Ce travail a été soutenu par le NIH accorde CA163640, CA166590 et AG041250 à LC.

Les procédures décrites ci-dessous ont été approuvés par le Comité institutionnel de protection des animaux et l&#39;utilisation (IACUC) de l&#39;Université Ohio State. 1. Préparation de l&#39;environnement enrichi Avant Souris Bricolage <ol><li> Le nettoyage et le maintien d&#39;instruments. <ol><li> Exécutez le grand bac d&#39;enrichissement (120 cm x 90 cm x 76 cm) par un lavage de la cage. Un protocole typique de l&#39;animalerie de lavage de la cage comprend 5 à 6 cycles de lavage, avec le dernier cycle atteindre 82 ºC. L&#39;ensemble de lavage doit durer environ 40 minutes. Air-sécher le bac. <ol><li> Si le grand bac d&#39;enrichissement, et tous les autres instruments de logement, ne peuvent pas être envoyés par le biais de lavage des cages, puis pulvériser et essuyez l&#39;intérieur du bac avec des désinfectants sporicides en suivant les instructions du fabricant. Essuyez le bac avec une serviette imbibée d&#39;eau du robinet de papier ou 30% d&#39;éthanol et sécher avec une serviette en papier pour se débarrasser de toute odeur du désinfectant précédente. </li></ol></li><li> Utilisez plastube tic, igloos avec des roues de type soucoupe, et d&#39;autres divers jouets en plastique pour huche comme dans l&#39;EE. Lavez ces jouets par un lavage de la cage. Si vous ne disposez pas d&#39;accès à un suivi étape de lavage de la cage 1.1.1.1. </li><li> Utilisez roues en métal de fonctionnement dans le EE. Lavez les roues par un lavage de la cage. Si la peinture sur les roues commence à disparaître de sorte que la roue devient bruyant quand les animaux courent sur elle, appliquer une quantité petite gelée de pétrole à l&#39;endroit où la roue et axel connecter. </li><li> Utilisez des rondins de bois dans le EE. Nettoyez les journaux en enlevant toute la literie ou d&#39;autres débris à la main. Ensuite stériliser les journaux en leur autoclavage sur un cycle ou textile cycle de séchage, qui atteint une température de 121 ° C pendant 15 min. </li><li> Utilisez cages entre les dimensions de 29 cm x 18 cm x 12,5 cm et 30,5 cm x 19 cm x 14 cm de tenir un fil d&#39;alimentation et de boire rack.Cut un trou d&#39;au moins 5 cm de diamètre sur le front-fond de la cage pour souris à entrer et sortir de l&#39;EE de. Nettoyez ces cages d&#39;alimentation par le biais de lavage de la cage. </li></ol></li><li> Configuration de l&#39;environnement <ol><li> Verser épi de maïs de la literie des animaux de laboratoire ¼ de pouce dans le grand bac d&#39;enrichissement. Couvrez la surface du plancher du bac à une profondeur de 2-2,5 cm avec une literie. </li><li> Placez deux ou trois journaux dans un coin de la poubelle. Placez les bûches dans le coin pour séquestrer une superficie d&#39;environ 1 225 cm 2. Dans le domaine séquestré par les journaux, placer trois igloos avec des roues de soucoupe sur le dessus. Assurez-vous que les roues ne touchent pas les parois du bac, les journaux, ou l&#39;autre, de sorte qu&#39;il ya assez de place pour les roues de tourner librement. </li><li> Assemblez le tube en plastique de sorte que la branche multiples bras de la pièce de liaison centeral. Placer ce tube dans le milieu de la poubelle. </li><li> Dans deux coins du casier, placer une cage de chaque alimentation rempli avec le même bac que la literie, et le trou à l&#39;avant de la cage d&#39;alimentation doit être orientée vers le centre de la cellule. En plus de ces cages alimentant un des fils de la nourriture et de l&#39;eau propredoit être placé pour tenir la nourriture et de l&#39;eau. Ne placez pas de couvercle sur la cage. Mettre nourriture et de l&#39;eau dans les fils de la cage. </li><li> Passer trois roues en métal dans le bac, mais pas tous les uns à côté des autres. Les trois types de roues différentes sont une roue de 11,5 cm, une roue de 20,5 cm, et une roue de 28 cm. Ensuite, placez 4-5 plus jouets en plastique ou des tunnels huche comme tout le coffre d&#39;enrichissement. </li><li> Couvrir le bac avec du papier filtre micro-isolateur. Utiliser des clips liant pour couper le papier filtre à la poubelle. </li><li> La nouveauté est important d&#39;EE. Utilisez cette configuration que le cadre de l&#39;EE et de varier le placement des cages précitées, des objets et des jouets pour créer un nouvel environnement pour les animaux. </li></ol></li></ol> 2. Bricolage les animaux <ol><li> Élever des animaux pour des expériences en matière de logement de laboratoire régulière et non EE. Eventuellement, placer les animaux dans EE dès le 21 jours d&#39;âge sur le sevrage. Génotype et l&#39;oreille poinçon / tag animaux avant logements EE. </li><li> Lorsque vous placezanimaux dans la poubelle de l&#39;enrichissement d&#39;une cage standard, placer la cage dans le bac sur le côté afin que les animaux puissent se déplacer librement dans la cage standard pour le bac d&#39;enrichissement. Ne laissez pas les matériaux de nidification doivent être transférés dans le bac d&#39;enrichissement. </li><li> Maison 10-20 animaux du même âge, le sexe, et la souche génétique dans l&#39;EE. </li></ol> 3. Maintien de l&#39;Environnement et Observation de la souris au cours d&#39;études <ol><li> Tous les jours <ol><li> Tranquillement observer les animaux des signes de maladie ou de détresse. Si nécessaire, gérer en douceur les animaux d&#39;inspecter davantage les conditions de santé. Enregistrez observations anormales et consulter un technicien de la santé ou du personnel vétérinaire si les conditions affiche des animaux qui nécessitent l&#39;enlèvement de l&#39;expérience. </li><li> Fournir un traitement topique d&#39;une pommade anti-biotique triple pour les petites blessures ou des croûtes. Si un animal doit être retiré en raison d&#39;une maladie chronique ou d&#39;une blessure, enlever l&#39;animal de l&#39;expérience pour l&#39;euthanasie. Si les animauxrépondre à des critères d&#39;élimination précoce pour les recherches comité de protection des animaux ou de la supervision vétérinaire, ne retournez pas les animaux revenir à EE. </li></ol></li><li> Deux fois par semaine <ol><li> Vérifiez les niveaux d&#39;aliments et d&#39;eau. Assurer que les aliments et l&#39;eau va durer pour les 3-4 prochains jours. Redressez-roues de roulement et des jouets d&#39;enrichissement de sorte qu&#39;ils sont dispersés et peuvent être utilisés par les souris. Remplacer toute trop sale. </li></ol></li><li> Hebdomadaire <ol><li> Remplacer les bouteilles d&#39;eau avec des bouteilles d&#39;eau potable. Réorganiser dispositifs d&#39;enrichissement d&#39;une manière qui suit l&#39;installation à la section 1.2. encore est différente de la configuration de la semaine précédente. NOTE: Si une expérience exige que les animaux à être retirées de l&#39;environnement enrichi pour une activité (enregistrement poids corporel, le prélèvement de sang, test de comportement, etc.), il est préférable de réorganiser l&#39;environnement tandis que les animaux sont loin de la poubelle d&#39;enrichissement. </li><li> Nettoyez les cages d&#39;alimentation dans l&#39;EE à la main ou l&#39;envoyer par lavage de la cagecomme détaillé dans la section 1.1.5. Remplacer les grilles qui retiennent la nourriture et de l&#39;eau avec des grilles propres ainsi. </li><li> Suivez les instructions dans la section 2.2. en plaçant les animaux avant l&#39;enrichissement. Contrôle sur place le reste de la grande poubelle d&#39;enrichissement et propre, si nécessaire, en creusant la litière sale et la propagation vers le bas nouvelle litière propre. </li></ol></li><li> Bi-hebdomadaire <ol><li> Tout en effectuant l&#39;élevage hebdomadaire, nettoyer les jouets à la main ou envoyer par le biais de lavage des cages comme détaillé dans la section 1.1.2. Si nécessaire, placer la souris dans une cage micro-isolateur standard pour le temps nécessaire à nettoyer. </li></ol></li><li> Mensuel <ol><li> Nettoyez la majorité de la litière en déplaçant jouets d&#39;enrichissement et de l&#39;alimentation des cages et creusant la litière. Remplacer la litière fraîche. Assurez-vous que il ya un pouce de la literie dans tous les domaines de la cage. Si nécessaire, placer la souris dans une cage micro-isolateur standard pour le temps nécessaire à nettoyer. </li></ol></li><li> Chaque TroisMois (ou à la fin de l&#39;expérience) <ol><li> Enlevez toute la literie et les jouets et nettoyer et désinfecter le bac d&#39;enrichissement comme décrit au paragraphe 1.1.1. Si l&#39;expérience est en cours, la remplacer par une nouvelle literie, alimentation cages, assortiment de jouets et revenir ensuite les souris à la poubelle. </li></ol></li><li> Désinfecter l&#39;ensemble du bac d&#39;enrichissement plus fréquemment que tous les trois mois, si nécessaire par l&#39;institution de recherche dans lequel l&#39;EE est logé. Si cela est nécessaire et un autre grand récipient d&#39;enrichissement est disponible, mis en place le récipient d&#39;enrichissement supplémentaire comme indiqué à la section 1.2. et de transférer les animaux sur le nouvel emballage, tandis que la précédente est en cours de nettoyage. </li></ol> 4. Le contrôle des conditions de logement <ol><li> Animaux Maison dans le groupe de contrôle dans des cages de micro-isolateur de dimensions 30,5 cm x 19 cm x 14 cm. Inclure une grille dans la cage pour la tenue de la nourriture et une bouteille d&#39;eau, si la cage est pas relié à un système d&#39;arrosage automatique. </li><li>Fournir la même literie épi de maïs dans la cage de commande est en EE. Fournir un 4 cm x 4 cm nestlet pour les souris pour faire un nid sur. </li><li> Remplacez et / ou nettoyer les cages, l&#39;alimentation des fils, de la nourriture et de l&#39;eau une fois par semaine. Nettoyer les cages et grilles par lavage de la cage ou aussi détaillée dans la section 1.1.1.1. Nettoyez les cages plus souvent si les animaux urine plus fréquemment ou si les fuites d&#39;eau potable sur la literie. </li><li> Surveiller la santé des animaux dans le logement de contrôle quotidien. Assurer les animaux ont beaucoup de nourriture et d&#39;eau. </li><li> Maison 3 ~ 5 souris du même genre dans la cage régulière de la souris. Ne fournit pas un jouet, du tube ou de la huche dans la cage. </li><li> Techniciens de la santé et de laboratoire de l&#39;installation de protection des animaux de laboratoire institutionnels peuvent fournir l&#39;élevage de ces souris témoins. </li><li> Gardez les animaux sur un cycle de 12 heures de lumière / obscurité est comme pour les souris en EE. </li></ol>

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Med. 5 (4), 448-453 (1999).</li><li>Cao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+and+genetic+activation+of+a+brain-adipocyte+BDNF/leptin+axis+causes+cancer+remission+and+inhibition.">Environmental and genetic activation of a brain-adipocyte BDNF/leptin axis causes cancer remission and inhibition.</a> Cell. 142 (1), 52-64 (2010).</li><li>Cao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+to+brown+fat+phenotypic+switch+induced+by+genetic+and+environmental+activation+of+a+hypothalamic-adipocyte+axis.">White to brown fat phenotypic switch induced by genetic and environmental activation of a hypothalamic-adipocyte axis.</a> Cell Metab. 14 (3), 324-338 (2011).</li></ol>

Les auteurs ne déclarent aucun conflit d&#39;intérêt.

Les effets robustes de l&#39;EE sur l&#39;expression des gènes dans le cerveau, une diminution de l&#39;adiposité et de la croissance du cancer chez la souris dépendent fortement de la capacité du chercheur de maintenir le nouvel environnement et à traiter les animaux d&#39;une manière qui favorise l&#39;activité physique, l&#39;interaction sociale, et des difficultés cognitives, encore ne pas détresse des animaux. Il ya deux étapes procédurales les plus importantes à retenir. Tout d&#39;abord, pensez à modifier le placement des jouets, des objets et des cages chaque semaine. Même si les jouets et objets pourraient être les mêmes à la semaine précédente, les souris perçoivent l&#39;environnement comme nouvelle. Changez les jouets et objets eux-mêmes avec différents tous les deux semaines. Deuxièmement, pensez à garder l&#39;environnement propre. Si la litière souillée ne reçoit pas enlevé, les niveaux d&#39;azote accrue peut être un facteur de stress pour les animaux. En outre, il existe de nombreuses techniques à noter dans ce protocole d&#39;EE. L&#39;utilisation de jouets et différents différents ou uniquesconceptions de labyrinthes de tubes en plastique est encouragée. L&#39;environnement peut être difficile, mais ne devrait pas constituer une menace pour la santé des animaux. De plus, méfiez-vous des jouets qui sont dysfonctionnels, parce que les jouets dysfonctionnelles augmentent le risque des membres de la souris se faire prendre, ou pourraient être toxiques pour les animaux si elle est consommée par la mastication sur elle. Une constante à l&#39;EE est l&#39;utilisation de trois roues de soucoupe sur le dessus de igloos, séquestrés à un coin ou un côté de la poubelle par 2-3 logs. Cette configuration de courir derrière les soucoupes journaux a été présente dans toutes nos études d&#39;enrichissement. En termes d&#39;utilisation et le placement des objets, la description de la disposition ci-dessus est un imprimé bleu fondamental de la configuration de l&#39;EE. Variation de la configuration avec ce cadre fondamental de tubes en plastique, roues de roulement, la course de soucoupes, les cages et les journaux devraient fournir un environnement de roman suffisante pour reproduire les résultats rapportés. Si vous travaillez avec des animaux transgéniques qui ont le diabète ou autre métaboliquemaladies, accorder une attention particulière à la consommation de nourriture et d&#39;eau pour assurer que les animaux ne manquent pas de nourriture et d&#39;eau. Si les animaux sont atteints de diabète, ils vont uriner plus, de sorte que la litière du boîtier de EE peut être nécessaire de place vérifié et nettoyé plus fréquemment. Les places dans le boîtier de l&#39;EE qui ont besoin de literie enlevé le plus souvent sont les coins. Rappelez-vous de régler les roues et d&#39;autres jouets, de sorte qu&#39;ils peuvent être utilisés par les animaux. Les animaux sont capables d&#39;exécuter des roues de soucoupe dans la literie et frapper roues fonctionnant plus. Si les animaux sont jeunes, de 3 à 5 semaines d&#39;âge, ils peuvent creuser sous les cages à l&#39;EE et se cachent ensemble sous là, laissant le chercheur désemparés quant à l&#39;endroit où les animaux sont. Lors du retrait de la litière souillée, en remplacement de jouets, ou le nettoyage des cages, il est suggéré de mettre les animaux dans une cage standard propre afin de ne pas les stresser tout en ajustant leur environnement. Il est plus facile d&#39;obtenir tous les animaux dans une cage si elles ont moins d&#39;endroits pour se cacher dans le environnement. Par conséquent, de retirer les jouets avant de séquestrer les animaux dans une cage rend le processus plus facile. En outre, ne placez pas plus de 5-6 animaux dans une seule cage standard en attendant le nettoyage ou ajuster leur environnement EE. Les animaux mâles dans EE peuvent être agressifs en particulier lorsque EE est initié à l&#39;âge adulte. Par conséquent, il est important d&#39;observer l&#39;environnement pour les animaux blessés ou morts. En outre, le nombre typique d&#39;animaux que nous abritons dans EE pour cette grande taille des conteneurs est de 10-20 souris. Le nombre d&#39;animaux d&#39;autres chercheurs utilisent pour EE varier, en utilisant environ 10 ou moins souris, et la taille de la cage ou bin doivent être prises en considération lors de la détermination du nombre d&#39;animaux à la maison en EE. Avoir trop d&#39;animaux dans un milieu de vie peut conduire à l&#39;agression chez les souris mâles. La souris, nous avons logé dans EE ont été de C57BL / 6 milieux. Souris d&#39;autres souches peut être plus ou moins agressif, ou plus sujettes à des problèmes de santé danscette configuration d&#39;EE. Ceci doit être pris en considération pour déterminer le plan de l&#39;élevage pour les souris et l&#39;environnement enrichi. Quatre semaines EE logement est suffisante pour induire une diminution de l&#39;adiposité, la chute du niveau de la leptine, et l&#39;inhibition de la croissance du mélanome B16. Plus EE peut conduire à des effets plus importants sur le métabolisme et l&#39;inhibition du cancer. Si les souris subissent des interventions chirurgicales au cours ou avant une exposition à EE, ils peuvent être logés avec des sutures intactes. Si oui ou non les animaux répondent bien à cette configuration EE notamment avec des agrafes ou de cathéters intactes n&#39;a pas été étudié chirurgicales. En outre, nous étudions actuellement comment cette EE particulière affecte la durée de vie ou healthspan des animaux âgés. Les données préliminaires suggèrent que C57BL femme / 6 souris, 10 mois d&#39;âge, de répondre à EE similaire à de jeunes souris. Une limitation du boîtier de EE est accueillant un tel grand bac dans l&#39;espace de l&#39;animalerie, et de préférence dans une salle spécifique de genre. Ainsi des études futures sur le effets de l&#39;EE sur une plus petite échelle, ainsi que des jouets de trouver qui sont faciles à nettoyer, supporter nettoyage à haute température et sont sûrs à la santé des animaux, permettra d&#39;améliorer les applications de l&#39;EE dans métabolique et recherche sur le cancer.

Enrichissement de l&#39;environnement (EE) est un paradigme expérimental utilisé pour étudier les effets d&#39;un environnement complexe et difficile qui ne souligne pas les animaux 1. EE est une technique de logement des animaux composée de plus d&#39;espace, l&#39;activité physique, et les interactions sociales, qui à son tour augmente sensoriel, cognitif, moteur, et la stimulation sociale 2. Igloos, des roues de roulement, des roues de soucoupe, des labyrinthes de tubes, et d&#39;autres objets dans l&#39;environnement du logement favorisent cette cognitive sensorielle, sociale, et la stimulation du moteur par la promotion de l&#39;exploration et de l&#39;interaction. La disposition des objets dans les modifications de l&#39;enceinte de présenter régulièrement un nouvel environnement, à laquelle les souris sont obligés de s&#39;adapter. Cette stratégie offre des défis douces et brèves qui induisent une réponse adaptative bénéfique, bénigne, et en bonne santé, connu comme eustress, par opposition à un environnement hostile plus d&#39;aversion ou de détresse inadapté 3,4. En favorisant eustress et de limiter la détresse nuisibles, sourismontrer une variété de phénotypes favorables. EE est un modèle expérimental fiable avec un large éventail d&#39;applications, tout en étant dépourvue d&#39;éléments traditionnellement considérés comme stressante 1. Les effets de l&#39;EE sur des rongeurs ont été étudiés depuis plus d&#39;un demi-siècle. Au début des années 1960, des études ont montré que les niveaux de la cholinestérase ont diminué corticales et sous-corticales niveaux de la cholinestérase ont augmenté chez les rats qui ont été logés dans des environnements avec plus d&#39;espace de vie, augmentation du nombre de rats, et une variété de jouets en bois, des labyrinthes, des plates-formes et 5,6. En outre, EE est associé à de nombreux changements adaptatifs dans le cerveau, le comportement et le métabolisme chez la souris de différents âges et origines génétiques. Par conséquent, EE est un paradigme utile pour un large éventail d&#39;expériences qui étudient les effets de l&#39;environnement sur des souris. effets d&#39;EE peuvent être observées chez les souris aussi vite que d&#39;une semaine d&#39;exposition, et peuvent être observés chez des animaux aussi vieux que dix-huit mois 7. EE est souvent used dans des expériences en neurosciences et neurocomportementaux pour étudier récupération de la fonction, de l&#39;apprentissage et de la mémoire 2. En outre, EE a un impact considérable sur le phénotype d&#39;une variété de toxine induit et les modèles animaux transgéniques de maladies neurologiques humaines, y compris la maladie de Huntington, la maladie d&#39;Alzheimer, la maladie de Parkinson, épilepsie, accident vasculaire cérébral, et plus 2. Cependant, au fil des ans, il ya eu incompatibilité avec la conception d&#39;enrichissement de faire des comparaisons entre les études de différents laboratoires difficiles. Par exemple, chacune des études sur les effets de l&#39;EE relatives aux maladies neurologiques humaines mentionnées ci-dessus avaient varier les paramètres à l&#39;enrichissement. L&#39;étude sur la maladie de Huntington logé 4-6 souris dans de grandes cages (44 x 28 x 12,5 cm 3) contenant des boîtes de carton, des tunnels et des feuilles, ainsi que des objets en bois et en plastique qui ont été modifiées tous les deux jours 8,9. Une des études faites sur la maladie d&#39;Alzheimer et# 8217; s logés 20 souris dans une cage plus grande (1 m 3) contenant 2 roues de course, des tubes en plastique, boîtes en carton et de matériaux de nidification qui ont été modifiées ou réarrangé hebdomadaire 10. De nombreuses configurations de EE ont des thèmes similaires tels que les objets à courir ou se cacher dans, mais le nombre de souris par logement d&#39;EE, le salon, et la période de changement de l&#39;environnement varient beaucoup. Les conceptions contradictoires de l&#39;EE ont conduit à l&#39;échec d&#39;une réplication des effets de l&#39;EE. Nos données sur le cancer et le métabolisme ensemble suggèrent que la combinaison de stimulations prévues dans le boîtier suivant EE protocole détaillé de plomb anti-cancer significative et des effets anti-obésité 14,15. Cependant, la différence des paramètres d&#39;EE adoptées par les différents laboratoires pourraient influencer les résultats de l&#39;EE, comme on le voit dans une tentative ratée pour reproduire des effets de l&#39;EE sur la croissance des tumeurs cancéreuses spécifiques implantés dans des souris 11. Les différents résultats pourraient être dus à une variété de raisons, allant from différents taux des cultures de cellules tumorales pour le type de détergent utilisé pour le nettoyage de l&#39;équipement de boîtier 11 de croissance. Afin de reproduire les résultats observés dans nos expériences, une conception particulière de l&#39;enrichissement et de l&#39;élevage est nécessaire. La procédure ci-dessous détaille le boîtier EE qui permettra aux autres chercheurs à répliquer avec succès notre modèle d&#39;enrichissement efficace.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Large enrichment bin (120cm x 90cm x 76cm)</td>
			<td>Custom made.</td>
			<td>Custom made.</td>
			<td>Made of polypropylene. Edges of the bin are 1.5cm thick.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large enrichment bin alternative (120cm x 110cm x 76cm)</td>
			<td>Global Industrial</td>
			<td>155202</td>
			<td>If necessary, this bin works as an alternative to the one above.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Habitrail Mini tubes</td>
			<td>Habitrail</td>
			<td>62720; 62705; 62725; 62715; 62054</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic igloos with saucer wheels</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>K3327; K3250</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal Running Wheels</td>
			<td>Super Pet</td>
			<td>61392; 61394; 61396</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manzanita Wood Gnawing Sticks, 3&#34;</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>W0016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Tunnels</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>K3322</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse cages that go in the large EE bin.</td>
			<td>Lab Products Inc</td>
			<td>10027 Mouse Cage</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cage Klenz 180 Alkaline Cage Wash Detergent, Cage Klenz 250 Acid Detergent</td>
			<td>Steris Life Sciences</td>
			<td>1K1802; 1K2502</td>
			<td>These detergents are used in the cage wash for the toys, large enrichment bins, and cages.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sporklenz</td>
			<td>Steris Life Sciences</td>
			<td>6526Q8</td>
			<td>Alternative sporicide/disinfectant to washing toys, bins, and cages in cage wash.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bed-O-Cobs 1/4&#34; bedding</td>
			<td>The Andersons, Inc.</td>
			<td>4B</td>
			<td>Corn cob bedding is 1/4&#34; in diameter.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestlets for control housed mice</td>
			<td>Ancare</td>
			<td></td>
			<td>Cotton squares</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for housing mice in an enriched environment

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of &#8216;toys&#8217; to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

EE affecte l&#39;expression du facteur de croissance, la neurogenèse et augmente la survie des cellules dans le système nerveux central (SNC) 12,13. Des études plus récentes ont montré que cette technique de EE conduit à une suppression remarquable de la croissance du cancer dans des modèles de cancer trois souris y compris le mélanome B16, le cancer du côlon MC38 et APC min / + souris qui contient une mutation de lignée germinale et est très sensible à la formation de l&#39;adénome spontané dans 14 les intestins. Les résultats de la figure 2 confirment la suppression de la croissance tumorale du mélanome B16 implanté chez des souris exposées à EE pendant 5 semaines (~ 80% de baisse de la masse tumorale). suppression de la croissance du cancer a été observée chez les souris même lorsque EE a été initié après que la tumeur avait été établie 14. EE entraîné une plus grande inhibition de la croissance du mélanome dans le régime alimentaire des souris induite par l&#39;obésité haute teneur en graisses (~ 70% de diminution de la masse tumorale) à celui chez les souris ayant un poids normal (~ 50% de diminution de la masse tumorale) 14. EE ind<html> uced changements de signature dans les biomarqueurs sériques, y compris goutte robuste de la leptine, la diminution de l&#39;IGF-1, et de l&#39;augmentation de taux d&#39;adiponectine 14. En outre, cette technique d&#39;EE diminue l&#39;adiposité, augmente la dépense énergétique, conduit à une résistance contre l&#39;obésité induite par l&#39;alimentation, et induit un blanc au brun interrupteur graisse phénotypique en activant l&#39;axe hypothalamo-sympathoneural-adipocyte axe 15. La diminution de l&#39;adiposité a été vu dès six Jours d&#39;exposition au EE (figure 3A, B) et de nouveau confirmé chez les animaux exposés à EE pendant quatre semaines (figure 3C, D). Il est également important de noter que, une, anti-cancer et des effets anti-obésité associée à EE ne peuvent pas être pris en compte par l&#39;activité physique seul, et, deux, les effets de l&#39;EE peuvent être reproduites par une surexpression du facteur neurotrophique dérivé du cerveau (BDNF ) dans l&#39;hypothalamus 14,15. <html> 2874fig1.jpg &quot;/&gt; Figure 1: Enrichi environnement bin mettre en place l&#39;environnement enrichi a une superficie de 120 cm x 90 cm et comprend deux cages modifiées, les roues de course, igloos avec des roues de soucoupes, de tubes en plastique, des rondins de bois, et autres jouets d&#39;enrichissement en plastique.. <img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig2.jpg" /> Figure 2: environnement enrichi réduit la croissance tumorale chez les souris mâles C57BL / 6 vieilles souris mâles Trois semaine ont été maison dans EE ou cages de contrôle pendant 5 semaines avant inoculation de la tumeur.. poids tumorales de mélanome B16 à 17 jours après inoculation de 10 5 cellules par voie sous-cutanée de l&#39;animal au-dessus du flanc droit (n = 10 par groupe. -test t de Student, * p &lt;0,05). <img alt="Figure 3a" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3a.jpg" /> <img alt="Figure 3b" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3b.jpg" /> s / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg &quot;/&gt; <img alt="Figure 3d" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3d.jpg" /> Figure 3: milieu enrichi diminue adiposité chez les souris C57BL / 6 souris mâles âgées de trois semaines les souris ont été soumises à l&#39;EE;. un groupe de 6 jours, une autre pour quatre semaines. (A) Six jours en EE diminution du poids du coussinet adipeux (n = 5 par groupe. -test T de Student, * p &lt;0,05). (B) Six jours en EE diminution du poids de la tablette de graisse par rapport au poids corporel (n = 5 par groupe. -test T de Student, * p &lt;0,05). (C) Quatre semaines en EE diminution du poids de la tablette de graisse (n = 5 par groupe. -test T de Student, * p &lt;0,05). (D) Quatre semaines en EE diminution du poids de la tablette de graisse par rapport au poids corporel (n = 5 par groupe. -test T de Student, * p &lt;0,05). BAT: le tissu adipeux brun, IWAT: inguinale tissu adipeux blanc, EWAT: le tissu adipeux blanc de l&#39;épididyme,RWAT: tissu adipeux blanc rétropéritonéale.

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A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Un protocole pour souris Bricolage dans un environnement enrichi

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

a-protocol-for-housing-mice-in-an-enriched-environment

Research

JoVE Journal

Behavior

18.1K vues.  The Ohio State University. Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Vidéo: A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Two-photon Calcium Imaging in Mice Navigating a Virtual Reality Environment

In recent years, two-photon imaging has become an invaluable tool in neuroscience, as it allows for chronic measurement of the activity of genetically identified cells during behavior1-6. Here we describe methods to perform two-photon imaging in mouse cortex while the animal navigates a virtual reality environment. We focus on the aspects of the experimental procedures that are key to imaging in a behaving animal in a brightly lit virtual environment. The key problems that arise in this experimental setup that we here address are: minimizing brain motion related artifacts, minimizing light leak from the virtual reality projection system, and minimizing laser induced tissue damage. We also provide sample software to control the virtual reality environment and to do pupil tracking. With these procedures and resources it should be possible to convert a conventional two-photon microscope for use in behaving mice.

Here we describe the experimental procedures involved in two-photon imaging of mouse cortex during behavior in a virtual reality environment.

Deux photons Imaging calcium dans la souris Naviguer une réalité environnement virtuel

In recent years, two-photon imaging has become an invaluable tool in neuroscience, as it allows for chronic measurement of the activity of genetically ...

Recherche

Sciences du comportement

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

Le Conseil Trou modification - Comportement, cognition et l&#39;interaction sociale souris et des rats de mesure

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Labyrinthe aquatique de Morris Test: Optimisation pour les souris de souche et environnement de test

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Evaluation of a Smartphone-based Human Activity Recognition System in a Daily Living Environment

An evaluation method that includes continuous activities in a daily-living environment was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that attempt to recognize user activities. Participants performed a pre-determined set of daily living actions within a continuous test circuit that included mobility activities (walking, standing, sitting, lying, ascending/descending stairs), daily living tasks (combing hair, brushing teeth, preparing food, eating, washing dishes), and subtle environment changes (opening doors, using an elevator, walking on inclines, traversing staircase landings, walking outdoors). 
To evaluate WMMS performance on this circuit, fifteen able-bodied participants completed the tasks while wearing a smartphone at their right front pelvis. The WMMS application used smartphone accelerometer and gyroscope signals to classify activity states. A gold standard comparison data set was created by video-recording each trial and manually logging activity onset times. Gold standard and WMMS data were analyzed offline. Three classification sets were calculated for each circuit: (i) mobility or immobility, ii) sit, stand, lie, or walking, and (iii) sit, stand, lie, walking, climbing stairs, or small standing movement. Sensitivities, specificities, and F-Scores for activity categorization and changes-of-state were calculated.
The mobile versus immobile classification set had a sensitivity of 86.30% &#177; 7.2% and specificity of 98.96% &#177; 0.6%, while the second prediction set had a sensitivity of 88.35% &#177; 7.80% and specificity of 98.51% &#177; 0.62%. For the third classification set, sensitivity was 84.92% &#177; 6.38% and specificity was 98.17 &#177; 0.62. F1 scores for the first, second and third classification sets were 86.17 &#177; 6.3, 80.19 &#177; 6.36, and 78.42 &#177; 5.96, respectively. This demonstrates that WMMS performance depends on the evaluation protocol in addition to the algorithms. The demonstrated protocol can be used and tailored for evaluating human activity recognition systems in rehabilitation medicine where mobility monitoring may be beneficial in clinical decision-making.

A standardized evaluation method was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that includes continuous activities in a realistic daily living environment. Testing with a series of daily living activities can decrease activity recognition sensitivity; therefore, realistic testing circuits are encouraged for valid evaluation of WMMS performance.

Évaluation d&#39;un système de reconnaissance de l&#39;activité humaine basée à Smartphone dans un milieu de vie quotidien

An evaluation method that includes continuous activities in a daily-living environment was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that ...

A Method to Study Adaptation to Left-Right Reversed Audition

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the previous studies have used special spectacles with prisms to achieve unusual spaces in the visual domain, a methodology for studying the adaptation to unusual auditory spaces has yet to be fully established. This study proposes a new protocol to set-up, validate, and use a left-right reversed stereophonic system using only wearable devices, and to study the adaptation to left-right reversed audition with the help of neuroimaging. Although individual acoustic characteristics are not yet implemented, and slight spillover of unreversed sounds is relatively uncontrollable, the constructed apparatus shows high performance in a 360&#176; sound source localization coupled with hearing characteristics with little delay. Moreover, it looks like a mobile music player and enables a participant to focus on daily life without arousing curiosity or drawing attention of other individuals. Since the effects of adaptation were successfully detected at the perceptual, behavioral, and neural levels, it is concluded that this protocol provides a promising methodology for studying adaptation to left-right reversed audition, and is an effective tool for uncovering the adaptability of humans to a novel environments in the auditory domain.

The present study proposes a protocol to investigate the adaptation to left-right reversed audition achieved only by wearable devices, using neuroimaging, which can be an effective tool for uncovering the adaptability of humans to a novel environment in the auditory domain.

Une méthode pour étudier l’Adaptation de gauche droite inversé Audition

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

Le protocole d’effort doux chronique imprévisible pour induire l’anhédonie chez la souris

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

An Electrophysiology Protocol to Measure Reward Anticipation and Processing in Children

We present a protocol designed to measure the neural correlates of reward in children. The protocol allows researchers to measure both reward anticipation and processing. Its purpose is to create a reward task that is appropriate for young children with and without autism while controlling reward properties between two conditions: social and nonsocial. The current protocol allows for comparisons of brain activity between social and nonsocial reward conditions while keeping the reward itself identical between conditions. Using this protocol, we found evidence that neurotypical children demonstrate enhanced anticipatory brain activity during the social condition. Furthermore, we found that neurotypical children anticipate social reward more robustly than children with autism diagnoses. As the task uses snacks as a reward, it is most appropriate for young children. However, the protocol may be adapted for use with adolescent or adult populations if snacks are replaced by monetary incentives. The protocol is designed to measure electrophysiological events (event-related potentials), but it may be customized for use with eye-tracking or fMRI.

This protocol is designed to measure reward anticipation and processing in young children with and without autism. Specifically, the protocol is designed to study the neural correlates of reward during social and nonsocial conditions while controlling for reward between conditions.

Un protocole d’électrophysiologie à mesure récompense Anticipation et le traitement chez les enfants

We present a protocol designed to measure the neural correlates of reward in children. The protocol allows researchers to measure both reward anticipation ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important behavioral test to determine whether the mice mimic the symptoms of patients. Motor deficits are often induced by stress when no spontaneous motor phenotype is observed in the mouse models. Therefore, gait analysis followed by stress loading would be a sensitive method for evaluating the motor phenotype in mouse models. However, researchers face the requirement of an expensive apparatus to obtain quantitative results automatically from gait analysis. For stress, stress loading by simple methods without expensive apparatuses required for electric shock and forced running is desirable. Therefore, we introduce a simple and low-cost protocol consisting of footprint analysis with paper and ink, hanging box test to evaluate motor function, and stress loading defined by restraint with a conical tube. The motor deficits of mice were successfully detected by this protocol.

The low-cost protocol consisting of footprint analysis and hanging box test after restraint stress is useful for evaluating the movement disorders of mouse model.

Low-cost protocole d’analyse de l’empreinte et la pendaison de zone Test pour souris appliqué le Stress chronique retenue

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...

In Vivo Protocol of Controlled Subconcussive Head Impacts for the Validation of Field Study Data

Subconcussive hits pose a threat to neuronal health as they have shown to induce neuronal structural damage and functional impairment without causing outward symptomology and appear to be a key contributor to an irreversible neurodegenerative disease, chronic traumatic encephalopathy (CTE). In addition, athletes can incur more than 1,000 of these hits per season. The subconcussive soccer heading model (SSHM) is a relevant, reproducible, and leading method of isolating and examining the effects of these subconcussive head impacts. By controlling variables such as ball traveling speed, the frequency of impacts, interval, ball placement to the head, as well as by measuring head impact magnitude, the SSHM provides the scientific community with a superior avenue of investigating the acute subconcussive effects on neuronal health. In this paper, we demonstrate the utility of SSHM in studying a time-course expression of neurofilament-light polypeptide (NF-L) in plasma in a repeated measures fashion. NF-L is an axonal injury marker that has previously been shown to be elevated in boxers and football players following subconcussive head trauma. Thirty-four adult aged soccer players were recruited and randomly assigned to either a soccer heading (n = 18) or kicking (n = 16) group. The heading group executed 10 headers with soccer balls projected at a velocity of 25 mph over 10 min. The kicking group followed the same protocol with 10 kicks. Plasma samples were obtained before and at 0 h, 2 h, and 24 h after heading/kicking and assessed for NF-L expressions. The heading group showed a gradual increase in plasma NF-L expression and peaked at 24 h after the heading protocol, whereas the kicking group remained consistent across the time points. These results confirmed the NF-L data from clinical field studies, encouraging the use of SSHM to validate clinical subconcussion data.

The subconcussive soccer heading model is a safe and concise methodological approach to isolate and measure the effects of subconcussive head impacts.

En Vivo protocole des Impacts de la tête Subconcussive contrôlé pour la Validation des données de l’étude

Subconcussive hits pose a threat to neuronal health as they have shown to induce neuronal structural damage and functional impairment without causing ...

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, therapeutic treatments for depression or research on depression is scarce. Thus, in the present paper, we propose a mouse model of depression induced by movement restriction. Chronic mild stress (CMS) is a well-known technique to induce depressive-like behavior. However, it necessitates a complex procedure consisting of a combination of various mild stresses. In contrast, chronic immobilization stress (CIS) is a readily accessible chronic stress model, modified from a restraint model that induces depressive behavior by restricting movement using a restrainer for a certain period. To evaluate the depressive-like behaviors, the sucrose preference test (SPT), the tail suspension test (TST), and the ELISA assay to measure stress marker corticosterone levels are combined in the present experiment. The described protocols illustrate the induction of CIS and evaluation of the changes in behavior and physiological factors for the validation of depression.

This article provides a simplified and standardized protocol for induction of depressive-like behavior in chronically immobilized mice by using a restrainer. In addition, behavior and physiological techniques to verify induction of depression are explained.

Un protocole de stress d'immobilisation chronique pour induire un comportement de dépression chez les souris

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...