Notre protocole fournit une méthode détaillée pour une induction fiable et une évaluation complète de la dyskinésie induite par la lévodopa dans un modèle de la maladie de Parkinson chez le rat. Le principal avantage de notre échelle d’évaluation de la dyskinésie est qu’elle permet de quantifier à la fois l’intensité d’un mouvement involontaire anormal donné et le temps passé à présenter ce comportement. Des modèles animaux fiables de dyskinésie induite par la lévodopa sont essentiels pour atteindre l’objectif final de trouver des traitements efficaces pour réduire ou éliminer les effets secondaires chez les personnes atteintes de la maladie de Parkinson.
Commencez la préparation de l’expérience en pesant les rats chaque semaine pour calculer la quantité de médicament appropriée en fonction des changements de poids. Fournissez aux rats des friandises nutritionnellement complètes et très appétissantes. Le premier jour du traitement par la L-DOPA, transférer les rats dans un seul logement fourni avec un enrichissement approuvé par le Comité de soins et d’utilisation des animaux de l’établissement.
Et maintenez les rats dans le boîtier unique tout au long de l’étude pour éviter l’interférence des pairs avec les évaluations comportementales. Les jours d’évaluation de la dyskinésie, retirez les bouteilles d’eau, les supports de nourriture et l’enrichissement dans la cage pour éviter toute interférence avec les évaluations comportementales, et placez les cages sur un support en fil d’acier à un angle d’environ 45 degrés, puis retournez les étiquettes d’identification vers le haut. Avant l’injection de L-DOPA, ajouter le volume approprié de solution saline stérile au mélange de L-DOPA lyophilisé et de bensérazide pré-pesé dans le flacon ambré et bien agiter pendant 10 secondes.
Immédiatement après la préparation, remplissez le volume requis du mélange L-DOPA-Benserazide pour chaque animal dans des seringues individuelles montées avec une aiguille de calibre 26 et étiquetez chaque seringue avec une identification individuelle de l’animal. Après avoir amené la première cage au banc d’injection, retirez le rat de sa cage pour le placer sur la surface d’injection. Utilisez la main non dominante pour retenir la tête et les épaules du rat avec la paume contre la surface et frotter la peau sur le dos recouvrant les omoplates avec le pouce et l’index.
Utilisez la main dominante pour injecter du volume de L-DOPA dans l’espace sous-cutané entre les doigts, en gardant l’aiguille parallèle au corps pour éviter l’injection intramusculaire. Après l’injection, déplacez le rat dans la cage. Ensuite, réglez la minuterie pendant une à deux minutes et répétez la procédure en injectant un rat toutes les une à deux minutes jusqu’à ce que tous les rats soient injectés.
Le jour de l’évaluation, placez une minuterie à côté de la cage pour observer la dyskinésie induite par la lévodopa ou l’intensité du comportement LID tout en estimant la fréquence d’un comportement donné pendant la période d’évaluation. Évaluez l’intensité et la fréquence des mouvements de dyskinésie dystonique et hyperkinétique, y compris l’apparition initiale du comportement LID, le comportement maximal et la phase de déclin au nombre de points temporels souhaités. Si vous utilisez des intervalles d’évaluation d’une minute, réglez une minuterie pendant une minute pour évaluer le premier rat et continuez l’évaluation à travers tous les rats à des intervalles d’une minute.
L’évaluation LID pour les comportements involontaires anormaux chez les rats parkinsoniens a été classée pour inclure l’intensité et la fréquence des comportements. Une gamme de mouvements involontaires anormaux, y compris des comportements dystoniques, hyperkinétiques et stéréotypés ont été observés chez le rat. L’analyse représentative fournit un exemple des données présentées sous forme de DOSE de pointe LID sur l’ensemble de la chronologie expérimentale et du calendrier posologique.
La dose maximale lid a été définie comme un moment où le score LID moyen du groupe était le plus élevé. De plus, les données d’évaluation lid ont été examinées au cours de chaque cycle de temps d’évaluation quotidien à différentes concentrations de L-DPOA avec les groupes combinés et tracés en tant qu’animaux individuels. Le tissu post-mortem de sujets évalués comportementalement peut être utilisé pour explorer les mécanismes moléculaires associés aux dyskinésies induites par la lévodopa et l’impact des interventions thérapeutiques sur ces mécanismes moléculaires.
Des modèles animaux de dyskinésie induite par la lévodopa ont été utiles pour élucider plusieurs mécanismes censés sous-tendre cette maladie comportementale. Cette compréhension a conduit à l’évaluation préclinique et clinique de plusieurs cibles.
