A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
ישנם מספר הבדלים בין החדרים הימניים והשמאליים. עם זאת, הפתופיזיולוגיה של אוטם החדר הימני (RVI) לא הובהרה. בפרוטוקול הנוכחי, מוצגת שיטה ניתנת לשחזור ליצירת מודל עכבר RVI, אשר עשויה לספק אמצעי להסביר את המנגנון של RVI.
אוטם חדר ימין (RVI) הוא מצגת נפוצה בפרקטיקה הקלינית. RVI חמור יכול להוביל לתפקוד המודינמי קטלני והפרעות קצב. בניגוד למודל אוטם שריר הלב של העכבר (MI) הנפוץ שנוצר על ידי קשירת עורקים כליליים שמאליים, מודל העכבר RVI משמש לעתים רחוקות בשל הקושי הקשור ליצירת מודל. מחקר על המנגנונים והטיפול בשיפוץ RV ותפקוד לקוי המושרה על ידי RVI דורש מודלים של בעלי חיים כדי לחקות את הפתופיזיולוגיה של RVI בחולים. מחקר זה מציג הליך אפשרי ליצירת מודל RVI בעכברי C57BL/6J. יתר על כן, מודל זה אופיין על סמך הדברים הבאים: הערכת גודל אוטם ב 24 שעות לאחר MI, הערכה של שיפוץ לב ותפקוד עם אקוקרדיוגרפיה, הערכת המודינמיקה RV, והיסטולוגיה של אזור האוטם ב 4 שבועות לאחר RVI. בנוסף, בוצע יציקת כלי דם כלילית כדי לבחון את סידור העורקים הכליליים ב- RV. מודל עכבר זה של RVI יקל על המחקר על מנגנונים של אי ספיקת לב נכונה ויחפש מטרות טיפוליות חדשות של שיפוץ קרוואנים.
החדר הימני (RV), שנחשב במשך זמן רב לצינור פשוט המחובר לעורק הריאתי, הוזנח שלא כדין במשך שנים רבות1. עם זאת, לאחרונה חלה התעניינות גוברת בתפקוד הקרוואנים מכיוון שהיא ממלאת תפקיד חיוני בהפרעות המודינמיות 2,3 ועשויה לשמש כמנבאת סיכון עצמאית למחלות לב וכלי דם 4,5,6,7. מחלות RV כוללות אוטם RV (RVI), יתר לחץ דם בעורקים ריאתיים ומחלה וולוולרית8. בניגוד לעניין העצום ביתר לחץ דם בעורקים ריאתיים, RVI נותר מוזנח 7,9.
RVI, המלווה בדרך כלל באוטם שריר הלב נחות-אחורי10,11, נגרם על ידי חסימת עורק כלילי ימני (RCA). על פי מחקרים קליניים, RVI חמור ככל הנראה גורם להפרעות המודינמיות והפרעות קצב, כגון לחץ דם, ברדיקרדיה וגוש אטריו-חדרי, הקשורים לתחלואה גבוהה יותר בבית החולים ולתמותהשל 12,13,14. תפקוד RV יכול להתאושש באופן ספונטני במידה מסוימת גם בהיעדר רפרפוזיה15,16. קיימים מספר הבדלים מורפולוגיים ותפקודיים בין החדר השמאלי (LV) לבין RV17. RV הוא האמין להיות עמיד יותר איסכמיה מאשר LV8, בין היתר בשל היווצרות סירקולציה בטחונית נרחבת יותר לאחר RVI. הבהרת ההבדלים בין אוטם LV (LVI) ל-RVI וזיהוי המנגנונים הבסיסיים יספקו מטרות טיפוליות חדשות להתחדשות לב ואי ספיקת לב איסכמית. עם זאת, בשל הקושי הקשור ליצירת מודל עכבר RVI, המחקר הבסיסי על RVI מוגבל בעיקר.
מודל חייתי גדול של RVI נוצר על ידי קשירת RCA בחזיר18, אשר קל יותר לתפעול בגלל RCA גלוי. בהשוואה למודל החיות הגדול, למודל העכבר יש את היתרונות הבאים: נגישות רבה יותר במניפולציה גנטית, עלות כלכלית נמוכה יותר ותקופת ניסוי קצרה יותר19,20. למרות שמודל RVI של עכבר המתמקד בהשפעת RVI על פונקציית LV דווח בעבר, השלבים המפורטים של ההליך, הקשיים ונקודות המפתח של הפעולה, ומאפייני המודל כגון שינויים המודינמיים לא הוכנסו במלואם 9,21.
מאמר זה מספק הליכים כירורגיים מפורטים ליצירת מודל עכבר של RVI. יתר על כן, מודל זה התאפיין במדידה אקוקרדיוגרפית, הערכה המודינמית פולשנית וניתוח היסטולוגי. יתר על כן, בוצע יציקת כלי דם כלילית כדי לבחון את סידור העורקים הכליליים ב-RV. הטכניקה שהוצגה במאמר זה תסייע למתחילים לתפוס במהירות את הדור של מודל RVI העכבר עם תמותת פעולה מקובלת וגישות הערכה אמינות. מודל העכבר של RVI יעזור לחקור את המנגנונים של אי ספיקת לב נכונה ולחפש מטרות טיפוליות חדשות של שיפוץ קרוואנים.
כל ההליכים בוצעו על פי המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שפורסם על ידי המכונים הלאומיים לבריאות בארה"ב (פרסום NIH מס '85-23, תוקן בשנת 1996) ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של בית החולים ננפאנג, האוניברסיטה הרפואית הדרומית (גואנגג'ואו, סין). עכברי C57BL/6J זכרים בריאים (בני 8-10 שבועות; משקל גוף, 25-30 גרם) התקבלו ממרכז החיות של האוניברסיטה הדרומית לרפואה. ניתן גם להשתמש בעכברות נקבות, אך ערבוב שני המינים אינו מומלץ בשל ההשפעות הפוטנציאליות של הבדלי המין. לאחר הגעתם, העכברים שוכנו תחת מחזור כהה/אור של 12 שעות/12 שעות (3-4 עכברים לכל כלוב), עם מזון ומים של ad libitum.
1. הכנה לניתוח
2. קשירת קבע של העורק הכלילי הימני
3. הערכה אקוקרדיוגרפית של תפקוד ה-RV לאחר הניתוח
הערה: עבור אקוקרדיוגרפיה, השתמש בבדיקת MS400D עם תדר מרכזי של 30 MHz, המחוברת למערכת הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה (ראה טבלת חומרים). בדיקת האקוקרדיוגרפיה מבוצעת 4 שבועות לאחר הניתוח.
4. מדידות פולשניות של המודינמיקה של RV
הערה: המודינמיקה של RV מוערכת באמצעות צנתור לב ימין 4 שבועות לאחר RVI. צנתר 1.0 F יחד עם מערכת ניטור מוחל.
5. יציקת כלי דם כלילית באמצעות חומר יציקה וסקולרי
במחקר זה, עכברים הוקצו באופן אקראי לקבוצת RVI (n = 11) או פעולת ה-sham (n = 11). הגבס הכלילי בשני לבבות עכברים רגילים מוצג באיור 1A. בתגובה לקשירת RCA, גובה מקטע ST נצפה בעופרת III של האק"ג (איור 1B). יתר על כן, צביעה של 2,3,5,5 טריפניל טטרזוליום כלוריד (TTC) הראתה שאזור האוטם מהווה 45% ...
סיקארד ועמיתיו מצרפת דיווחו לראשונה על מודל עכבר של RVI בשנת 2019, שתיאר את התהליך הכירורגי והתמקד באינטראקציה בין LV ל- RV לאחר RVI9. עם זאת, עד כה, אף מחקר לא דיווח על שימוש במודל זה למחקרים נוספים. הליך מפורט יותר יעזור לחוקרים להשתמש במודל העכבר של RVI לחקירה. בניגוד לדו"ח של Sicard et
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82073851 לשמש) ומהקרן הלאומית למדע הבתר-דוקטורט של סין (2021M690074 ללין).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Sigma | T8877 | For TTC staining |
Animal Mini Ventilator | Havard | Type 845 | For artificial ventilation |
Animal ultrasound system VEVO2100 | Visual Sonic | VEVO2100 | Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque |
Batson’s #17 Anatomical Corrosion Kit | Polyscience Inc | 7349 | For vasculature casting |
buprenorphine | Isoreag | 1134630-70-8 | For reduce the pain of mice after surgery |
C57BL/6J mice + D29A1A2:D27 | Animal Center of South Medical University | - | For the generation of mouse RVI model |
Camera | Sangnond | For taking photograph | |
Cold light illuminator | Olympus | ILD-2 | Light for operation |
electrocardiograph | ADI Instrument | ADAS1000 | For recording electrocardiogram |
hair removal cream | Reckitt Benchiser | RQ/B 33 Type 2 | Remove mouse hair |
Heat pad- thermostatic surgical system (ALC-HTP-S1) | SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO | ALC-HTP-S1 | Heating |
Hematoxylin-eosin dye | Leagene | DH0003 | Hematoxylin-eosin staining |
Heparin sodium salt | Macklin | H837056 | For heparization |
Isoflurane | RWD life science | R510-22 | Inhalant anaesthesia |
Lab made spatula | Work as a laryngoscope | ||
Lab made tracheal cannula | For intubation | ||
Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer | Midmark Corporation | VIP 3000 | Anesthetization |
Medical nylon suture (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | For chest close |
Microsurgical elbow tweezers | RWD life science | F11021-11 | For surgery |
Microsurgical scissors | NAPOX | MB-54-1 | For arteriotomy |
Millar Catheter | AD Instruments, Shanghai | 1.0F | Measurement of pressure gradient |
MS400D ultrasonic probe | Visual Sonic | MS400D | Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque |
needle forceps | Visual Sonic | F31006-12 | For surgery |
nitroglycerin | BEIJING YIMIN MEDICINE Co | For dilating coronary artery | |
Ophthalmic scissors | RWD life science | S11022-14 | For surgery |
Pentobarbital sodium salt | Merck | 25MG | Anesthetization |
PowerLab Multi-Directional Physiological Recording System | AD Instruments, Shanghai | 4/35 | Pressure recording |
Precision electronic balance | Denver Instrument | TB-114 | Weighing scale |
Silk suture (8-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 6-0 | coronary artery ligation |
Small animal microsurgery equipment | Napox | MA-65 | Surgical instruments |
tissue forceps | Visual Sonic | F-12007-10 | For surgery |
tissue scissor | Visual Sonic | S13052-12 | Open chest for hemodynamic measurement |
Transmission Gel | Guang Gong pai | 250ML | preparation for Echocardiography measurement |
Vascular Clamps | Visual Sonic | R31005-06 | For blocking blood from aorta |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved