Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה מתאר את המתודולוגיה של הקמת מודל חזירי המשתמש בזילוח מכונה מבוקר טמפרטורה משתנה (MP) לשימור הכבד התורם, ואחריו השתלת כבד אורתוטופית (OLTx). מטרתו לקדם את שיעור ההצלחה של OLTx באמצעות תרומת תורם לאחר מוות במחזור הדם (DCD) כבד ולהקים מודל יציב.

Abstract

אחסון קר סטטי קונבנציונלי (SCS) מחמיר פגיעה איסכמית בכבד DCD, מה שמוביל לסיבוכים חמורים למושתלים. כדי לטפל בבעיה זו, יישום קליני של טכנולוגיית MP לשימור כבד תורם נמצא בעיצומו. במקביל, המאמצים מתמקדים בפיתוח מכשירי MP שונים, שאומתו באמצעות ניסויים רלוונטיים במודלים של בעלי חיים. ניסויים יעילים בבעלי חיים גדולים ממלאים תפקיד מרכזי ביישומים קליניים. עם זאת, האתגרים נמשכים בשימור ex vivo של כבדי DCD והליך ההשתלה בחזירים. מכשולים אלה כוללים טיפול בשימור ממושך של כבד תורם, ביצוע בדיקות כדאיות, הקלה על פציעות איסכמיות וקיצור השלב האנפטי. השימוש במכשיר MP מבוקר טמפרטורה משתנה מאפשר שימור ממושך של כבדי DCD באמצעות מצבים רציפים של זילוח מכונה מחומצנת היפותרמית כפולה (DHOP) וזילוח מכונה נורמורמית (NMP). פרוטוקול זה משפר את מודל OLTx החזירי על ידי שיפור האיכות של כבדי DCD, אופטימיזציה של טכניקת האנסטומוזיס והפחתת משך השלב האנכבד.

Introduction

השתלת כבד נותרה הטיפול המרפא היחיד למחלת כבד סופנית ולסרטן כבד נבחר. למרות התקדמות משמעותית ברכש, שימור, טכניקות ניתוחיות ודיכוי חיסוני לאחר השתלה, שיעור תמותה ניכר נמשך בקרב חולים ברשימת ההמתנה בשל מחסור באיברים מתאימים לתורם. אתגר עיקרי טמון בשימור כבדים שנרכשו מ- DCD, מכיוון שאיברים אלה דורשים טיפול מיוחד כדי להקל על פציעות איסכמיות1. זילוח מכונת כבד Ex vivo מציע שיטה ייחודית לשימור והערכה של שתלי כבד DCD לפני ההשתלה2. ניסויים קליניים הדגישו את ההיתכנות והבטיחות של זילוח מכונת כבד ex vivo עבור תורמים סטנדרטיים ומורחבים כאחד, תוך שימוש במצבים היפותרמיים או נורמותרמיים3. חשוב לציין כי התערבויות טיפוליות במהלך זילוח מכונת כבד ex vivo הראו הבטחה בהפחתת פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה (IRI)4.

במאמצים להאריך את משך השימור ולשפר את האיכות של שתלי כבד DCD, ניסויים מתמשכים בבעלי חיים שואפים לייעל את הביצועים של מכשירי MP ולשכלל את השיטה של שימור כבד ex vivo 5. Porcine OLTx משמש כמודל אופטימלי למחקר בעל אוריינטציה קלינית, המאמת את האיכות המשמרת של MP. עם זאת, פגיעה איסכמית בתורם, חוסר יציבות המודינמית וגודש מעיים במהלך השלב הכבד של OLTx חזירי משפיעים יחד על שיעור ההישרדות של דגם חזירי 6,7.

מכשיר MP מבוקר טמפרטורה משתנה המשלב מצבי NMP ו- DHOPE שימש לשימור כבדי DCD של חזיר בפרוטוקול הבא. מכשיר זה מאפשר שימור אקס ויו מורחב של כבדי DCD ומקל על הפגיעה האיסכמית של הכבד התורם בהשוואה ל- SCS מסורתי. המכשיר מבטיח ויסות טמפרטורה, תומך בהובלה למרחקים ארוכים ומספק זילוח ביוני לצד הערכה דינמית ומדויקת של איכות התורם. הפרוטוקול מכיל את כל המידע עבור מודל יציב של שימור כבד DCD באמצעות מצב DHOP-NMP רציף ואחריו OLTx חזירי, כולל המעבר של הגדרות זילוח, אופטימיזציה של טכניקת אנסטומוזיס ואת ההליך של השלב הכבד.

Protocol

כל הניסויים בבעלי חיים נערכו בהתאם לפקודת ניהול ניסויים בבעלי חיים (משרד המדע והטכנולוגיה של הרפובליקה העממית של סין, 2017). נעשה שימוש בנקבות חזירים מיניאטוריים (40-45 ק"ג). פרוטוקול המחקר אושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים הכללי של פיקוד התיאטרון הדרומי של PLA, סין. החזירים שוכנו במתקן המחקר במשך שבוע לפני ההשתלה ולאחר מכן צמו אך עם גישה חופשית למים במשך 12 שעות לפני הניסוי. פרטי הריאגנטים והציוד ששימש במחקר מפורטים בטבלת החומרים.

1. רכישת תורם

  1. השראת הרדמה ושיכוך כאבים: מתן אטרופין תוך שרירי במינון של 0.02 מ"ג/ק"ג. לאחר מכן, יש לתת את זולטיל 50 תוך שרירית בטווח של 2-3.5 מ"ג/ק"ג כדי לגרום להרגעה. עבור שיכוך כאבים, לנהל Tramadol hydrochloride תוך ורידי במינון של 2 מ"ג / ק"ג.
  2. יש להשרות הרדמה כללית על ידי עירוי תוך ורידי של פרופופול בקצב של 2-3 מ"ג/ק"ג/שעה, באמצעות צינורית פרפר 24 גרם המוחדרת לווריד אוזן שולי חיצוני.
  3. מקם את שכיבת החזיר על שולחן הניתוחים. לבצע אינטובציה אנדוטרכאלית ואוורור מכני. ניטור רציף של קצב הלב וריווי החמצן מתבצע באמצעות אוקסימטריית דופק המונחת על הזנב. הגדר את ריכוז isoflurane בוופורייזר על 2%.
  4. יש למרוח תמיסת יוד 3% לחיטוי העור באזור. לאחר שתאפשרו לתמיסת היוד להתייבש באוויר באופן טבעי, נגבו אותה עם 70% אלכוהול. חזור על תהליך החיטוי שלוש פעמים.
  5. ביצע לפרוטומיה בקו האמצע, מורחב לרוחב ימינה. שחררו את הכבד מהחיבורים הרצועתיים שלו, בודדו את צינור המרה ונתקו ליד התריסריון לאחר הקשירה.
  6. יש לנתח בזהירות את עורק הכבד (HA) ואת וריד הפורטל (PV) מהרקמה שמסביב. לגייס את ציר הצליאק ולעקוב אחר אבי העורקים הבטן.
  7. נתחו את אבי העורקים הבטני (AA) ואת הווריד הנבוב התחתון (IVC) כדי להקל על איסוף הדם. מתן בולוס תוך ורידי של הפרין נתרן (25,000 U) עבור נוגדי קרישה.
  8. יש לרכז את ה-AA וה-IVC ברצף ולאסוף את הדם לתוך שקיות דקסטרוז חומצה-ציטראט לשימוש עוקב ב-NMP (כ-1800-2000 מ"ל). התאימו את ה-PV לצנתר ספציפי. לאחסן את הדם שנאסף בטמפרטורה של 4 °C (75 °F).
  9. לגרום לדום לב באמצעות עירוי תוך לבבי של אשלגן כלורי (20 mEq).
    הערה: מרווח הזמן המתחיל בדום לב נרשם כזמן איסכמיה חם (WIT). הכבד עובר 30 דקות של WIT ללא כל מניפולציה, ואחריו שטיפה באתרו דרך אבי העורקים הבטני (AA) ווריד הפורטל (PV) עם 2 ליטר של תמיסת אדנין ציטראט היפרטוני קר.
  10. הבלו על הכבד, להבטיח את כל כלי הדם הנותרים ארוכים. שימור קטע של רקמת אבי העורקים הבטני עבור קנולציה עורקית. התאימו את ה-PV לצנתר ספציפי.
  11. מניחים את הכבד בשקית איברים סטרילית על קרח. קשרו את כל ענפי העורקים הדיסטליים של הכבד וקשרו את צינור המרה המשותף.

2. אתחול במצב DHOPE

  1. חבר את הצנתר של וריד הפורטל ואת אבי העורקים הבטני למכשיר MP. לערבב את הכבד עם 1.5 ליטר של אוניברסיטת ויסקונסין מכונה פרפוזיה פתרון (UW-MPS, ראה טבלה של חומרים), מועשר הפרין נתרן (6250 U) ונתרן cefoxitin (1 גרם).
  2. הגדר את פרמטרי הזילוח כי HA נשמר תחת בקרת לחץ ב 25 מ"מ כספית, בעוד PV נמצא תחת בקרת זרימה ב 200 מ"ל / דקה. ודא את ריווי החמצן על ידי הזרמה רציפה של 100% חמצן לתוך הפרבוסט בקצב של 1 ליטר לדקה.
    הערה: המערכת מנטרת ורושמת באופן אוטונומי פרמטרים מרכזיים כגון טמפרטורת הפרפוזיט, לחצי HA ו-PV וקצבי זרימה לאורך כל תהליך הזילוח.
  3. כוונו את מצב הזילוח לטמפרטורה של 4°C. נתלו את שתל הכבד למשך 8 שעות (איור 1).

3. זילוח במצב תמ"א

  1. העבר את התקן הזילוח של המכונה למצב NMP. יש להעלות את טמפרטורת המערכת ל-37°C. הכינו את המכונה עם 2 ליטר של תערובת המורכבת מדם שלם ופרפסט של זילוח מכונה.
  2. שטפו את התורם ב-1.5 ליטר של תמיסת מלח רגילה ב-4°C והניחו בקערה עם קרח. החליפו את נוזל הזילוח והכינו את אותה מכונה למצב תמ"א. העבירו את הכבד למכשיר לאחר השלמת שלב ההתחממות למשך 10 דקות (איור 1).
  3. ליצור זרימת חמצן קבועה הן לווריד הפורטלי והן לעורק הכבד לפני מיקום הכבד. שמרו על שבריר חמצן מעורר השראה (FiO2) בשיעור של 60%.
  4. הגדר את לחצי הזילוח העורקיים על 80/60 מ"מ כספית (לחץ סיסטולי/לחץ דיאסטולי). הגדר את זילוח הווריד הפורטלי לזרימה קבועה של 0.5 מ"ל/דקה/גרם (משקל כבד), ולאחר מכן הגדל אותו ל -0.75 מ"ל/דקה/גרם (משקל כבד) לאחר השעה הראשונה.
  5. לאורך 6 שעות התמ"א, עקבו באופן עקבי אחר פרמטרים כגון לחץ, ספיקות וטמפרטורה. בצע בדיקת כדאיות באמצעות הערכה ביוכימית של הפרפוזאט במרווחי זמן של שעה אחת, כולל ניתוח גזי דם, חומצה לקטית, גלוקוז בדם ותפקוד כבד.

4. מושתל hepatectomy

  1. הזריקו זולטיל 50 (2-3.5 מ"ג/ק"ג) ואטרופין (0.02 מ"ג/ק"ג) תוך שרירית לחזיר המקבל. יש לתת מינון תוך ורידי של טרמדול הידרוכלוריד (2 מ"ג/ק"ג) לטיפול בכאב.
  2. יש להשרות הרדמה כללית באמצעות עירוי פרופופול תוך ורידי (2-3 מ"ג/ק"ג/שעה). לאחר מכן החזיר מכוון במצב שכיבה על שולחן ניתוחים המצויד בשטיח חימום. וופורייזר איזופלורן מוגדר ל -2%.
  3. בצע laparotomy קו האמצע, מורחב לרוחב ימינה. מכסים את המעי הגס והדק במגבת סטרילית. להקל על המיקום של retractor הבטן עבור נראות מלאה.
  4. שחררו את הכבד מחיבוריו הרצועתיים. בודד את צינור המרה, ligate, וניתק. לנתח את עורק הכבד בנסיגה עד חלוקת עורק העיכול. מהדקים את עורק הכבד המשותף בסמיכות לעורק העיכול באמצעות מהדק בולדוג. שחררו את וריד הפורטל (PV) מהרקמה הדבקה והדקו אותו בצד הדיסטלי.
  5. מהדקים את הצד העליון של הווריד הנבוב, ואחריו את הדיסקציה של החלק העליון של הווריד הנבוב בצד הסרעפת, תוך שמירת חלק מרקמת הווריד הנבוב התוך כבדית לתפירה הבאה. החלק התחתון של הווריד קאווה מטופל באופן דומה, ומשמר חלק מרקמת הכבד על הווריד הנבוב. הסר את הכבד.
  6. בצע דיכוי חיסוני על ידי הזרקה תוך ורידית מינון של 500 מ"ג של methylprednisolone.

5. מיקום שתל אורתוטופי ואנסטומוזה וסקולרית

  1. הסר את הכבד התורם ממכשיר הזילוח של המכונה. יש להתאים את ה-PV לצנתר ספציפי ולאחר מכן לנקב במי מלח קרים ב-4°C מצנתר ה-PV. מחורר עם 5% אלבומין בשילוב עם מי מלח קרים ב-4°C מצנתר PV. תהליך זה חיוני לסילוק הדם ולקירור הכבד.
  2. יש להחדיר צנתר ייעודי לווריד הפורטלי ולאבטח אותו על ידי קשירה לפני הסרת הכבד המקורי של הנתרם, מה שמאפשר קישוריות לצנתר התואם על PV התורם. במקביל, הדקו את הווריד הנבוב התחתון של השתל התורם (איור 2B).
  3. בצע אנסטומוזה מקצה לקצה של הקאווה העל-כבדית באמצעות תפרי פוליפרופילן מונופילמנט 4-0 בעלי זרועות כפולות.
  4. חבר את שני הקצוות של וריד הפורטל עם צינוריות תואמות כדי לשחזר את זרימת הדם. מי מלח הפרין נשטפים לתוך הצינורית לפני החדרתם. פתיחה לסירוגין של וריד הפורטל ושחרור זמני של הווריד הנבוב התחתון מאפשרים שטיפה של נוזל זילוח שיורי.
  5. הסר את המהדק מן הקאווה suprahepatic, ולבצע אנסטומוזה מקצה לקצה של נבוב הווריד התחתון עם 4-0 תפרי פוליפרופילן monofilament.
  6. לשטוף את עורק הכבד התורם עם 10 מ"ל של מלוחים heparinized ולהניח מהדק בולדוג נוסף distally כדי למנוע דימום גב. בצע אנסטומוזה מקצה לקצה באמצעות תפר פוליפרופילן מונופילמנט 7-0.
  7. יש להחדיר קטטר למערכת המרה הן בקצה התורם והן בקצה המקבל, כאשר הצנתרים נתפרים היטב כדי להבטיח יציבות בתנוחה.
  8. הסר את צנתר הווריד הפורטלי. ביצוע אנסטומוזה מקצה לקצה של וריד הפורטל באמצעות תפר פוליפרופילן מונופילמנט 4-0.

6. טיפול ומעקב לאחר ההשתלה

  1. שמור על אוורור של חזיר מקבל עוד 2 שעות.
  2. הפעל את מיזוג האוויר של יחידת הטיפול הנמרץ כדי להעלות את הטמפרטורה המקורה. כרית חימום משמשת כדי לשמור על חום החזיר.
  3. לאסוף את דגימות הדם באופן קבוע כדי לבדוק גז דם ותפקוד הכבד והכליות במרווח של 24 שעות.
  4. אטמו את מחט הבית במי מלח הפרין. המחט השוכנת של וריד החזיר האוריקולרי חייבת להיות מנוהלת כראוי כדי למנוע נפילה לאחר תנועת חזיר.
  5. יש להפסיק את האוורור ברגע שהחזיר מסוגל לנשום באופן מלא.
  6. החזירו את החזיר המושתל לחזירון והניחו אותו על מיטת עץ בגובה של כ-10 ס"מ עד שיתעורר מההרדמה. תחתית מיטת העץ מרופדת במגבת למניעת הצטברות שתן סביב גוף החיה, והטמפרטורה נשמרת על ידי תנור חימום של 24 שעות בדיר החזירים.
  7. הזריקו את מתילפרדניזולון במינון התחלתי של 250 מ"ג מ-POD 1, ולאחר מכן הפחתה הדרגתית במינון לדיכוי חיסוני.
  8. מתן תרופות כאב תוך ורידי על POD 1 (buprenorphine 0.01-0.05 מ"ג / ק"ג). תוך שרירית לתת tramadol על POD2-POD5 (100 מ"ג / ק"ג כל 12 שעות). יש לספק צפלוספורין פומי (2 מ"ג/ק"ג) פעמיים ביום מ-POD 2, ולהוסיף נוזלי תזונה. צריכת המים אינה מוגבלת.
  9. הסר את התעלה הוורידית כ -5 ימים לאחר הניתוח.
  10. שימו לב לנפח השתן ולצבעו. שימו לב לשינוי הצבע של הצואה לאחר הפעולה.
  11. להקריב את החזירים אם הם סובלים חומצה מתמשכת, היפוגליקמיה, סימנים של דימום או אי ספיקת כבד.
  12. בצע את המתת החסד ב 5 ימים לאחר OLTx על ידי exsanguination תחת הרדמה isoflurane עמוק (5%, >2.5 MAC).

7. טכניקה של מודל חזיר בקרת SCS

  1. יש לבצע הליכים זהים להרדמה כאמור לעיל. נתחו את אבי העורקים הבטני (AA) ואת הווריד הנבוב התחתון (IVC) כדי לסייע לניקוז הדם, תוך שימוש באותה שיטת הפריניזציה. ברצף cannulate AA ו IVC. לגרום במהירות דום לב באמצעות עירוי תוך לבבי של אשלגן כלורי (20 mEq).
  2. השג את הכבד התורם מיד לאחר 30 דקות של WIT, תוך שמירה על רקמה נאותה מן הווריד הנבוב התחתון בכבד הפרוקסימלי.
  3. הניחו את שתל הכבד בשקית שימור וטבלו אותו בתמיסת אוניברסיטת ויסקונסין הקרה (UW) לשימור בטמפרטורה של 4°C למשך 8 שעות.
  4. שמרו על הכבד ב-NMP בטמפרטורה של 37°C במשך 6 שעות, בעוד שבצעו OLTx ישירות עם הצפרדע השני (איור 1).

תוצאות

כבדי DCD עברו הליך DHOP-NMP כאמצעי הגנה לפני שהושתלו בחזירים מושתלים. הנוהל של DHOP-NMP היה כדלקמן: כבדי DCD (n = 8) עם WIT של 30 דקות נשמרו ב- DHOPE במשך 8 שעות בשלב הראשון, ולאחר מכן הועברו למצב תמ"א למשך 6 שעות נוספות. לאחר מכן, שתלים אלה שימשו עבור LT במושתלים חזיריים. התמונה הסכמטית המתארת את...

Discussion

Liver MP נמצא כיום בשימוש נרחב בניסויים קליניים, אך מחקר פרה-קליני נוסף באמצעות מודלים של בעלי חיים גדולים עדיין נחוץ 5,6. Porcine OLTx מציב אתגרים משמעותיים שמביאים לשיעורי הצלחה נמוכים. אתגרים אלה כוללים איסכמיה חמה של התורם, שינויים אנטומיים, וחו?...

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

המחקר נתמך על ידי תוכנית המחקר המדעי המרכזית לפיתוח מערכת זילוח כבד ex vivo של העיר פושאן, סין [(2020)A007]; קרן המחקר הבסיסית והיישומית של גואנג דונג (2020B1515120031); קרן המחקר המדעי גואנג ג'ואו (202002030201).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Anesthesia respiratorMindray,ShenzhenWATO EX-20 
Automatic biochemical analyzer MNCHIP, China Celercare V5
Bama female miniature pigs Pearl Lab Animal Sci & Tech Co,Ltd (Guangdong, China). 40-45 kg 
Blood gas analyzer  Abbotti-STAT300
ECG monitorShenzhen Ericon Medical Equipment Co., LTD ChinaM-9000S
Fully automatic snowflake iceChangshu Shenghai Electric Co., Ltd. China
Perfusate in NMP5% Human serum albumin 100-150 mL,
Whole blood 1.2-1.5 L,
2.5% NaHCO3 21 mL,
10% CaCL2 7mL ,
Heparin 5000 U ,
Cefoxltin 1 g,
Metronidazole 500 mg,
Sodium taurocholate 5 g,
Short acting insulin 72 U,
Total parenteral nutrition solution 250-500 mL.
Potal catheterJinxin technology,Shunde,ChinaPortal vein catheter for custom cannula of varying internal diameter (6-8.5 mm)
Refrigeration centrifuge hermo Fisher Scientific - CN
The CG8/CG4 blood gas test card Abbott
The CHEM 8 test card Abbott
The ex vivo liver machine perfuion deviceDevocean Medical Instrument Co., Ltd, Guangdong, ChinaDEVOCEAN-LIVER 2000This is a multi-mode, temperature-controlled, biomimetic ex vivo liver machine perfusion device, capable of preserving the liver outside the body for 24 h
UW Cold Storage solution  Bridge to Life, Ltd., USABelzer UWLiver in SCS group were preserved in UW Cold Storage solution 
UW Machine Perfusion SolutionBridge to Life, Ltd., USABelzer MPS Adenine (free base) 0.68 g,
Calcium Chloride (dihydrate) 0.068 g,
Dextrose (+) 1.80 g,
Glutathione (reduced) 0.92 g,
HEPES (free acid) 2.38 g,
Hydroxyethyl Starch 50.0 g,
Magnesium Gluconate 1.13 g,
Mannitol 5.4 g,
Potassium Phosphate (monobasic) 3.4 g,
Ribose, D(-) 0.75 g,
Sodium Gluconate 17.45 g,
Sodium Hydroxide 0.70 g,
Sterile Water for Injection To 1000 mL Volume
Vacuum extractorSMAFDYX-2A

References

  1. de Goeij, F., Schlegel, A., Muiesan, P., Guarrera, J. V., Dutkowski, P. Hypothermic oxygenated machine perfusion protects from cholangiopathy in donation after circulatory death liver transplantation. Hepatology. 74 (6), 3525-3528 (2021).
  2. Dutkowski, P., et al. Evolving trends in machine perfusion for liver transplantation. Gastroenterology. 156 (6), 1542-1547 (2019).
  3. Parente, A., et al. Machine perfusion techniques for liver transplantation: A meta-analysis of the first seven randomized-controlled trials. J Hepatol. 79 (5), 1201-1213 (2023).
  4. Schlegel, A., et al. Outcomes of DCD liver transplantation using organs treated by hypothermic oxygenated perfusion before implantation. J Hepatol. 70 (1), 50-57 (2019).
  5. Zhang, Z. B., et al. Normothermic machine perfusion protects against liver ischemia-reperfusion injury during reduced-size liver transplantation in pigs. Ann Transplant. 24, 9-17 (2019).
  6. Minor, T., et al. Hypothermic reconditioning by gaseous oxygen improves survival after liver transplantation in the pig. Am J Transplant. 11 (12), 2627-2634 (2011).
  7. Linares-Cervantes, I., et al. Predictor parameters of liver viability during porcine normothermic ex situ liver perfusion in a model of liver transplantation with marginal grafts. Am J Transplant. 19 (11), 2991-3005 (2019).
  8. Fu, Y., et al. Porcine partial liver transplantation without veno-venous bypass: an effective model for small-for-size liver graft injury. Transplant Proc. 43 (5), 1953-1961 (2011).
  9. Brockmann, J. G., et al. Sequence of reperfusion influences ischemia/reperfusion injury and primary graft function following porcine liver transplantation. Liver Transpl. 11 (10), 1214-1222 (2005).
  10. Spetzler, V. N., et al. Technique of porcine liver procurement and orthotopic transplantation using an active porto-caval shunt. J Vis Exp. (99), e52055 (2015).
  11. Ceresa, C., Nasralla, D., Pollok, J. M., Friend, P. J. Machine perfusion of the liver: applications in transplantation and beyond. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 19 (3), 199-209 (2022).
  12. Martins, P. N., Buchwald, J. E., Mergental, H., Vargas, L., Quintini, C. The role of normothermic machine perfusion in liver transplantation. Int J Surg. 82, 52-60 (2020).
  13. Brüggenwirth, I., et al. Prolonged dual hypothermic oxygenated machine preservation (DHOPE-PRO) in liver transplantation: Study protocol for a stage 2, prospective, dual-arm, safety and feasibility clinical trial. BMJ Open Gastroenterol. 9 (1), 000842 (2022).
  14. Mergental, H., et al. Transplantation of discarded livers following viability testing with normothermic machine perfusion. Nat Commun. 11 (1), 2939 (2020).
  15. Nasralla, D., et al. A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation. Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).
  16. Melandro, F., et al. Viability criteria during liver ex-situ normothermic and hypothermic perfusion. Medicina (Kaunas). 58 (10), 1434 (2022).
  17. Warmuzińska, N., Łuczykowski, K., Bojko, B. A. Review of current and emerging trends in donor graft-quality assessment techniques. J Clin Med. 11 (3), 487 (2022).
  18. OuYang, Q., et al. Evaluation of the ex vivo liver viability using a nuclear magnetic resonance relaxation time-based assay in a porcine machine perfusion model. Sci Rep. 11 (1), 4117 (2021).
  19. Sampaziotis, F., et al. Cholangiocyte organoids can repair bile ducts after transplantation in the human liver. Science. 371 (6531), 839-846 (2021).
  20. van Leeuwen, O. B., et al. Transplantation of high-risk donor livers after ex situ resuscitation and assessment using combined hypo- and normothermic machine perfusion: A prospective clinical trial. Ann Surg. 270 (5), 906-914 (2019).
  21. van Leeuwen, O. B., et al. Sequential hypothermic and normothermic machine perfusion enables safe transplantation of high-risk donor livers. Am J Transplant. 22 (6), 1658-1670 (2022).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

DCDDHOPENMP

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved