עורק ריאתי פסים דגם של עומס המושרה היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון

Summary

אנו מציגים שיטה כירורגית לזירוז היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון בחולדות.

Abstract

נכון חדרית (RV) כשל הנגרם על ידי עומס ממושך הוא תורם מרכזי על התחלואה והתמותה מספר הפרעות ריאות. לשחזור ואמין מודלים חייתיים של RV כשל הן מוצדקת ולכן על מנת לחקור מנגנוני המחלה ואפקטים של אסטרטגיות טיפוליות אפשריות. פסים של תא המטען ריאתי היא שיטה נפוצה לזירוז היפרטרופיה RV מבודד אבל באופן כללי, מודלים שתואר לעיל לא הצליחו ליצור מודל יציב של RV היפרטרופיה וכישלון.

אנו מציגים מודל עכברוש של לחץ יתר הנגרמת RV היפרטרופיה הנגרמת על ידי עורק ריאתי פסים (PTB) המאפשר מתבטא בצורות שונות של RV היפרטרופיה עם ובלי RV כשל. אנו משתמשים המהדק ligating ששונה כדי לדחוס סרטון טיטניום סביב תא-המטען ריאתי קוטר פנימי מוגדר מראש. אנו משתמשים קטרים שונים קליפ לזירוז בשלבים שונים של המחלה של היפרטרופיה RV מתון לכישלון RV מפוצה.

RV היפרטרופיה מפתחת באופן עקבי בחולדות נתון להליך PTB, בהתאם לקוטר של הסרטון סימון יישומית, אנחנו יכולים להפיק עולה מחלות שונות ועד היפרטרופיה מדובבים RV מפוצה חמור כשל עם גילויי לב במיוחד.

המודל PTB הציג הוא שמודל תקף וחזק של עומס המושרה RV היפרטרופיה וכישלון זה יש כמה יתרונות אחרים דגמי סימון כולל הפארמצבטית גבוהה ואפשרות גרימת כשל RV חמור ולא מפוצה.

Introduction

החדר הימני (RV) יכול להסתגל עומס לחץ מתמיד. עם הזמן, אולם, מנגנונים גמישים להיכשל לקיים את תפוקת הלב, הקרוואן dilates, בסופו של דבר RV נכשל. תפקוד RV הוא הגורם העיקרי prognostic של מספר הפרעות ריאות כולל לחץ דם עורקי ריאתי (הפה), לחץ דם ריאתי תרומבואמבוליים (CTEPH) של צורות שונות של מחלת לב מולדת עם עומס הלחץ (או אמצעי אחסון) של לקרוואן למרות הטיפול האינטנסיבי, RV כשל נשאר השולט סיבת המוות בתנאים אלו.

כתוצאה מאפיינים ייחודיים^1,2 ופיתוח embryological³ של הקרוואן, הידע המופק ספיקת לב שמאל לא יכול פשוט להיות אקסטרפולציה ספיקת לב ימין. מודלים חייתיים של ספיקת לב ימין ולכן הדרושים על מנת לחקור את המנגנונים של RV כשל ואסטרטגיות טיפול תרופתי פוטנציאליים.

ישנם ניסיוני מודלים של יתר לחץ דם ריאתי שנגזרות SU5416 בשילוב עם היפוקסיה (SuHx)⁴ או monocrotaline (MCT)⁵, אשר זירוז RV אי ספיקת למחלות להערכת ריאתי. מודלים אלה משמשים להעריך הטיפולית השפעות הסמים את המטרה להערכת ריאתי. גם את SuHx וגם את דגם MCT הם afterload שאינו קבוע דגמי קרוואנים כשל. כתוצאה מכך, זה בלתי אפשרי להסיק אם שיפור תפקוד RV לאחר התערבות היא משנית ביחס afterload הפחתת תופעות כלי דם ריאתי או אם היא נגרמת על ידי השפעה ישירה על לקרוואן בנוסף, דגם MCT יש מספר השפעות לבבי במיוחד.

במודלים סימון עורק ריאתי ניסיוני, afterload של הקרוואן קבוע עקב כיווץ מכאני של תא המטען ריאתי. דבר זה מאפשר חקירת ההשפעות לב ישירה של התערבות על הקרוואן עצמאית כל ההשפעות כלי דם ריאתי^6,7,8,9. בדרך כלל, פסי מתבצע על ידי הצבת מחט לאורך המטען ריאתי. חבל ממוקמים סביב המחט ואת תא המטען ריאתי וקשר עם קשר, ואז המחט הוסר עוזב את התפר סביב המטען ריאתי. בהתאם מד של המחט, דרגות שונות של constrictions יכול להיות מיושם, אך למרות גישה זו בשימוש נרחב, יש לו כמה חסרונות. ראשית, מקוטר פסים הוא לא בדיוק זהה הקוטר החיצוני של המחט כמו קשירה קשורה סביב המחט וגם תא המטען ריאתי. שנית, ייתכן וריאציה משמעותית עד כמה הדוק הקשר קשורה ומקשה להתרבות מידה מסוימת של פסים. זה יוביל וריאציה בקוטר סימון ועל ידי כך פיזור גדול יותר. לבסוף, הקשר עשוי לבוא חופשי לאורך זמן.

מחקר אחד חל על סרטון טנטלום עצומות למחצה סביב עורק ריאתי¹⁰. הם דחוסים הסרטון סביב המטען ריאתי בשטח הפנימי של 1.10 מ מ² , לעומת זה נתון פסים בתפר באמצעות מחט 18 גרם של חולדות. בסך הכל, פסים עם הקליפ היה קשור עם פחות סיבוכים כירורגיים-פרי, נתונים שונות.

מבוססת על עקרונות שתואר על ידי Schou ואח¹¹, אנחנו עוד יותר שפותחו, אפיינו את המטען ריאתי פסים (PTB) מודל של RV היפרטרופיה וכישלון. כאן, אנו מציגים את הניסיון שלנו באמצעות מודל זה מבוסס על תוצאות מחקרים קודמים^12,13. עבור דגם זה, סרטון טיטניום דחוס סביב תא-המטען ריאתי מדויק מראש הקוטר הפנימי, אשר עשוי להיות מותאם בתערובות לזירוז פנוטיפים כשל RV ברורים.

Protocol

כל העכברושים טופלו בהתאם להנחיות הלאומי הדני שמתואר החוק הדני על ניסויים בבעלי חיים וסדר השרים על ניסויים בבעלי חיים. כל הניסויים שאושרו על-ידי ועדת הבדיקה אתיקה מוסדית, לפי החוק הדני לחקר בעלי חיים (מספר אישור 2012-15-2934-00384, דנית משרד המשפטים).

1. התאמת המהדק Ligating

הערה: רצועות של תא המטען ריאתי מבוצע עם ששונה פתוח ligating המהדק עם הלסת בזווית. Applier משתנה עם מנגנון מתכוונן להפסיק לעצור את הדחיסה הלסתות מגיעות המרחק המדויק של אחד מהשני. כאשר כספת קטנה נבדק קליפ דחוס עם applier שונה, לומן נמשכת בין הרגליים של הסרטון בקוטר מסוים על פי ההתאמה של מנגנון עצירה (איור 1).

1. לבחור את הקוטר של פסים הרצוי, למשל, 0.6 מ"מ.
2. התאם את המהדק ligating עד המרחק בין הלסתות הוא 1.0 מ מ כאשר דחוס באופן מלא. זה משאיר של לומן 0.6 מ"מ כמו קליפ שני הרגליים יש עובי של 0.2 מ מ.

איור 1: הליך PTB. (א) כירורגי כלים המשמשים עבור ההליך PTB כולל את המהדק ligating (חץ כחול). (B) התחנה מתכוונן מנגנון של נבדק קליפ applier. להפוך את גלגל השיניים (חץ כחול) יתאים את המיקום של ה-pin (חץ צהוב), אשר עוצר את סגירת applier הלסתות מגיעות מרחק מסויים אחד מהשני. המרחק מקביל פעמיים את העובי של הרגליים של הקליפ פלוס הקוטר הפנימי של הסרטון, כאשר הסרטון דחוס, התפקיד באמצעות מחט למשל בקוטר חיצוני ידוע. (ג) applier דחיסת קליפ טיטניום הקוטר הפנימי המדויק שצוין מראש על-ידי התאמת applier. קוטר (D) הפנימי של הסרטון דחוס יכול להיות מותאם בתערובות לזירוז severities שונות של RV היפרטרופיה וכישלון. עבור הנתונים שהוצגו, הקוטר הפנימי של 1.0 מ מ שימשה לזירוז מתון RV היפרטרופיה הקוטר הפנימי של 0.6 מ"מ שימש כדי לגרום כשל RV מתון, הקוטר הפנימי של 0.5 מ מ שימש כדי לגרום כשל חמור RV. (E) הסרטון לאחר היישום סביב המטען ריאתי. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

2. הכנה של העכברוש

הערה: משטרי אחרים של משככי כאבים ניתן להחיל.

1. השתמש Wistar חולדה היונקים במשקל של 100-120 גר'. כדי לשמור על טמפרטורת הגוף במהלך הניתוח, השתמש כרית החימום מקורה.
2. לניתוח, להשתמש שמכונת ההנשמה מוגדר tidal volume של-1.75 מ של קצב נשימה של 75 לכל מין.
3. להרדים את העכברוש עם sevoflurane (mix 7% ב- 1.5 ליטר של O₂) בתא אינדוקציה למשך 5 דקות. לצנרר את החולדה באמצעות בצינורית הרביעי 17 גרם, שבו 2 מ מ דיסטלי של המחט כרתו לו על מנת הקטטר רך לכסות את הטיפ. הסר את המחט וחבר את הצינורית ההנשמה.
4. מניחים את החולדה על גבו על כרית חימום. ודא צנרור נכונה על ידי התבוננות תנועות בית החזה. אלה צריך להיות ללא הבדלי צד ואת הקצב עם ההנשמה.
   הערה: היעדרות של תנועות בית החזה, התכווצויות בבטן, האינפלציה של הקיבה בבטן השמאלית העליונה הם סימנים של שפופרת במקומה. הסר את הצינורית, להחזיר את החולדה התא אינדוקציה, מחדש לצנרר.
5. לאחר צנרור נכונה, להפחית את sevoflurane לריכוז תחזוקה (מיקס 3.5% ב- O_2, 1.5 ליטר/דקה) ולתקן את כפות רגליו של החולדה כרית החימום.
6. אשר prober ההרדמה על-ידי בדיקת הרפלקסים נסיגה של הגפיים באמצעות מלקחיים לסחוט את כפות רגליו של החולדה.
7. להחדיר את החולדות. הבופרנורפין (0.1 מ"ג/ק"ג subcutaneously (ש)), carprofene (5 מ"ג/ק"ג ספורטינג) כדי להקל על הכאב.
8. מגלח את החזה ולחטא עם chlorhexidine.

3. בידוד של המטען ריאתי

1. עם זוג מספריים, עושים חתך 2 ס מ של העור לאורך החלק האמצעי של עצם החזה. לזהות את השריר החזה וחותכים שלו מצורף בחזה ובצלעות. לזהות את 2^nd, 3^rdוקוסטה^th 4 להלן.
2. באופן אופציונלי, תפוס את קוסטה 2^nd עם מלקחיים קיבוע, לשים התפר (4-0, multifilament, שנספג) סביב קוסטה 2^nd מן המרחב הבין-צלעי 1^סנט החלק המדיאלי התחתון של המרחב הבין-צלעי 2^nd . לקשור קשר המשרד על מנת מאתרים ומפסיקים את עורק החזה הקדמי.
   הערה: אפשרות זו שימושית אם הדימום מ עורק החזה הקדמי הוא נושא חוזרים ונשנים.
3. לחתוך את 4^ה, 3^rdו- 2^nd קוסטה קרוב לעצם החזה עם זוג מספריים, בזהירות לנתח את השרירים הבין-צלעי עד בוצע ניקור השמאלי מלא. אם דימום של עורק החזה הקדמי מתרחש, לדחוס עם pean, מאתרים ומפסיקים את העורק.
4. הוספת מפסק בין עצם החזה של costae ופתח אותו כדי לקבל שדה הפעולה טוב. בחלק העליון של השדה היא התימוס כיסוי העורקים ואת תא המטען ריאתי. בזהירות הרם התימוס באמצעות של pean, תהפכו את זה כלפי מעלה על מנת לחשוף העורקים ואת תא המטען ריאתי להלן.
5. מדריך קצה hooklet כירורגית קטנה עם זווית 85 מעלות דרך הסינוס סביב הלב רוחבי ממוקם מאחורי הפרוזדור השמאלי. משוך את זה באמצע הדרך חזרה דרך הסינוס, להנחות את קצה התפס כלפי מעלה עד שיופיע בין העורקים ואת תא המטען ריאתי.
   1. הסר את כל רקמת החיבור המכסה את הטיפ עם מספריים איריס על מנת להפריד את עורק ריאתי אבי העורקים.
   2. חזור על השלב עם קרס גדול יותר (אופציונלי).
6. מדריך של מלקחיים שריר בזווית סביב המטען ריאתי דרך המעבר את hook(s). תתפוס את הצד של 10 ס מ קשירה (4-0, multifilament) ושל למשוך חצי הקשירה חזרה דרך המעבר. כעת המטען הריאות מופרדת מן העורקים, יכול להיות נשלט על ידי קשירה סביבו.

4. יישום של הקליפ

1. לטעון את מנוכי עונתיות ligating המהדק עם סרטון. מדריך בזהירות אחד של הלסתות, רגל אחת של הקליפ למרות המעבר סביב המטען ריאתי. השתמש את הקשירה למשוך בעדינות את המטען ריאתי כלפי מעלה ולתוך ההסתעפות של הקליפ.
2. כאשר המטען ריאתי הוא המזלג של הקליפ שני קצות הרגליים קליפ חינם של כל רקמת חיבור, לדחוס את הסרטון עם applier כדי להחיל את פסי צבע.
3. להתבונן איך הקרוואן מיד dilates בתגובה פסי צבע ולהסיר את הקשירה.

5. סגירת בית החזה

1. הסר את pean התימוס ותמקם התימוס לתנוחתה הטבעית. הסר את המדחק.
2. לסגור את בית החזה ב שלוש שכבות: השכבה הבין-צלעי שריר החזה הגדולים, את העור עם תפר (4-0, multifilament, שנספג). הכנס 2 מ של ספורטינג מלוחים כדי להחליף את נוזל איבד במהלך הניתוח.
3. לבטל את sevoflurane, ולשמור החולדה על ההנשמה (1.5 L של O2) עד שהוא מתחיל נושם באופן ספונטני. לאחר מכן, מוציא את הטובוס החולדה.
4. מתייחסים החולדות עם הבופרנורפין במי השתייה במשך שלושה ימים הבאים¹⁴ או להחיל נוהל כאבים דומים. לאחר שלושה ימים, החולדות התאוששו, ללא אי-הנוחות.
5. בשבועות הבאים, לרווחתם של חולדות, תופעות לוואי אפשריות צריך להיות מוערך על בסיס יומי. ריפוי הפצע ניקור חזה אמור לקבל תשומת לב מיוחדת במהלך השבוע הראשון על מנת לזהות סימנים של זיהום או אי ספיקה של cicatrices. אם החולדות מראים סימנים של כשלון לשגשג כולל השתפל פרווה, ניידות לקוי, בעיות נשימה, ירידה במשקל, שהם צריכים להיות תחת פיקוח מתמיד ולא מורדמים אם הם מאבדים יותר מ 20% ממשקל גופם או לפתח לפתח מערכת הנשימה אי ספיקה.

6. ניתוח דמה

1. לבצע ניתוח דמה על-ידי ביצוע כל השלבים לעיל למעט היישום של הסרטון (שלב 4).

תוצאות

באמצעות ההליך PTB המתוארים במחקרים קודמים שלנו קבוצה^12,13, אנחנו המושרה RV היפרטרופיה (PTB מתון) על ידי פסים עם סרטון 1.0 מ מ, מידה מתונה של RV כשל (PTB מתון) על ידי ערעור עם סרטון 0.6 מ"מ, תואר חמור RV כשל (PTB חמורה) על ידי ערעור עם סרטון 0.5 מ מ. העכברושים נתון...

Discussion

אנו מתארים שיטה נגיש, מאוד לשחזור של עורק ריאתי פסים באמצעות המהדק ligating ששונה כדי לדחוס סרטון טיטניום סביב המטען ריאתי. על-ידי התאמת את applier כדי לדחוס את הקליפ במגוון קטרים הפנימי, פנוטיפים שונים של RV היפרטרופיה וכישלון יכולה להיגרם כולל כשל חמור RV עם גילוי לב במיוחד ההחרפה.

?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17 G IV Venflon Cannula	Becton Dickinson, US	393228	Distal 2 mm of the needle have been cut off
1 mL syringe + 26 G needle	Becton Dickinson, US	303172 & 303800
4-0 absorbable multifilament suture	Covidien, US	GL-46-MG	Polysorb, violet, 5x18"
4-0 multifilament ligature	Covidien, US	LL-221	Polysorb, violet, 98"
Buprenorphine	Indivior UK Limited		Local procurement, Temgesic 0.3 mg/mL
Carprofene	ScanVet, DK	27693	Norodyl 50 mg/mL
Chlorhexidine	Faaborg Pharma, DK		Local procurement
Contractor	Aesculap, Germany	BV010R	Blunt, self retaining, 70 mm
Ear Hooklet	Lawton, Germany	66-0261	Small, 14 cm, tip modified to an angle of 85°
Eye gel	Decra, UK		Lubrithal, Local procurement
Forceps, Delicate Tissue	Lawton, Germany	09-0020
Forceps, Dissecting	Lawton, Germany	09-0013	1 regular, 1 with tip modified to an angle of 100°
Gas Anesthesia System	Penlon Limited, UK	SD0217SL	Sigma Delta Vaporizer
Hair trimmer	Oster	76998-320-051
Horizon Open Ligating Clip Applier	Teleflex, US	137085	Modified with adjustable stop mechanism
Horizon Titanium Clips	Teleflex, US	001200	Small
Induction chamber	N/A
Iris Scissor	Lawton, Germany	05-1450
Iris Scissor	Aesculap, Germany	BC060R
Mechanical ventilator	Ugo Basile, Italy	7025
Microscissor	Lawton, Germany	63-1406
Microscope	Carl Zeiss, Germany	303294-9903
Needle Holder	Lawton, Germany	08-0011	TITEGRIP
Pean	Lawton, Germany	06-0100	Halsted-Mosquito, straight
Pro-Optha	Lohmann & Rauscher, Germany	16515	Tampon
Saline 9 mg/mL	Fresenius Kabi, DK	209319
Sevoflurane	AbbVie, US		Sevorane, Local procurement
Surgical hook	Lawton, Germany	51-0665	Cushing, 19 cm, tip modified to an angle of 90°
Surgical Tape	3M, US	1530-0	Micropore
Temperature Controller	CMA Microdialysis; Sweden	8003760	CMA 450
Weighing machine	VWR, US
Wistar rat weanlings	Janvier Labs, France		RjHan:WI, 100-120 g