Dosage adapté sur microplaques basé sur la densité optique pour caractériser l’infection par actinobacteriophages

En fin de compte, nous nous intéressons aux interactions bactériophage-hôte. Ce protocole permet de mesurer l’infection par les phages chez les bactéries à croissance lente, générant des mesures d’infection descriptives. Cette méthodologie est essentielle dans l’étude de la coévolution bactériophage-hôte chez les bactéries actinomycètes à croissance lente.

Les méthodes rapides sur microplaques donnent d’excellents résultats pour les hôtes bactériens à croissance rapide, mais sont trop brèves pour mettre en évidence la progression de l’infection bactérie-phage chez les hôtes bactériens à croissance plus lente, tels que les actinomycètes. Notre méthode est adaptée aux bactéries à croissance lente, ce qui permet aux bactéries et aux phages d’être co-cultivés pendant les plusieurs jours nécessaires pour caractériser la dynamique de l’infection des bactériophages. Notre protocole permet d’évaluer les interactions bactériophage-hôte pour détecter les bactéries à croissance lente dans des microplaques plutôt que d’exiger un sous-échantillonnage à partir d’un flacon de culture plus grand.

Ce protocole utilise des matériaux facilement disponibles pour s’adapter à des temps de culture prolongés et permet de plaquer plusieurs répétitions dans une seule microplaque.