Détection de cassures d’ADN dans des cellules humaines en division par dosage de comète neutre

L’objectif principal de notre laboratoire est d’étudier les mécanismes qui favorisent la duplication du génome dans les cellules humaines. Notre projet vise à comprendre comment les remodeleurs de la chromatine agissent au niveau des fourches de réplication pour favoriser la synthèse de l’ADN. Les fourches subissent plusieurs événements de traitement lorsqu’elles sont exposées à des contraintes de réplication.

Ces événements donnent lieu à des intermédiaires de réplication qui peuvent se transformer en cassures toxiques s’ils ne sont pas réparés. Des études récentes démontrent que la présence de lacunes d’ADN simple brin dans l’ADN naissant peut provoquer une instabilité du génome et est un déterminant de la sensibilité à la chimiothérapie. Nos travaux portent sur le rôle d’un remodeleur de nucléosomes conservé, SNF2L, dans la synthèse de l’ADN.

SNF2L se déplace avec des fourches de réplication, mais le mécanisme d’action est mal caractérisé. L’utilisation du protocole d’essai des comètes nous permet d’évaluer les conséquences sur la stabilité de la fourche en l’absence de SNF2L.