culture model for tumor-stromal interaction

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal cells. The tumor microenvironment is comprised of a variety of cell types, such as fibroblasts, immune cells, vascular endothelial cells, pericytes and bone-marrow-derived cells, embedded in the extracellular matrix (ECM). Cancer-associated fibroblasts (CAFs) have a pro-tumorigenic role through the secretion of soluble factors, angiogenesis and ECM remodeling. The experimental models for cancer cell survival, proliferation, migration, and invasion have mostly relied on two-dimensional monocellular and monolayer tissue cultures or Boyden chamber assays. However, these experiments do not precisely reflect the physiological or pathological conditions in a diseased organ. To gain a better understanding of tumor stromal or tumor matrix interactions, multicellular and three-dimensional cultures provide more powerful tools for investigating intercellular communication and ECM-dependent modulation of cancer cell behavior. As a platform for this type of study, we present an experimental model in which cancer cells are cultured on collagen gels embedded with primary cultures of CAFs.

Cette méthode de co-culture, imitant le micro-environnement de la tumeur, est un outil utile pour étudier les interactions entre les cellules cancéreuses et les fibroblastes incorporés dans des gels de collagène. Dans l&#39;étude précédente, trois paramètres ont été évalués dans ce modèle expérimental: contraction du gel de collagène, l&#39;invasion des cellules cancéreuses et les changements morphologiques. la prolifération des cellules du cancer a également été estimée en utilisant une immunocolo...

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Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Here we present a protocol to co-culture in three-dimensions, which is useful for investigating multicellular interactions and extracellular matrix-dependent modulation of cancer cell behavior. In this experimental model, cancer cells are cultured on collagen gels embedded with human cancer-associated fibroblasts.

En trois dimensions modèle de co-culture tumeur stromale-Interaction

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

three-dimensional-co-culture-model-for-tumor-stromal-interaction

Research

JoVE Journal

Medicine

17.2K vues.  The University of Tokyo. Here we present a protocol to co-culture in three-dimensions, which is useful for investigating multicellular interactions and extracellular matrix-dependent modulation of cancer cell behavior. In this experimental model, cancer cells are cultured on collagen gels embedded with human cancer-associated fibroblasts.