Notre protocole est important parce qu’il représente un nouveau paradigme pour évaluer les effets du stress chronique, en particulier le stress psychosocial, sur les résultats de la grossesse. Dans ce protocole, nous exposons les souris gestantes à diverses insultes psychosociales de différentes intensités de manière imprévisible. Les paradigmes antérieurs des modèles animaux utilisaient des facteurs de stress physiques ou un nombre limité de facteurs de stress administrés de manière répétitive, ce qui ne reflète pas l’expérience des femmes pendant la grossesse.
Notre modèle de stress psychosocial chronique surmonte ces limites. Cette méthode a de vastes ramifications pour divers domaines de recherche, y compris la recherche sur la santé mentale maternelle et le développement indésirable du nourrisson, et plus largement, pour comprendre les origines développementales de la maladie adulte par le biais d’événements intra-utérins indésirables. Avant de commencer chaque facteur de stress dans le paradigme CGS, amenez les souris du groupe CGS de la salle de logement dans la pièce désignée pour CGS.
Exposez les souris à différents facteurs de stress après un régime de stress de 11 jours allant du jour gestationnel 6,5 au jour 17,5. Pour exposer les souris à des corps étrangers, répartissez au hasard six billes ou six Legos de formes différentes dans une cage statique propre avec une litière de souris sans les oisillons de souris. Placez toutes les souris d’une cage domestique dans la cage statique avec des corps étrangers pendant deux heures, puis retournez les souris dans leur cage d’origine.
Pour exposer les souris à l’odeur des prédateurs, placez une litière sale d’un centimètre d’épaisseur provenant de rats femelles dans une cage statique propre sans litière de souris ni oisillons. Placez toutes les souris d’une cage domestique dans la cage statique avec de la litière de rat sale pendant deux heures, puis retournez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer les souris à une inclinaison de la cage, placez toutes les souris d’une cage domestique dans une cage statique propre avec une litière de souris sans les oisillons de souris.
Gardez la cage inclinée à un angle de 30 degrés contre le mur pendant deux heures, puis ramenez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer les souris à des changements fréquents de litière, placez toutes les souris d’une cage domestique dans une cage statique propre avec une litière de souris sans les niches de souris. Toutes les 10 minutes, déplacez doucement les souris dans une cage propre différente et remplacez la litière de la souris.
Après deux heures, ramenez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer les souris à l’enlèvement de la litière, placez toutes les souris d’une cage domestique dans une cage statique vide et propre, sans litière de souris ni oisillons pendant deux heures, puis retournez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer les souris au mouvement sur un shaker, placez toutes les souris d’une cage domestique dans une cage statique propre avec une litière de souris sans les oisillons de souris.
Placez la cage statique sur un agitateur de laboratoire réciproque réglé à 140 coups par minute pendant deux heures, puis ramenez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer les souris aux lumières pendant la nuit, placez toutes les souris d’une cage domestique dans une cage statique propre avec une litière de souris sans les oisillons de souris. Gardez les lumières allumées pendant la nuit pour interférer avec le cycle sombre.
Le lendemain, ramenez les souris dans leur cage d’origine. Pour exposer une souris à de nouveaux compagnons de cage, transférez-la dans une cage statique propre avec une litière contenant deux souris femelles inconnues. Laissez la souris dans la cage statique avec les compagnons de cage inconnus pendant la nuit.
Le lendemain, la souris a retourné sa cage d’origine avec des compagnons de cage familiers. Pour exposer les souris à la litière humide, saturez la litière de la souris dans une cage statique avec de l’eau propre maintenue à 24 degrés Celsius. Placez toutes les souris d’une cage domestique dans la cage statique avec une litière humide pendant la nuit.
Le lendemain, ramenez les souris dans leur cage d’origine. Une fois le régime de stress terminé le jour de gestation 17.5, une seule fois toutes les souris expérimentales pour se préparer à la parturition et aux évaluations fonctionnelles en aval. L’exposition de souris femelles gravides au SNC provoque des changements dans les paramètres liés au stress chronique, tels que la réduction du gain de poids corporel pendant la grossesse et l’augmentation du poids des glandes surrénales au début de la période post-partum.
Il est important de se faire une évidence que les mères du SNC présentent des anomalies post-partum et une fonction neuroendocrinienne maternelle, comme en témoigne l’augmentation des taux sériques de corticostérone à la suite d’une nouvelle insulte aiguë. De plus, les mères CGS présentent des altérations des soins maternels, reflétées par une augmentation du degré de fragmentation des signaux maternels reçus par les petits. La durée moyenne des épisodes de léchage / toilettage est réduite tandis que le nombre moyen d’épisodes est augmenté, ce qui indique de nombreux épisodes courts de comportement nourricier.
La préférence pour le saccharose est également déprimée dans les barrages CGS par rapport aux barrages témoins, ce qui suggère la présence d’anhédonie. Enfin, les barrages CGS présentent également une augmentation des comportements liés à l’anxiété, mesurée par une réduction du temps passé dans les quadrants ouverts de l’EZM par rapport aux barrages témoins. Chez la progéniture, l’exposition au CGS in utero entraîne une diminution de la prise de poids pendant la période postnatale du jour postnatal 7 au jour 21, bien qu’il n’y ait aucune différence à la naissance.
Cette réduction de la prise de poids corporel est présente chez la progéniture des deux sexes. Lors de la tentative de cette procédure, l’établissement d’un calendrier pour l’obtention de grossesses programmées et la mise en œuvre cohérente de l’ensemble de la série, il est essentiel d’établir un calendrier pour l’obtention de grossesses chronométrées. Cette technique peut aider à répondre à des questions intéressantes telles que le stress psychosocial maternel peut-il avoir des effets spécifiques au sexe sur la fonction placentaire ou le développement et le comportement du cerveau de la progéniture?
Et ces effets peuvent-ils être inversés ou modifiés par une intervention pharmacologique ou des soins maternels postnatals?
