Les dommages d’ischemia-reperfusion sont la cause principale de l’échec de aileron dans la microchirurgie reconstructive. Cette vidéo décrit un modèle animal préclinique pour l’étude de cette pathophysiologie. Ce modèle libre d’aileron de peau basé sur les vaisseaux épigastriques caudals superficiels dans le rat peut permettre l’évaluation de différentes thérapies et composés pour contrecarrer des dommages liés aux dommages liés aux dommages liés à l’ischémie-reperfusion.
Les reconstructions microchirurgicales sont idéales pour une grande variété de défauts. Cependant, ces procédures assurent une période obligatoire d’ischémie suivie de la reperfusion. Cette période est généralement bien tolérée, et le taux de réussite des interventions microchirurgicales dépasse 90%Cependant, seulement 73,7% des volets nécessitant une révision chirurgicale peuvent être complètement sûrs.
En outre, dans les cas de replantation des dommages d’avulsion de doigt, le taux de succès est environ 60%et dans les cas de re-transplantation composite de tissu, souffrant des pourcentages de projection de dommages d’ischémie-reperfusion sont augmentés puisque la blessure active l’immunité innée. Par conséquent, l’étude de ce phénomène pathophysiologique est d’intérêt. Pour commencer cette procédure, utilisez un marqueur chirurgical pour dessiner un rabat de trois centimètres sur six centimètres, en s’assurant que l’un des côtés de six centimètres correspond à la ligne médiane de l’abdomen.
Ensuite, faire une incision de la peau de six centimètres à la ligne médiane de l’abdomen, deux incisions perpendiculaires de trois centimètres, ainsi que l’un des six centimètres parallèles à la première incision. Pour commencer à disséquer le rabat de peau désigné, utilisez des ciseaux et des forceps Adson pour soulever le rabat. Tirez doucement le rabat de la zone crânienne vers la zone caudale.
Disséquer le pédule des volets sans le toucher ou en saisissant l’adventitia le moins possible pour éviter d’endommager la paroi du navire. Utiliser 8-0 sutures de nylon à occluser par ligatures les vaisseaux saphenous, les vaisseaux fémoraux circumflex latéraux, et les vaisseaux fémoraux caudal proximaux. Serrez le pédule vasculaire, puis coupez-le pour commencer la période d’ischémie de huit heures.
Utilisez la solution saline héparinisée pour parcourir le rabat, puis retirez le sang stagnant de la microcirculation. Utilisez des sutures en nylon 10-0 pour effectuer les anastomoses microchirurgicales. Après huit heures d’ischémie, réperfutez le rabat en enlevant les pinces microvasculaires, et vérifiez la patency vasculaire.
Tout d’abord, évaluer le flux sanguin à l’aide d’un flowmètre ultrasonique en temps de transit et de sondes microchirurgicales. Placez le vaisseau cible dans la fenêtre de détection ultrasonique de la sonde d’écoulement pour quantifier le volume d’écoulement. Lorsque le bon couplage est atteint et que le navire est placé dans la fenêtre acoustique sans aucune tension, cliquez sur le bouton d’enregistrement sur l’écran pour stocker les données.
Après cela, utilisez 4-0 sutures absorbables pour fermer la peau. Pour évaluer la microcirculation du volet, utilisez l’analyse du contraste des taches laser. Faites un nouvel enregistrement pour chaque échantillon et pour chaque étude de suivi en cliquant sur le fichier, nouvel enregistrement.
Une nouvelle fenêtre s’ouvrira qui affiche le panneau d’installation. Ici, modifiez les informations pour le nom du projet, le sujet, l’opérateur et le nom d’enregistrement. Ajustez la distance de travail en déplaçant le laser par rapport au tissu.
Zoomez la tête laser vers ou vers le tissu d’intérêt. Dans la configuration de l’image, normalisez la zone de mesure en entrant la largeur et la hauteur désirées. Réglez la densité du point à haute.
Lors de la configuration de capture d’image, sélectionnez la fréquence et la durée de l’enregistrement. Ensuite, cliquez sur le bouton enregistrer pour commencer l’enregistrement. Le panneau de configuration est remplacé par le panneau d’enregistrement et les données sont enregistrées automatiquement.
Prenez des instantanés pendant la procédure pour permettre une comparaison plus précise. Après cela, utilisez le logiciel ImageJ pour mesurer les zones de survie et de nécrose en plaçant d’abord une règle sur le site du rabat et en prenant des photos de contrôle pour la mesure macroscopique. Dans la boîte à outils ImageJ, sélectionnez la ligne droite et tracez une ligne sur un centimètre de la règle.
Cliquez sur analyser, définir l’échelle, et dans la boîte à texte pour la distance connue, entrez la valeur d’un centimètre. Cliquez sur l’outil de sélection du polygone et dessinez les lignes de polygone sur le rabat pour calculer la zone viable. Cliquez sur analyser, mesurer pour obtenir la valeur de la zone.
Ensuite, placez un pansement postopératoire sur l’animal avant de le loger pour éviter l’automutilation. Sept jours après la chirurgie, photographiez la zone chirurgicale pour permettre des mesures macroscopiques des secteurs de survie et de nécrose de aileron. À l’aide de la technique d’analyse du contraste des taches laser décrite précédemment, visualisez et quantifiez les différences de perfusion pour évaluer la microcirculation du volet.
Après l’analyse macroscopique, retirez les sutures 4-0, soulevez le rabat, et utilisez l’ultrason de transit-temps pour réévaluer le flux sanguin vasculaire de pédule. Effectuer l’échantillonnage des tissus en divisant longitudilement le rabat en deux parties qui mesurent 1,5 centimètres par six centimètres. Immédiatement après la création des anastomoses microchirurgical, nous avons obtenu des valeurs plus élevées de flux sanguin que les flux minimaux recommandés dans la littérature.
Ainsi, toutes les anastomoses microchirurgical étaient patentes une semaine après la chirurgie. L’observation de la dépravation microcirculatoire du flux sanguin pendant l’insulte ischémique était possible avec la technique d’analyse de contraste de taches laser. Ceci inclut l’hyperperfusion immédiate pendant la reperfusion de volet et perioperatively, les différents secteurs avec moins de perfusion ont eu un plus grand risque de nécrose postopératoire de volet qui ont été en effet nécrosées sept jours après la fin de l’étude.
La zone de survie des volets après huit heures d’ischémie et sa reperfusion subséquente était d’environ 40% Les résultats précédemment publiés montrent des différences statistiquement significatives lorsque ce modèle est comparé à des volets où aucune insulte ischémique n’est infligée. N’oubliez pas de disséquer le pedicle rabat sans le toucher ou en saisissant l’adventitia aussi peu que possible pour éviter d’endommager la paroi du navire, ainsi que d’effectuer des anastomoses microchirurgicales appropriées afin d’éviter les complications dues à la technique chirurgicale. Peropératoirement, la technologie d’ultrason de transit-temps nous permet de quantifier le flux sanguin des anastomoses microchirurgical et ainsi prévoir la perfusion de battement.
Postopératoirement, l’analyse de contraste de taches laser permet une semi-continuité de la cartographie en temps réel du flux dans les volets libres. Il s’agit d’une technique prometteuse, mais d’autres recherches sont nécessaires. Cette vidéo a décrit le protocole d’un modèle approprié pour évaluer des agents thérapeutiques pour contrecarrer des dommages d’ischémie-reperfusion dans le domaine de la microchirurgie reconstructive.
