L’importance de ce protocole par rapport aux méthodes précédentes d’échantillonnage de la prostate est qu’il nous donne une plus grande confiance de cibler les tissus tumoraux frais pour la recherche. Par conséquent, nous pouvons ramener le tissu frais directement au laboratoire et l’utiliser pour la culture ou l’imagerie parce que nous avons une grande confiance dont les échantillons sont tumoraux et qui sont bénins. Mon conseil clé lors de l’apprentissage de la technique est de travailler avec votre pathologiste local afin que le diagnostic final des tissus et le rapport ne sont pas compromises.
Pour cibler l’emplacement de tumeur, passez en revue les images de MRI pour mesurer l’endroit au-dessus de la tumeur et trouvez la séquence à laquelle la tumeur est la plus visible dans le plan axial. Faites défiler les images axiale pour identifier l’image dans laquelle la tumeur est la plus grande et imprimez l’image pour référence. Dans l’image coronale correspondante, mesurer la distance entre la base de la prostate et la position axiale sélectionnée et mesurer toute la longueur de la prostate de l’apex à la base en millimètres.
Puis imprimez ces mesures et marquez les emplacements de la tumeur pour référence. Après que le spécimen ait été rassemblé, stérilisez le capot d’écoulement laminaire et l’appareil de tranchage de prostate avec 70% d’éthanol et pesez la prostate sur une échelle standard en grammes. Puis peindre le côté droit avec de l’encre bleue et le côté gauche de l’échantillon avec de l’encre noire couvrant la capsule complète et vésicules séminal avec de l’encre pour permettre la discrimination des marges chirurgicales.
Pour trancher la prostate, placez le tissu avec la base et l’apex face aux parois opposées de l’appareil avec le côté postérieur vers le bas et le côté antérieur vers le haut. Placez des broches d’or autour de l’échantillon de tissu poussant légèrement la prostate vers l’intérieur si nécessaire pour obtenir un ajustement serré et mesurer la longueur de prostate de la base à l’apex pour comparer cette mesure à la longueur de prostate qui est mesurée par MRI. Si la prostate s’est rétrécie, ajustez la position de tranchage prévue par le pourcentage approprié de la réduction.
Ensuite, mesurez de la base à la tranche transversale désirée et sélectionnez la goupille qui se trouve le plus près de cette mesure pour trancher. Portant des gants chainmail pour éviter les blessures, placez les lames du dispositif de tranchage de chaque côté de la goupille identifiée et utilisez l’espaceur pour séparer les pales de cinq millimètres. Pour acquérir la tranche, utilisez de longs traits pour déplacer lentement mais fermement les lames vers le bas, vers l’avant et vers l’arrière, confirmant en sentant qu’une tranche complète a été séparée avant de démonter l’appareil.
Retirez ensuite les murs et les épingles et utilisez des gants pour transférer soigneusement la tranche sur un morceau stérile de corkboard. Après l’acquisition du spécimen, inspectez visuellement la tranche transversale pour la comparaison avec l’image axial d’IRM. Dans certains cas, la zone tumorale peut sembler plus pâle que le tissu environnant.
Palpez doucement la tranche transversale. La tumeur peut se sentir plus ferme que le tissu environnant. À l’aide de l’image axial de l’IRM comme guide, sélectionnez une ou plusieurs zones pour l’échantillonnage et utilisez un poinçon de six millimètres pour pousser vers le bas sur la zone tissulaire d’intérêt.
Tordre le poinçon tissulaire sur place et vers le bas contre le liège pour assurer une séparation complète à l’aide d’un scalpel pointu pour séparer l’échantillon de biopsie de l’échantillon si nécessaire. Lorsque l’échantillon a été acquis, retirez le poinçon et utilisez le piston pour éjecter l’échantillon dans le contenant approprié pour l’analyse ultérieure en aval. Puis encrez les trous où les poinçons ont été pris en rouge et notez l’emplacement de chaque poinçon avec le poids de la prostate et toutes les observations sur la couleur et la fermeté des tissus.
Épingler la capsule de prostate au liège pour éviter les biliations pendant la fixation. Submerger la prostate et le liège dans fixatif en s’assurant que l’échantillon est complètement submergé. Dans cette analyse représentative, sur les 92 premiers cas échantillonnés comme démontré, 64% des spécimens contenaient au moins 40% de tumeur et ont été soumis au projet 100.000 génomes sans microdissection.
L’ADN a été extrait et a été d’un rendement et d’une qualité suffisants dans tous les cas et un sous-ensemble initial de 59 de ces échantillons a été publié pour comparaison avec une méthode antérieure d’échantillonnage des spécimens. Après cette procédure, les échantillons frais de tumeur peuvent être utilisés pour l’imagerie vivante ou la culture nous permettant de tester de nouveaux biomarqueurs, médicaments, et en savoir plus sur la biologie tumorale. Maintenant que nous utilisons cette méthode régulièrement, j’ai été en mesure de présenter un projet en utilisant ce tissu pour la culture ex vivo pour examiner de nouvelles combinaisons de thérapies précliniques pour le cancer de la prostate.
