סינתזה ישירה של ננו-חלקיקי זהב גלויים EM בתאים לניתוח לוקליזציה של חלבונים עם מבנה אולטרה שמור היטב

זיהוי ולוקליזציה של חלבונים חיוניים במחקר ביולוגי. הפרוטוקול שלנו מתאר טכנולוגיה חדשנית לסימון EM באמצעות תגים מקודדים גנטית המאפשרת הדמיה של מולקולה בודדת באתרה עם מבנה אולטרה שמור היטב. חשוב להימנע מקיבעון יתר.

שיטת הסימון מבוססת על פעילות הציסטאין בתגים, הרגישים מאוד להצלבת אלדהיד. הפרוטוקול שלנו מונע שימוש בקיבוע אלדהיד ומשמר את פעילות התג ואת מבנה העל. במקביל.

תיוג EM תמיד היה מאתגר, סובל ממורפולוגיה ירודה או תיוג לא יעיל. הפרוטוקולים שלנו מסנתזים באתרם ננו-חלקיקים ישירות על חלבונים בודדים כדי לספק לוקליזציה ברורה ומדויקת של חלבוני המטרה, עם יחס אות לרעש גבוה, יעילות גבוהה וספציפיות. עד כה השגנו תיוג מצוין בחלבונים מבודדים, תאי E.coli, תאי שמרים ותאי HeLa.

אנו נחקור ונמטב את השיטה ליישום לדגימות רקמות. שילוב טכנולוגיות cryo-FIB ו-cryo-EM הנפוצות יאפשר לנו לענות על שאלות ביולוגיות חשובות.