Hyperinsulinemic-Euglycemic קלאמפ של עכברוש המודע

Summary

מהדק hyperinsulinemic-euglycemic הוא "תקן הזהב" להערכת פעילות האינסולין. אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע מגרה ספיגת הגלוקוז. כמות הגלוקוז אקסוגניים חדורים לפעול נגד זה טיפה מעיד על הרגישות לאינסולין. כאן ההליך מבוצע על חולדה, מודע מעצורים.

Abstract

סוכרת מסוג 2 (T2D) במהירות העולה שכיחות. מאופיין בייצור אינסולין או לקוי או חוסר היכולת לנצל מיוצר אינסולין, התוצאות T2D ברמות גלוקוז גבוהות בדם. "תקן הזהב" בהערכת הרגישות לאינסולין הוא מהדק hyperinsulinemic-euglycemic או מהדק אינסולין. בהליך זה, אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע וכתוצאה מכך לירידת רמת הסוכר בדם. כדי לשמור על רמת הסוכר בדם ברמה קבועה, גלוקוז אקסוגניים (D50) הוא החדיר לתוך מחזור הדם הורידי. כמות הגלוקוז חדורים לשמור על הומאוסטזיס מעיד על הרגישות לאינסולין. כאן, אנו מציגים את ההליך מהדק בסיסי החולדה צינתור כרוניים, מעצורים מודע. מודל זה מאפשר לדם להיאסף עם מתח מינימלי לחיה. בעקבות אינדוקציה של הרדמה, חתך קו האמצע הוא עשה את עורק התרדמה השמאלי משותפת וריד הנכונים צינתור. קטטר מוכנס סמוקות עם מלוחים heparinized, exteriorized אז ומאובטחת. בעלי חיים מותר להתאושש במשך 4-5 ימים לפני ניסויים, עם עלייה במשקל במעקב יומיומי. רק בעלי חיים אלה להחזיר משקל טרום ניתוח רמות משמשים לניסויים. ביום הניסוי, חולדות הם צמו ומחובר משאבות אינסולין המכיל D50. גלוקוז Baseline מוערכת מקו עורקי ומשמש אמת מידה לאורך הניסוי (euglycemia). בעקבות זאת, אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע לתוך מחזור הדם הורידי. כדי להתאים את ירידת רמת הסוכר בדם, הוא החדיר D50. אם קצב עירוי D50 עולה על שיעור ספיגת, עלייה ברמת הגלוקוז תתרחש. באופן דומה, אם שיעור אינו מספיק כדי להתאים את ספיגת הגלוקוז בגוף כולו, ירידה תתרחש. טיטרציה של גלוקוז ממשיך עד קריאות גלוקוז יציבה מושגות. רמות הגלוקוז ואת שיעורי עירוי גלוקוז יציבה בתקופה זו נרשמות ודיווח. תוצאות מספקים מדד של רגישות הגוף לאינסולין. הטכניקה יכולה להיות מעודן כדי לעמוד בדרישות הניסוי הספציפי. זה עוד יותר משופר על ידי שימוש קליעים נותבים רדיואקטיבי שיכול לקבוע אינסולין גירוי ספציפי רקמות ספיגת הגלוקוז, כמו גם המחזור כולו הגלוקוז בגוף.

Protocol

ת: צנתור עורקי כירורגי של Circulation ו ורידי

חלק 1: עורקים צנתר ורידי הכנה

1. חותכים 15 ס"מ של PE-50 (קוטר פנימי של 0.58 מ"מ (0.023 ") x קוטר חיצוני של 0.965 מ"מ (0.038"). Cut קטע 1mm של צינורות silastic (0.76mm (0.030 ") בקוטר פנימי x 1.65mm (0.065 ") קוטר חיצוני) לשימוש הרחקה חרוז. הרחקה חרוז מונע מן החולדה מוציאה את הקטטר פעם זה נמצא במקום.
2. הכנס את קצות מלקחיים לנתח מיקרו לתוך לומן של חרוז הרחקה בעדינות להחזיק את קצות המלקח....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

פיתחה בתחילה לחקירה של הרגישות לאינסולין אצל בני אדם, ההליך מהדק עתה מותאם מינים אחרים כולל חולדות מעבדה ועכברים. במודלים של בעלי חיים חקירות של תנגודת לאינסולין מספק סיוע משמעותי בהבנת הפתופיזיולוגיה של רגישות לאינסולין פתולוגיות הקשורות כמו גם זיהוי התערבויות טי.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
שם מגיב	חברה	מספר קטלוגי	הערות (אופציונלי)
Tubing Intramedic פוליאתילן (PE-50)	פישר סיינטיפיק	14-170-12B	קוטר פנימי של 0.58 מ"מ (0.023 ") x קוטר חיצוני של 0.965 מ"מ (0.038")
Dow Corning Silastic Tubing מעבדה	פישר סיינטיפיק	11-189-15C	קוטר פנימי של 0.76 מ"מ (0.030 ") x קוטר חיצוני של 1.65mm (0.065")
Tygon S-50-HL רפואי Tubing	הרווארד Apparatus	PY2 72-1251	קוטר פנימי של 3.2mm (0.125 ") x קוטר חיצוני של 4.7mm (0.1875")
Loctite Super Glue	Grand & Toy	32237	ג'ל בקרה
להב כירורגי סטרילי	VWR	BD371610
Curved מלקחיים הביתור Micro	ג'ורג' Tiemann ושות'	160-20	x 2
מלקחיים הביתור מיקרו סטרייט	ג'ורג' Tiemann ושות'	160-15	x 2
Curved Hemostat	ג'ורג' Tiemann ושות'	105-1135	x 2
סטרייט Hemostat	ג'ורג' Tiemann ושות'	105-1130	x 2
עצה Hemostat משמרות	רובינס מכשירים, Inc	15.09-2-004
כירורגיה מספריים סטרייט	ג'ורג' Tiemann ושות'	105-402
VENOJECT Multi-Sample Luer מתאם	Terumo מוצרים רפואיים	810127A	21 מד, 1 פנימה
צנתר סטרילי ההיכרויות	בקטון דיקינסון	406999
14 מד בלאנט מחט	בקטון דיקינסון	511310	14 מד, 2 פנימה
תפר כירורגי סטרילי	ג'ונסון & ג'ונסון מוצרים רפואיים	1679H	משי, בגודל 3-0
לא סטריליים כירורגי תפר	Angiotech Pharmaceuticals, Inc	SP116	משי, בגודל 4-0
ספוגיות כותנה	VWR	10806-005
גזה רפידות 4ply	VWR	CA43845-062
בעלי חיים קטנים קליפרס Cordless	הרווארד Apparatus	729063
Isoflurane	Halocarbon מוצרים קורפ	IPN-45
הרדמה לעגלה	בנסון תעשיות רפואיות בע"מ
70% אתנול	פישר סיינטיפיק	HC-1000
אנטיספטי בבטאדין פתרון	הפצה המערבי והתרופות מרכז בע"מ	105267
דגם 11 פלוס משאבת מזרק	הרווארד Apparatus	702208
Tubing נירוסטה מצמדים	הרווארד Apparatus	72-4434	23 מד, 0.3 פנימה
Tubing נירוסטה Plugs	הרווארד Apparatus	72-4436	23 מד, 0.5 פנימה
נירוסטה בלאנט מחטים	Instech Laboratories, Inc	LS22	22 מד
60 תואר ה-Y מחברים	חלקים קטנים	STCY-22-05	22 מד
CritSpin Micro-המטוקריט צנטריפוגה	איריס עיבוד המדגם	CS12
מיני צנטריפוגה	פישר סיינטיפיק	05-090-100
צנטריפוגה צינורות Micro	VWR	53550-778
50 מ"ל צנטריפוגות צינורות פוליפרופילן	VWR	89004-364
1ml פלסטיק עצה סליפ מזרקים	בקטון דיקינסון	309602
3ml פלסטיק Luerlok מזרקים עצה	בקטון דיקינסון	309585
קרישה הפארין בהזרקה	הפצה המערבי והתרופות מרכז בע"מ	102824	יצרן: ליאו פארמה בע"מ קונצרט כלשהו. 1000 IU
EDTA פתרון	Promega קורפ	V4231	0.5 מ ', pH 8.0
מלוח	הפצה המערבי והתרופות מרכז בע"מ	ABB7983154	יצרן: נתרן כלוריד Hospira 0.9%
50% דקסטרוז	Vetoquinol	8DEX012D
Humulin-R	אלי לילי	HI-210	100U/ml
אינסולין מזרקים 1ml	בקטון דיקינסון	309311
Fisherbrand * המטו-Seal איטום	פישר סיינטיפיק	02-678
Fisherbrand * Microhematocrit צינורות נימי	פישר סיינטיפיק	22-362-574
One Touch Ultra רצועות הבדיקה	LifeScan, Inc	AW 085-314H
אחת דם Ultra Touch גלוקוז Meter	LifeScan, Inc	085 AW-314B
Pentobarbitol נתרן	Ceva סנטה Animale	1715 138	קונצרט כלשהו. 54.7mg/ml
האדום מעבדה Tape תיוג	VWR	89097-932
סימון כחול מעבדה Tape	VWR	89097-936
לשקול את סולם	פישר סיינטיפיק	01-913-88
מערבולת	VWR	58815-234
שעון עצר	VWR	62344-641