Generación y caracterización del infarto de miocardio del ventrículo derecho inducido por ligadura permanente de la arteria coronaria derecha en ratones

Resumen

Hay varias diferencias entre los ventrículos derecho e izquierdo. Sin embargo, no se ha aclarado la fisiopatología del infarto del ventrículo derecho (RVI). En el presente protocolo, se introduce un método reproducible para la generación de modelos de ratón RVI, que puede proporcionar un medio para explicar el mecanismo de RVI.

Resumen

El infarto del ventrículo derecho (RVI) es una presentación común en la práctica clínica. La RVI grave puede provocar disfunción hemodinámica fatal y arritmia. En contraste con el modelo de infarto de miocardio (IM) de ratón ampliamente utilizado generado por la ligadura de la arteria coronaria izquierda, el modelo de ratón RVI rara vez se emplea debido a la dificultad asociada con la generación del modelo. La investigación sobre los mecanismos y el tratamiento de la remodelación y disfunción del RV inducido por RVI requiere modelos animales para imitar la fisiopatología de RVI en pacientes. Este estudio introduce un procedimiento factible para la generación de modelos RVI en ratones C57BL/6J. Además, este modelo se caracterizó en base a lo siguiente: evaluación del tamaño del infarto a las 24 h después del IM, evaluación de la remodelación cardíaca y la función con ecocardiografía, evaluación de la hemodinámica del RV e histología de la zona del infarto a las 4 semanas después de la RVI. Además, se realizó un yeso de vasculatura coronaria para observar la disposición arterial coronaria en RV. Este modelo de ratón de RVI facilitaría la investigación sobre los mecanismos de la insuficiencia cardíaca derecha y buscaría nuevas dianas terapéuticas de remodelación de RV.

Introducción

El ventrículo derecho (RV), que durante mucho tiempo se pensó que era un tubo simple conectado a la arteria pulmonar, se ha descuidado injustamente durante muchos años¹. Sin embargo, ha habido un creciente interés en la función de RV recientemente, ya que desempeña un papel esencial en los trastornos hemodinámicos ^2,3 y puede servir como un predictor de riesgo independiente de enfermedad cardiovascular ^4,5,6,7. Las enfermedades de RV incluyen infarto de RV (RV....

Protocolo

Todos los procedimientos se realizaron de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio publicada por los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos (Publicación NIH No. 85-23, revisada en 1996) y fueron aprobados por el Comité de Ética Animal del Hospital Nanfang, Universidad Médica del Sur (Guangzhou, China). Los ratones machos sanos C57BL / 6J (8-10 semanas de edad; peso corporal, 25-30 g) se obtuvieron del Centro de Animales de la Universidad Médica del Sur. También se pueden usar ratones hembra, pero no se recomienda mezclar ambos sexos debido a las posibles influencias de las diferencias sexuales. Después de su llegada, los raton....

Resultados

En este estudio, los ratones fueron asignados al azar al grupo RVI (n = 11) o operación simulada (n = 11). El yeso coronario en 2 corazones de ratón normales se muestra en la Figura 1A. En respuesta a la ligadura RCA, se observó elevación del segmento ST en la derivación III del ECG (Figura 1B). Además, la tinción de cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio (TTC) mostró que el área de infarto representa el 45% de la pared libre de RV a las 24 h postoperator.......

Discusión

Sicard y sus colegas de Francia informaron por primera vez un modelo de ratón de RVI en 2019, que describió el proceso quirúrgico y se centró en la interacción entre LV y RV después de RVI⁹. Sin embargo, hasta la fecha, ningún estudio ha informado el uso de este modelo para estudios adicionales. Un procedimiento más detallado sería útil para que los investigadores utilicen el modelo de ratón de RVI para la investigación. A diferencia del informe de Sicard et ^al.9

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride	Sigma	T8877	For TTC staining
Animal Mini Ventilator	Havard	Type 845	For artificial ventilation
Animal ultrasound system VEVO2100	Visual Sonic	VEVO2100	Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque
Batson’s #17 Anatomical Corrosion Kit	Polyscience Inc	7349	For vasculature casting
buprenorphine	Isoreag	1134630-70-8	For reduce the pain of mice after surgery
C57BL/6J mice + D29A1A2:D27	Animal Center of South Medical University	-	For the generation of mouse RVI model
Camera	Sangnond		For taking photograph
Cold light illuminator	Olympus	ILD-2	Light for operation
electrocardiograph	ADI Instrument	ADAS1000	For recording electrocardiogram
hair removal cream	Reckitt Benchiser	RQ/B 33 Type 2	Remove mouse hair
Heat pad- thermostatic surgical system (ALC-HTP-S1)	SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO	ALC-HTP-S1	Heating
Hematoxylin-eosin dye	Leagene	DH0003	Hematoxylin-eosin staining
Heparin sodium salt	Macklin	H837056	For heparization
Isoflurane	RWD life science	R510-22	Inhalant anaesthesia
Lab made spatula			Work as a laryngoscope
Lab made tracheal cannula			For intubation
Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer	Midmark Corporation	VIP 3000	Anesthetization
Medical nylon suture (5-0)	Ningbo Medical Needle Co.	5-0	For chest close
Microsurgical elbow tweezers	RWD life science	F11021-11	For surgery
Microsurgical scissors	NAPOX	MB-54-1	For arteriotomy
Millar Catheter	AD Instruments, Shanghai	1.0F	Measurement of pressure gradient
MS400D ultrasonic probe	Visual Sonic	MS400D	Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque
needle forceps	Visual Sonic	F31006-12	For surgery
nitroglycerin	BEIJING YIMIN MEDICINE Co		For dilating coronary artery
Ophthalmic scissors	RWD life science	S11022-14	For surgery
Pentobarbital sodium salt	Merck	25MG	Anesthetization
PowerLab Multi-Directional Physiological Recording System	AD Instruments, Shanghai	4/35	Pressure recording
Precision electronic balance	Denver Instrument	TB-114	Weighing scale
Silk suture (8-0)	Ningbo Medical Needle Co.	6-0	coronary artery ligation
Small animal microsurgery equipment	Napox	MA-65	Surgical instruments
tissue forceps	Visual Sonic	F-12007-10	For surgery
tissue scissor	Visual Sonic	S13052-12	Open chest for hemodynamic measurement
Transmission Gel	Guang Gong pai	250ML	preparation for Echocardiography measurement
Vascular Clamps	Visual Sonic	R31005-06	For blocking blood from aorta