Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Существует несколько различий между правым и левым желудочками. Однако патофизиология инфаркта правого желудочка (РВИ) не выяснена. В настоящем протоколе введен воспроизводимый метод генерации модели мыши RVI, который может обеспечить средство для объяснения механизма RVI.
Инфаркт правого желудочка (РВИ) является распространенным проявлением в клинической практике. Тяжелая РВИ может привести к фатальной гемодинамической дисфункции и аритмии. В отличие от широко используемой мышиной модели инфаркта миокарда (ИМ), генерируемой перевязкой левой коронарной артерии, мышиная модель RVI редко используется из-за трудностей, связанных с генерацией модели. Исследования механизмов и лечения RVI-индуцированного ремоделирования и дисфункции RV требуют, чтобы животные модели имитировали патофизиологию RVI у пациентов. В этом исследовании представлена осуществимая процедура генерации модели RVI у мышей C57BL/6J. Далее эта модель была охарактеризована на основе следующего: оценка размера инфаркта через 24 ч после ИМ, оценка ремоделирования и функции сердца с помощью эхокардиографии, оценка гемодинамики RV и гистология зоны инфаркта через 4 недели после RVI. Кроме того, был выполнен слепок коронарной сосудистой системы для наблюдения за расположением коронарных артерий в RV. Эта мышиная модель RVI облегчит исследование механизмов правой сердечной недостаточности и поиск новых терапевтических целей ремоделирования RV.
Правый желудочек (RV), долгое время считавшийся простой трубкой, соединенной с легочной артерией, был неправомерно запущен в течение многих лет1. Тем не менее, в последнее время наблюдается повышенный интерес к функции RV, поскольку она играет важную роль в гемодинамических расстройствах 2,3 и может служить независимым предиктором риска сердечно-сосудистых заболеваний 4,5,6,7. Заболевания RV включают инфаркт RV (RVI), гипертензию легочной артерии и заболевание клапанов8. В отличие от огромного интереса к гипертонии легочной артерии, RVI остается безнадзорным 7,9.
RVI, обычно сопровождающийся инфарктом нижне-задней части миокарда 10,11, вызван окклюзией правой коронарной артерии (RCA). Согласно клиническим исследованиям, тяжелая РВИ, вероятно, вызывает гемодинамические нарушения и аритмии, такие как гипотония, брадикардия и атриовентрикулярная блокада, связанные с более высокой больничной заболеваемостью и смертностью 12,13,14. Функция RV может восстанавливаться спонтанно в определенной степени даже при отсутствии реперфузии15,16. Существует несколько морфологических и функциональных различий между левым желудочком (LV) и RV17. Считается, что RV более устойчив к ишемии, чем LV8, частично из-за более обширного образования коллатерального кровообращения после RVI. Уточнение различий между инфарктом ЛЖ (ЛВИ) и РВИ и выявление основных механизмов обеспечит новые терапевтические мишени для регенерации сердца и ишемической сердечной недостаточности. Однако из-за трудностей, связанных с генерацией мышиной модели RVI, фундаментальные исследования RVI в основном ограничены.
Большая животная модель RVI была получена путем лигирования RCA у свиней18, которая проще в эксплуатации из-за видимого RCA. По сравнению с моделью крупного животного, мышиная модель имеет следующие преимущества: большая доступность в генных манипуляциях, более низкая экономическая стоимость и более короткий экспериментальный период19,20. Хотя ранее сообщалось о мышиной модели RVI, ориентированной на влияние RVI на функцию LV, подробные этапы процедуры, трудности и ключевые моменты работы, а также характеристики модели, такие как гемодинамические изменения, не были полностью введены 9,21.
В этой статье представлены подробные хирургические процедуры для создания мышиной модели RVI. Кроме того, эта модель характеризовалась эхокардиографическим измерением, инвазивной гемодинамической оценкой и гистологическим анализом. Кроме того, был выполнен коронарный сосудистый слепок для наблюдения за расположением коронарных артерий в RV. Метод, представленный в этой статье, поможет новичкам быстро понять генерацию мышиной модели RVI с приемлемой смертностью от операций и надежными подходами к оценке. Мышиная модель RVI поможет исследовать механизмы правой сердечной недостаточности и искать новые терапевтические цели ремоделирования RV.
Все процедуры выполнялись в соответствии с Руководством по уходу за лабораторными животными и их использованию, опубликованным Национальными институтами здравоохранения США (публикация NIH No 85-23, пересмотренная в 1996 году) и были одобрены Комитетом по этике животных больницы Наньфан Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай). Здоровые самцы мышей C57BL/6J (8-10 недель; масса тела, 25-30 г) были получены из Центра животных Южного медицинского университета. Самки мышей также могут быть использованы, но смешивание обоих полов не рекомендуется из-за потенциального влияния половых различий. После прибытия мышей размещали в 12-часовом / 12-часовом темном / светлом цикле (3-4 мыши на клетку), с пищей ad libitum и водой.
1. Подготовка к операции
2. Перманентное перевязка правой коронарной артерии
3. Эхокардиографическая оценка функции RV после операции
ПРИМЕЧАНИЕ: Для эхокардиографии используйте зонд MS400D с центральной частотой 30 МГц, подключенный к системе ультразвуковой визуализации высокого разрешения (см. Таблицу материалов). Эхокардиографическое исследование проводится через 4 недели после операции.
4. Инвазивные измерения гемодинамики RV
ПРИМЕЧАНИЕ: Гемодинамика RV оценивается с помощью катетеризации правого сердца через 4 недели после RVI. Применяется катетер 1,0 F вместе с системой мониторинга.
5. Коронарная сосудистая слепок с использованием сосудистого литейного агента
В этом исследовании мыши были случайным образом распределены в группу RVI (n = 11) или фиктивной операции (n = 11). Коронарное слепок в 2 нормальных сердцах мышей показано на рисунке 1А. В ответ на лигирование RCA повышение сегмента ST наблюдалось в свинце III ЭКГ (рисунок ...
Сикард и его коллеги из Франции впервые сообщили о мышиной модели RVI в 2019 году, которая описала хирургический процесс и сосредоточилась на взаимодействии между LV и RV после RVI9. Однако на сегодняшний день ни в одном исследовании не сообщалось об использовании этой модели для ?...
Авторам нечего раскрывать.
Эта работа была поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая (82073851 до Солнца) и Национального китайского постдокторского научного фонда (2021M690074 для Линь).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Sigma | T8877 | For TTC staining |
Animal Mini Ventilator | Havard | Type 845 | For artificial ventilation |
Animal ultrasound system VEVO2100 | Visual Sonic | VEVO2100 | Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque |
Batson’s #17 Anatomical Corrosion Kit | Polyscience Inc | 7349 | For vasculature casting |
buprenorphine | Isoreag | 1134630-70-8 | For reduce the pain of mice after surgery |
C57BL/6J mice + D29A1A2:D27 | Animal Center of South Medical University | - | For the generation of mouse RVI model |
Camera | Sangnond | For taking photograph | |
Cold light illuminator | Olympus | ILD-2 | Light for operation |
electrocardiograph | ADI Instrument | ADAS1000 | For recording electrocardiogram |
hair removal cream | Reckitt Benchiser | RQ/B 33 Type 2 | Remove mouse hair |
Heat pad- thermostatic surgical system (ALC-HTP-S1) | SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO | ALC-HTP-S1 | Heating |
Hematoxylin-eosin dye | Leagene | DH0003 | Hematoxylin-eosin staining |
Heparin sodium salt | Macklin | H837056 | For heparization |
Isoflurane | RWD life science | R510-22 | Inhalant anaesthesia |
Lab made spatula | Work as a laryngoscope | ||
Lab made tracheal cannula | For intubation | ||
Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer | Midmark Corporation | VIP 3000 | Anesthetization |
Medical nylon suture (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | For chest close |
Microsurgical elbow tweezers | RWD life science | F11021-11 | For surgery |
Microsurgical scissors | NAPOX | MB-54-1 | For arteriotomy |
Millar Catheter | AD Instruments, Shanghai | 1.0F | Measurement of pressure gradient |
MS400D ultrasonic probe | Visual Sonic | MS400D | Measurement for Doppler flow velocity and AS plaque |
needle forceps | Visual Sonic | F31006-12 | For surgery |
nitroglycerin | BEIJING YIMIN MEDICINE Co | For dilating coronary artery | |
Ophthalmic scissors | RWD life science | S11022-14 | For surgery |
Pentobarbital sodium salt | Merck | 25MG | Anesthetization |
PowerLab Multi-Directional Physiological Recording System | AD Instruments, Shanghai | 4/35 | Pressure recording |
Precision electronic balance | Denver Instrument | TB-114 | Weighing scale |
Silk suture (8-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 6-0 | coronary artery ligation |
Small animal microsurgery equipment | Napox | MA-65 | Surgical instruments |
tissue forceps | Visual Sonic | F-12007-10 | For surgery |
tissue scissor | Visual Sonic | S13052-12 | Open chest for hemodynamic measurement |
Transmission Gel | Guang Gong pai | 250ML | preparation for Echocardiography measurement |
Vascular Clamps | Visual Sonic | R31005-06 | For blocking blood from aorta |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеСмотреть дополнительные статьи
This article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены