הקמת פגמים מרוכבים בתפרים גרמיים קלווריאליים בחולדות: מודל סטנדרטי לחקירת טיפול בתפרים-רגנרטיביים

Summary

אנו מתארים את ההליכים הכירורגיים המפורטים של פגמים מרוכבים בתפרים קלבריאליים גרמיים בחולדות, לצד החקירות של הפרוגנוזות קצרות הטווח והארוכות של המודל. אנו שואפים לבנות מודל סטנדרטי לפיתוח טיפולים בתפרים-רגנרטיביים.

Abstract

פגמים קלווריאליים בקנה מידה גדול עולים לעתים קרובות בקנה אחד עם הפרעה בתפר הגולגולת, מה שמוביל לליקויים בשיקום פגם קלווריאלי ופיתוח גולגולת (האחרון מתרחש בגולגולת המתפתחת). עם זאת, היעדר מודל סטנדרטי מעכב את ההתקדמות בחקירת טיפולים רגנרטיביים בתפרים ומציב אתגרים לביצוע ניתוחים השוואתיים על פני מחקרים שונים. כדי לטפל בבעיה זו, הפרוטוקול הנוכחי מתאר את תהליך המידול המפורט של פגמים מרוכבים בתפר קלבריאלי גרמי בחולדות.

המודל נוצר על ידי קידוח חורים מלבניים בעובי מלא בגודל 4.5 מ"מ × 2 מ"מ על פני התפרים העטרתיים. החולדות עברו המתת חסד, ודגימות הגולגולת נלקחו לאחר הניתוח ביום 0, בשבוע 2, בשבוע 6 ובשבוע 12. תוצאות μCT מדגימות שנאספו מיד לאחר הניתוח אישרו את ההקמה המוצלחת של הפגם המרוכב התפר-גרמי, הכולל את הסרת התפר העטרתי ורקמות העצם הסמוכות.

נתונים מהשבועות^{ה-6 וה-12} שלאחר הניתוח הדגימו נטיית ריפוי טבעית לסגירת הפגם. צביעה היסטולוגית אימתה מגמה זו עוד יותר על ידי הצגת סיבים מינרליים מוגברים ועצם חדשה במרכז הפגמים. ממצאים אלה מצביעים על איחוי תפרים מתקדם לאורך זמן בעקבות פגמים קלווריאליים, ומדגישים את חשיבות ההתערבויות הטיפוליות להתחדשות התפרים. אנו צופים כי פרוטוקול זה יקל על פיתוח טיפולים לחידוש התפרים, ויציע תובנות חדשות לגבי שיקום תפקודי של פגמים קלווריאליים והפחתת התוצאות השליליות הקשורות לאובדן תפרים.

Introduction

תפרים גולגולתיים הם קשרים סיביים צפופים בין עצמות הגולגולת, הפועלים כמפרקים כדי להקל על תנועת גולגולת קלה ומספקים כרית מגן למוח תחת לחץ¹. בשנים האחרונות, מחקר מוגבר הדגיש את התפקיד המרכזי של תפרים גולגולתיים בהתפתחות הגולגולת, הומאוסטזיס גולגולתי, ופוטנציאל אוסטאו-תיקון מובנה 2,3,4,5,6,7,8. בתקופות של צמיחה והתפתחות, תפרים גולגולתיים משמשים כמרכזי הצמיחה העיקריים בגולגולת

Protocol

כל ההליכים בבעלי חיים במחקר זה נבדקו ואושרו על ידי הוועדה האתית של בית הספר לסטומטולוגיה במערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (WCHSIRB-D-2021-597). בסך הכל התקבלו 12 (3 חולדות בכל אחת מארבע נקודות הזמן) חולדות Sprague-Dawley (SD) (זכר, 300 גרם, 8 שבועות) ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים).

1. הכנה טרום ניתוחית

1. פריטים כירורגיים
   1. הכינו כלי ניתוח שמוצגים באיור 1A, כולל מלקחיים מעוקלים, אזמל סטרילי חד-פעמי, מעלית פריאוסטלית, מחט השקיה, כדורי צמר גפן, ידית במהירות נמוכה, מנוע כירורגי, בורות עגולות דנטליות במהירות נמוכה (איור ....

תוצאות

במחקר זה, פגם תפר קלבריאלי-גרמי מרוכב של חולדה נקבע על ידי קידוח חור מלבני בגודל 4.5 מ"מ x 2 מ"מ לרוחב התפר העטרתי. האיור הסכמטי הכירורגי ותרשים זרימת המחקר מתוארים באיור 3. התמונה התלת-ממדית ותצוגת החתך של דגימות 0 ימים לאחר הניתוח, כלומר דגימות שנאספו מיד לאח?.......

Discussion

מודלים קונבנציונליים של פגם קלווריאלי, בין אם מעורבים בהם תפרים גולגולתיים ובין אם לאו, מתרכזים בעיקר בתיקון רקמות קשות, ולעתים קרובות מזניחים את ההתחדשות החיונית של מזנכימה של התפרים^19,20. במחקר התחדשות תפרים, מודלים קודמים, כמו אלה של Mardas .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
4% paraformaldehyde	Biosharp	BL539A
2% Iodophor solution	Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.	None
75% Ethanol	Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.	None
Cotton balls	Haishi Hainuo Group Co., Ltd.	None
Cotton swabs	Lakong Medical Devices Co.,	None
Curved forceps	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Dataviewer and Ctan software for residual defect volume assessments	Bruker	None
Dental low-speed round burs	Dreybird Medical Equipment Co., Ltd.	RA3-012 RA1-008
Disposable sterile scalpel	Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.	None
Disposable syringes (22 G)	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	SB1-089(IX)
Electric shaver	JASE	BM320210
Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA)	BioFroxx	1340GR500
Hematoxylin and Eosin Stain Kit	Biosharp	BL700B
Irrigation needle (23 G)	Sichuan New Century Medical Polymer Products Co., Ltd.	None
Low-speed handpiece	Guangzhou Dental Guard Technology Co., Ltd.	None
Masson’s Trichrome Stain Kit	Solarbio	G1340
Medical non-woven fabrics	Henan Yadu Industrial Co., Ltd.	None
Micro-computed tomography (µCT)	Scanco Medical AG	µCT45
Mimics 20.0 for cross-sectional images	Materialise	None
Needle holders	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Periosteal elevator	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Saline solution	Sichuan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd.	None
Scanco medical visualizer software for 3D image reconstruction	Scanco Medical AG	None
SPSS Statistics 20.0 for statistical analysis	IBM	None
Sprague-Dawley rats	Byrness Weil Biotech Ltd	None
Straight Scissors	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Surgical Motor	MARATHON	N3-140232
Surgical sutures (3-0 monofilament)	Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.	None