כדי להתחיל, לנזול את דגימות זרע אנושי שנאספו ביסודיות הומוגניזציה אותם באמצעות פיפטה פסטר. לאחר מכן להעביר 100 מיקרוליטר של דגימת הזרע לתוך צינור צנטריפוגה. לצינור זה, להוסיף 900 מיקרוליטר של פתרון הצביעה.
מערבבים שוב ושוב על ידי פיפטינג והומוגניים לחלוטין את המגיב. הניחו את הצינור על שייקר דו-ממדי לתסיסה מתמשכת ב-200 סל"ד למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר. בזמן ההמתנה לתגובת הצביעה, המשיכו לניתוח ריכוז הזרעונים באמצעות מערכת CASA.
לאחר הפעלת המערכת, לחץ פעמיים על סמל SCAscope כדי לפתוח את תוכנת היישום. לאחר מכן, מערבבים היטב את דגימת הזרע על ידי פיפטציה, ומעבירים עד 10 מיקרוליטר של הדגימה על תא ספירת SCA. המתן 60 שניות עד שדגימת הזרע תפסיק להיסחף.
לאחר מכן, מקם את תא ספירת SCA על מחזיק הדגימה של מערכת CASA. בתוכנת היישום, הזן את פרטי המטופל בתיבת הדו-שיח. לחץ על כפתור ההתחלה כדי להקליט את ריכוז הזרעונים בזרע.
לאחר מכן, יש להפסיק את השייקר בסיום תגובת הכתמים בת 30 הדקות. לפני הניתוח, מערבבים את תכולת צינור הצנטריפוגה על ידי פיפטציה. העבירו עד 10 מיקרוליטר של המגיב לתא ספירת הזרע וכסו אותו בפתק כיסוי זכוכית ייעודי.
הניחו את תא ספירת הזרע על השלב המיקרוסקופי והפעילו את המיקרוסקופ האופטי. לאחר מכן, המתן 60 שניות עד שהדגימה המגיבה תפסיק להיסחף. תחת עדשה אובייקטיבית של 10x, כוונן את המסלול ואת ידיות הכוונון העדינות כדי לבחור שדה ראייה.
לאחר מכן עבור לעדשה אובייקטיבית 40x והתבונן בזרעונים ובלויקוציטים חיוביים peroxidase. השתמש במערכת מונה אלקטרונית כדי לספור לפחות 200 זרעונים ואת מספר leukocytes חיובי peroxidase בחום. באמצעות טכניקה זו, לויקוציטים חיוביים peroxidase הוכתמו בדגימת הזרע.
הלויקוציטים החיוביים לפרוקסידז הציגו גוון חום המנוגד לתאים העגולים, הרגילים והלא מוכתמים.
