Un traitement régénérateur pour la maladie artérielle périphérique serait extrêmement bénéfique et ce modèle animal pourrait être en mesure de mieux tester si les traitements expérimentaux pourraient fonctionner chez les patients humains. Notre procédure vise à mettre en avant un modèle amélioré. Celui qui reproduit plus précisément la résistance thérapeutique rencontrée chez les patients atteints de diabète ou d’hyperlipidémie.
Ce modèle animal peut être utilisé pour tester de nouvelles thérapies pour l’ischémie périphérique et fournit un modèle préclinique qui a compromis la néovascularisation à l’ischémie. Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement de patte postérieure dans un lapin diabétique et hyperlipidique anesthésié de quatre à six mois, utilisez un scalpel avec une lame numéro 15 pour faire une incision de quatre à cinq centimètres de long juste latéralement sur le côté droit de la trachée et utilisez la dissection émoussée pour exposer la bonne artère carotide commune. Utilisez de petits rétracteurs Weitlaner pour ouvrir l’incision et isoler soigneusement l’artère carotide de la veine jugulaire et du nerf vague.
Lorsque l’artère carotide a été complètement séparée du nerf et de la veine jugulaire, placez une suture de soie de 4 O aux extrémités proximales et distales de l’artère exposée et attachez l’extrémité distale de la carotide avec le noeud d’un chirurgien et quatre noeuds carrés. À l’extrémité proximale, utilisez une attache en silicone vasculaire pour permettre le serrage ou le desserrage du navire, au besoin. Ensuite, appliquez environ 0,5 millilitres de 1% de lidocaïne le long de l’artère et du nerf carotides exposés pour favoriser la vasodilatation et réduire l’irritation nerveuse.
Administrer 500 unités internationales d’héparine IV.Place un outil d’insertion de fil de quatre pouces dans l’artère. Alimentez un fil de guidage de 0,014 pouce sur 185 centimètres à travers l’outil d’insertion jusqu’à la bifurcation aortique à la crête iliaque de l’aorte descendante, et avancez un cathéter angiographique à queue de porc de trois Français sur le fil. Avancez le cathéter à queue de porc à deux centimètres proximal à la bifurcation aortique à la crête iliaque dans l’aorte descendante, positionnant la pointe du cathéter entre la septième vertèbre lombaire et la première vertèbre sacrée.
Testez l’emplacement du cathéter en injectant manuellement de deux à quatre millilitres d’agent de contraste. Une fois le positionnement correct confirmé, administrer une injection intraartérale de 100 microgrammes de nitroglycérine par le cathéter pour augmenter la vasodilatation. Administrer ensuite de 0,8 à un millilitre de 1 % de lidocaïne à travers le cathéter pour aider à la vasodilatation et rincer le cathéter avec de la solution saline héparinisée.
Fixez le tube de l’injecteur angiographique automatisé au cathéter, en étant sûr d’enlever tout air de la ligne. Utilisez l’injecteur angiographique automatisé pour fournir neuf millilitres de milieu de contraste à travers le cathéter à trois millilitres par seconde et effectuer une angiographie de soustraction numérique à six images par seconde. Sélectionnez les images en série et modifiez l’image de l’angiographie en utilisant moins 40% de réglage pour minimiser l’apparence de l’os et capturer une image complète de la perfusion du navire avec contraste.
Pour isoler l’artère fémorale, utilisez une lame de scalpel numéro 15 pour faire une incision longitudinale de la peau sur l’artère fémorale droite, en s’assurant que l’incision s’étend inférieurement du ligament inguinal et se termine à la zone juste proximale à la rotule. Utilisez la dissection émoussée pour exposer l’artère fémorale et ouvrez l’incision avec des rétracteurs Weitlaner. Appliquer environ 0,5 millilitres de 1% de lidocaïne localement pour réduire l’irritation nerveuse et favoriser la vasodilatation.
Continuez la dissection émoussée des tissus pour libérer toute la longueur de l’artère fémorale avec toutes ses branches, y compris les artères épigastriques inférieures, fémorales profondes, latérales circonflexes et épigastriques superficielles. Disséquer le long des artères popliteal et saphenous, aussi bien que l’artère iliaque externe, hydratant périodiquement la région avec saline pour se protéger contre des dommages de tissu. Séparez soigneusement l’artère fémorale de la veine fémorale et du nerf et placez deux sutures de soie 4-O sur l’artère fémorale avec juste assez d’espace entre les sutures pour permettre à l’artère d’être sectionnée.
Ensuite, utilisez de petits ciseaux Metzenbaum pour couper entre les deux traverses de l’artère ligatée. Exciser l’artère fémorale d’où l’artère bifurque pour former les artères saphenous et popliteal, travaillant proximately, lissant n’importe quelle branche latérale pour exciser le reste de l’artère fémorale juste au-dessous de l’artère épigastrique. Pour répéter l’angiographie, utilisez une feuille silastic avec une boule montée en acier inoxydable de trois millimètres.
Pour attacher la boule d’acier inoxydable dans la partie supérieure du muscle quadriceps avec des sutures de soie 4-O. Tirez la peau sur la balle quand elle est en place. Administrer une injection intra-artérielle de 100 microgrammes de nitroglycérine par le cathéter pour augmenter la vasodilatation.
Si nécessaire, administrer un autre 0,8 à un millilitre de 1% de lidocaïne à travers le cathéter pour aider à la vasodilatation et rincer avec la solution saline héparinée. Utilisez l’injecteur angiographique automatisé aux mêmes réglages pour injecter neuf millilitres de contraste de plus. Ensuite, effectuez une autre angiographie, comme démontré.
À la fin de la procédure, retirer le cathéter de l’artère droite et attacher l’artère à l’aide de la suture de soie 4-O déjà en place autour de l’artère. Ensuite, fermez les couches musculaires et sous-cuticulaires avec 4-O polydioxanone ou 3-O polyglactine 910 sutures sur une aiguille conique dans un modèle de suture continue et fermer la peau en utilisant 4-O polydioxanone ou 4-O polyglactine 910 sutures sur une aiguille de coupe inverse dans un motif subcuticulaire subcuticulaire enterré. Chez les animaux non diabétiques, même avec un taux de cholestérol plus élevé, il ya une récupération accrue de la pression artérielle dans le membre ischémique et la vascularité dans les angiographies au point de temps final par rapport aux animaux diabétiques.
Histologiquement, des changements dans la structure musculaire compatibles avec l’oedème et les dommages ischémiques sont observés comme une perte ou une perturbation des fibres musculaires. En outre, l’immunostaining pour PECAM un et alpha actine lisse de muscle peut être employé pour identifier le nombre et la taille des vaisseaux dans les sections de tissu. D’autres méthodes d’imagerie, telles que l’échographie Doppler, l’imagerie doppler au laser, la thermographie infrarouge et l’IRM peuvent être ajoutées pour une surveillance plus continue de la reperfusion ischémique des membres.
Avec cette incorporation de la résistance thérapeutique, notre modèle imite plus exactement l’ischémie dans un état maladie, faisant progresser l’évaluation de nouvelles thérapies pour la maladie artérielle périphérique.
