The authors acknowledge the funding support from the Ministry of Education, Singapore, grant number MOE2010-IF-1-025.

כל הניסויים בבעלי החיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ולשימוש חיה של בית הספר למדע שימושי, Temasek הפוליטכני. 1. הכנת DMN <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה 200 μl של DMN (1 גר &#39;/ מ&quot;ל ​​פתרון המניות) ולהוסיף 19.8 מ&quot;ל של PBS להכין פתרון DMN 10 מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​עבור הזריקה. הערה: DMN הוא מסרטנים. השתמש במנדף להכין את DMN ולבצע זריקות חיה. </li></ol> 2. הזרקת Intraperitoneal של DMN <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש חולדות Wistar זכרו עם משקל ממוצע של 150 - 200 גרם. לאקלם חולדות במשך 4 - 7 ימים לפני תחילת הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על חולדות בטמפרטורת חדר של 22 ± 1 ° C, עם 12 אור hr ו -12 שעות מחזורים כהים. ספק צ&#39;או חולדה כרצונך מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד צריכת מזון ומים מדי יום. מדוד שבועי משקל גוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את הסכום של DMN לכל חולדה מבוסס על מינון של 10 מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף. השתמש מזרק 1 מ&quot;ל עם חולצת מחט 25 מדo לצייר את הנפח המחושב של פתרון DMN לתוך המזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את העכברוש להזרקה intraperitoneal 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם מאופק העכברוש כראוי, להציג את המחט לתוך ברבע הימני התחתון של הבטן, לסגת על הבוכנה של המזרק (שום דבר לא צריך להיות aspirated) כדי לבדוק את המיקום המתאים של מחט בתוך המרחב בטן להזריק פתרון DMN לאט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר המינון של DMN כבר מנוהל, לאט למשוך את המחט ולהיפטר לפח החד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו את זריקות intraperitoneal של DMN במשך 3 ימים רצופים בשבוע במשך 4 שבועות. נהל את הזריקות באותו זמן בכל יום. Re-לחשב את המינון מבוסס על משקל גוף בתחילת כל שבוע של זריקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף דם משבועון וריד הזנב למדוד פרמטרים ביוכימיים: aminotransferase אלאנין (ALT) ו aminotransferase aspartate (AST) 22. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ALT ו- AST בסרום מדוד באמצעות Vet מסחרימנתח כימית מבחן. </li></ol> בחינת גרוס 3. קציר של הכבד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החולדות על ידי הזרקת intraperitoneal של pentobarbital במינון של 100 מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף. ודא למוות על ידי בדיקת העדר דופק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> היכונו פוסט מורטם ולהעריך את מצבו של החיה כפי שתואר על ידי פרקינסון et al. 23 עכברושים מתים מקום ללוח לנתח שכיבה על הגב עם הבטן כלפי מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא ו ללחלח את העור עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים, לחתוך את העור אורכו של ventrum מפי הטבעת אל הסנטר, ומשקפים את העור. עם מספריים, לחתוך את דופן הבטן מפי הטבעת אל הסחוס xiphoid, לחשוף את הקרביים בטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את אברי הבטן באתרו כדי לבדוק את כל חריגות. הערה כל שינוי בצבע, בגודל, מיקום איברים ואת הנוכחות של נוזל בתוך חלל הצפק. לִבחוֹן<html> העקביות של איברים לציין את נוכחותו של כל ריחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים מלקחיים, לנתח את בחינם הכבד כולו של הרצועות ונספחיו. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחילתו של מסלול hilus שבו היא מחוברת הסרעפת ולעבוד לשחרר את כל האונה של הכבד של קבצים מצורפים. בזהירות לחתוך את כל הרצועות וכלי דם. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את הכבד על צלחת פטרי ולשקול את הכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות אזמל, לחתוך 2 - חלקים עבים 5 מ&quot;מ של אונה של הכבד. לקבלת עקביות, תמיד לקחת דגימות מאותו האונה הכבדה. קח טריז כ -5 מ&quot;מ קוטר עובי, מהאונה לרוחב תקין 24 כ -1 ס&quot;מ מהקצה של המקום lobe.Immediately לתוך פורמלין 10% שנאגרו עבור קיבעון. ודא הרקמה נפח פורמלין היא 1:10 או יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קציר ומיד להקפיא חלקים (באמצעות חנקן נוזלי) של אונה של הכבד בשלב זה אם נדרש מחקרים אחרים. באשר (3.8), מדגם מאותה האונה כבדה לעקביות. </li></ol>ילדה = &quot;jove_title&quot;&gt; 4. עיבוד, טבעת ואת החתך של הכבד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן דגימות כבד בפורמלין 10% שנאגרו למשך תקופה מינימלית של 24 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר קיבוע, חתוך את הכבד, להציב לתוך קלטות ומעלה אותם לתוך הסל של מעבד רקמות האוטומטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הסל עם קלטות לתוך התחנה הראשונה המכיל 10% שנאגרו פורמלין. ודאו הקלטות שקועות לגמרי. הם יכולים להישאר בחדר הזה עד 12 שעות עד המחזור מתחיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתכנת את מעבד הרקמות כדי לסובב את הקלטות עבור שעת 1 כל אחד, באמצעות תחנות רצופות המכילות את הפתרונים הבאים: אתנול בריכוזים של 50%, 70%, 90%, 100% (2 תחנות), קסילן (2 תחנות) פרפין נוזלי ( 2 תחנות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת הדגימות הכבדות לאמבטית השעווה של תחנת ההטבעה. ודא שמכשיר ההטבעה מופעל לפחות קודם לכן שעה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלקחיים מחומם מראש באמצעות (65 מעלות צלזיוס), הסר כל קלטת מן wאמבטיה ומקום גרזן לצלחת החמה (65 מעלות צלזיוס) של מכונה ההטבעה. לוותר כמות מספקת של פרפין נוזלי לתוך תבנית בסיס נירוסטה (מחומם מראש ל 65 מעלות צלזיוס) עד חצי מלא. מעבירים את החלק של הכבד מתוך הקלטת לתוך התבנית. ודא הדגימה ממוקמת עם המשטח לחתוך (להיבדק מיקרוסקופי) שטוח על החלק התחתון של התבנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממלאים את התבנית לחלוטין עם פרפין נוזלי, לעלות על קלטת ריקה על גבי ולמקם את התבנית על צלחת 4 ° C. של המכונה הטבעה להתקרר במשך 30 דקות לפחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק כי השעווה מתקררת הקרושה, ולהסיר את בלוק פרפין מהתבנית. הבלוק צריך לקפוץ בקלות ולא להיצמד או סדק. אם זה יקר, להמס את הגוש וחזור על שלב זה. בלוק פרפין יכול להיות מחולק פעם זה מבצר. בלוקים ניתן לאחסן בטמפרטורת החדר במשך שנים רבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את גוש פרפין לתוך microtome וסעיף 10 מיקרומטר עובי עד שהשכבה שעווהמוסר מספיק עבור רקמת הכבד מוטבעת להיות גלויה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שנו את ההגדרה על microtome לחתוך בכל 5 מיקרומטר עובי. בעזרת מלקחיים, להרים את החלק לחתוך היטב על ידי מחזיק אותו בקצה ובזהירות לצוף בסעיף באמבט מים בטמפרטורה של C ° 40. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות במקום שקופית זכוכית נקיה תחת הסעיף צף והרם אותו על פני השטח של שקופיות הזכוכית. מניחים את השקף לשקופית חם ב 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה. </li></ol> 5. מאסון Trichrome מכתים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני החלת כתמים, לטפל השקופיות כדי להסיר את השעווה רעננותם הרקמות כדלקמן: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הסעיפים קסילן במשך 5 דקות. חזור 2x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את הסעיפים אתנול 100% במשך 3 דקות. חזור 1x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את סעיפים 1 דקות כל אחד הפתרונות הבאים של אתנול: 90%, 80% ו -70%. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את השקופית תחת מי ברז כדי להסיר כל אתנול הקיים בשקופית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול שקופיות הברזל Hematoxylin במשך 10 דקות להכתים את הגרעין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את השקופיות במים כדי להסיר את הכתם עודף משקופית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות Biebrich סקרלט-חומצה Fuchsin למשך 2 דקות להכתים את הציטופלסמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את השקופיות עם מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את שקופיות Phosphotungstic / Phosphomolybdic חומצת פתרון במשך 10 דקות כדי לקדם את הספיגה של כחול אנילין. שנה את פתרון חומצת Phosphotungstic / Phosphomolybdic אחרי 2 סיבובי שימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את השקופיות פתרון כחול אנילין במשך 10 דקות להכתים את סיבי הקולגן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את הכתם עם עודף מים ומניחים את שקופיות פתרון חומצה 1% אצטית עבור 1 דקות כדי לאפשר בידול להתקיים כדי להבהיר את הצבע של השקופית יותר עדין ושקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את השקופיות עם מים והמשך מייבש את סעיפי רקמות. צעדי ההתייבשות הם כדלקמן: </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות ברציפות במשך 10 שניות בכל פעם, ב conce הבאntrations של אתנול: 70%, 80%, 95% ו -100%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול את השקופיות עבור 30 שניות באתנול 100%. חזור 1x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את השקופיות באמצעות 3 תחנות של קסילן במשך 5 דקות כל אחד כדי להסיר אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר להחליק כיסוי זכוכית על הדגימה עם תקשורת הרכבה (למשל, DPX mountant) ולאפשר לו להתייבש. הערה: DPX הוא שרף סינטטי שמתייבש מהר, שומר כתם ומגן על קטע הרקמה. </li></ol> 6. ניקוד פיברוזיס על סעיפים ויטראז יונקת של מהאסון של כבד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש פתולוג וטרינרי להעריך את חומרת סיסטיק פי סיסטיק להבקיע 25. זה יהיה אופטימלי אם ניקוד סיסטיק נעשה על ידי שניים או שלושה פתולוגים עצמאיים באופן עיוור. בתרחיש כזה, להשיג תוצאה סופית לאחר דיון וסקירת קבוצה למיין את כל הבדלים בשערו. </li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> ציון </td><td> תיאור </td></tr><tr><td> 0 </td><td> אין סיסטיק </td></tr><tr><td> 1 </td><td> הרחבה סיבית של כמה תחומי פורטל, עם או בלי septa הסיבי קצר </td></tr><tr><td> 2 </td><td> הרחבה סיבית על רוב אזורי פורטל, עם או בלי septa הסיבי קצר </td></tr><tr><td> 3 </td><td> הרחבה סיב תחומי הפורטל ביותר, פורטל מזדמן פורטל (PP) גישור </td></tr><tr><td> 4 </td><td> הרחבה סיב תחומי פורטל עם גישור מסומן (פורטל פורטל (PP) וכן לפורטל (מחשב מרכזי) </td></tr><tr><td> 5 </td><td> מסומן גישור (PP ו / או PC) עם גושים מזדמנים (שחמת שלמה) </td></tr><tr><td> 6 </td><td> שחמת, סביר או מובהק </td></tr></tbody></table> טבלת 1: פיברוזיס ניקוד המשמשת קריאת הסעיפים הכבדים ויטראז היונקת של מייסון 25.

<ol>
	<li>Magee, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxic+liver+injury;+the+metabolism+of+dimethylnitrosamine.">Toxic liver injury; the metabolism of dimethylnitrosamine.</a> Biochem J. 64 (4), 676-682 (1956).</li><li>Pritchard, D. J., Butler, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis-the+mechanism+of+cell+death+in+dimethylnitrosamine-induced+hepatotoxicity.">Apoptosis-the mechanism of cell death in dimethylnitrosamine-induced hepatotoxicity.</a> J Pathol. 158 (3), 253-260 (1989).</li><li>Madden, J. W., Gertman, P. M., Peacock, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimethylnitrosamine-induced+hepatic+cirrhosis:+a+new+canine+model+of+an+ancient+human+disease.">Dimethylnitrosamine-induced hepatic cirrhosis: a new canine model of an ancient human disease.</a> Surgery. 68 (1), 260-267 (1970).</li><li>Jenkins, S. A., Grandison, A., Baxter, J. N., Day, D. W., Taylor, I., Shields, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dimethylnitrosamine-induced+model+of+cirrhosis+and+portal+hypertension+in+the+rat.">A dimethylnitrosamine-induced model of cirrhosis and portal hypertension in the rat.</a> J Hepatol. 1 (5), 489-499 (1985).</li><li>J&#233;z&#233;quel, A. M., Mancini, R., Rinaldesi, M. L., Macarri, G., Venturini, C., Orlandi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+morphological+study+of+the+early+stages+of+hepatic+fibrosis+induced+by+low+doses+of+dimethylnitrosamine+in+the+rat.">A morphological study of the early stages of hepatic fibrosis induced by low doses of dimethylnitrosamine in the rat.</a> J Hepatol. 5 (2), 174-181 (1987).</li><li>George, J., Chandrakasan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+characteristics+of+dimethylnitrosamine+induced+fibrotic+liver+collagen.">Molecular characteristics of dimethylnitrosamine induced fibrotic liver collagen.</a> Biochim Biophys Acta, Protein Struct Mol Enzymol. 1292 (2), 215-222 (1996).</li><li>Winwood, P. J., Arthur, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kupffer+cells:+their+activation+and+role+in+animal+models+of+liver+injury+and+human+liver+disease.">Kupffer cells: their activation and role in animal models of liver injury and human liver disease.</a> Semin Liver Dis. 13 (1), 50-59 (1993).</li><li>Nakamura, T., Sakata, R., Ueno, T., Sata, M., Ueno, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+transforming+growth+factor&#946;+prevents+progression+of+liver+fibrosis+and+enhances+hepatocyte+regeneration+in+dimethylnitrosamine-treated+rats.">Inhibition of transforming growth factor&#946; prevents progression of liver fibrosis and enhances hepatocyte regeneration in dimethylnitrosamine-treated rats.</a> Hepatology. 32 (2), 247-255 (2000).</li><li>Shek, F. W., Benyon, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+transforming+growth+factor+beta+be+targeted+usefully+to+combat+liver+fibrosis?.">How can transforming growth factor beta be targeted usefully to combat liver fibrosis?.</a> Eur J Gastroenterol Hepatol. 16 (2), 123-126 (2004).</li><li>Wang, J. H., Shin, J. W., Son, J. Y., Cho, J. H., Son, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antifibrotic+effects+of+CGX,+a+traditional+herbal+formula,+and+its+mechanisms+in+rats.">Antifibrotic effects of CGX, a traditional herbal formula, and its mechanisms in rats.</a> J Ethnopharmacol. 127 (2), 534-542 (2010).</li><li>Su, L. J., Hsu, S. L., Yang, J. S., Tseng, H. H., Huang, S. F., Huang, C. Y. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+gene+expression+profiling+of+dimethylnitrosamine-induced+liver+fibrosis:+from+pathological+and+biochemical+data+to+microarray+analysis.">Global gene expression profiling of dimethylnitrosamine-induced liver fibrosis: from pathological and biochemical data to microarray analysis.</a> Gene Expr. 13 (2), 107-132 (2006).</li><li>M&#252;ller, A., Machnik, F., Zimmermann, T., Schubert, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioacetamide-induced+cirrhosis-like+liver+lesions+in+rats+usefulness+and+reliability+of+this+animal+model.">Thioacetamide-induced cirrhosis-like liver lesions in rats usefulness and reliability of this animal model.</a> Exp Pathol. 34 (4), 229-236 (1988).</li><li>Martinez-Hernandez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hepatic+extracellular+matrix.+II.+Electron+immunohistochemical+studies+in+rats+with+CCl4-induced+cirrhosis.">The hepatic extracellular matrix. II. Electron immunohistochemical studies in rats with CCl4-induced cirrhosis.</a> Lab Invest. 53 (2), 166-186 (1985).</li><li>Pritchard, M. T., Apte, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+to+Study+Liver+Regeneration.">Models to Study Liver Regeneration.</a> Liver Regeneration. , 15-40 (2015).</li><li>Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+bile+duct+obstruction:+a+new+experimental+model+for+cirrhosis+in+the+rat.">Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat.</a> Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).</li><li>Marques, T. G., Chaib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+experimental+models+for+inducing+hepatic+cirrhosis+by+bile+duct+ligation+and+carbon+tetrachloride+injection.">Review of experimental models for inducing hepatic cirrhosis by bile duct ligation and carbon tetrachloride injection.</a> Acta Cir Bras. 27 (8), 589-594 (2012).</li><li>Wasser, S., Tan, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+hepatic+fibrosis+in+the+rat.">Experimental models of hepatic fibrosis in the rat.</a> Ann Acad Med Singapore. 28 (1), 109-111 (1999).</li><li>George, J., Chandrakasan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+abnormalities+during+the+progression+of+hepatic+fibrosis+induced+by+dimethylnitrosamine.">Biochemical abnormalities during the progression of hepatic fibrosis induced by dimethylnitrosamine.</a> Clin Biochem. 33 (7), 563-570 (2000).</li><li>Shimizu, I., Ma, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Sho-saiko-to,+a+Japanese+herbal+medicine,+on+hepatic+fibrosis+in+rats.">Effects of Sho-saiko-to, a Japanese herbal medicine, on hepatic fibrosis in rats.</a> Hepatology. 29 (1), 149-160 (1999).</li><li>Wang, Y., Gao, J., Zhang, D., Zhang, J., Ma, J., Jiang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+antifibrotic+effects+of+sorafenib+on+hepatic+stellate+cells+and+liver+fibrosis.">New insights into the antifibrotic effects of sorafenib on hepatic stellate cells and liver fibrosis.</a> J Hepatol. 53 (1), 132-144 (2010).</li><li>Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+Restraint+and+Common+Compound+Administration+Routes+in+Mice+and+Rats.">Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats.</a> J Vis Exp. (67), (2012).</li><li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+Blood+from+the+Lateral+Tail+Vein+of+the+Rat.">Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat.</a> J Vis Exp. (99), (2015).</li><li>Parkinson, C. M., O'Brien, A., Albers, T. M., Simon, M. A., Clifford, C. B., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+Necropsy+and+Selected+Tissue+and+Sample+Collection+in+Rats+and+Mice.">Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice.</a> J Vis Exp. (54), (2011).</li><li>Ruehl-Fehlert, C., Kittel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revised+guides+for+organ+sampling+and+trimming+in+rats+and+mice--part+1.">Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice--part 1.</a> Exp Toxicol Pathol. 55 (2-3), 91-106 (2003).</li><li>Ishak, K., Baptista, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+grading+and+staging+of+chronic+hepatitis.">Histological grading and staging of chronic hepatitis.</a> J Hepatol. 22 (6), 696-699 (1995).</li><li>Sant'Anna, L. B., Sant'Anna, N., Parolini, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+computer+assisted+image+analysis+for+identifying+and+quantifying+liver+fibrosis+in+a+experimental+model.">Application of computer assisted image analysis for identifying and quantifying liver fibrosis in a experimental model.</a> J Comput Interdiscip Sci. 2 (2), 139-148 (2011).</li></ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

תיארנו שיטה לעשות במודל חיה של פיברוזיס בכבד ועל מנת להעריך את חומרת הפיברוזיס. חשוב לספק את המינון הנכון של DMN ו לדבוק בלוח הזמנים של זריקות intraperitoneal שבועיות. ככל שהניסוי מתקדם, חשוב לשקול את החולדות מחדש לחשב את המינון בתחילת כל שבוע של זריקות DMN. זכור כי DMN הוא רעילים ...

DMN הוא רעלן ספציפי בכבד חזק. חילוף החומרים, רקמות תפוצתו, והיכולת לגרום לפגיעה כבדה חולדות נמסרו על ידי מגי 1, ואת המכניזם הקשור לניזק hepatocyte מוות של תאים על ידי אפופטוזיס תואר על ידי פריצ&#39;רד ובאטלר 2. ממשל לסירוגין של המתחם הזה נמסר לגרום פיברוזיס כבד כלבים וחולדות 3,4. המנגנונים ושינויים מורפולוגיים של הפיברוזיס נחקרו בהרחבה באמצעות מודל זה. במחקרים מוקדם באמצעות עכברוש, 3 שבועות טיפול עם DMN מיוצר נמק המורגי centrilobular ואחריו שחמת micronodular ללא steatosis 5. זה היה הראה כי ב סיסטיק מוקדם, קולגן נוצר היה יותר לחצות מקושר עם הסוג III להיות בולט יותר מסוג I 6. במשותף עם גורמים אחרים, שינויים fibrotic הנגרמת DMN היו קשורים עם עלייה תאים Kupffer; מקרופאגים כבדים הנמצאים in את sinusoids. תאים אלה morph לתוך myofibroblasts לייצר כמויות עודפות של תאי מטריקס המהווה את הבעיה העיקרית ב סיסטיק 7. מבחינת איתות הסלולר, נקמורה et al., הוכיחו כי TGF-β משחק תפקיד קריטי בהתקדמות של הכבד סיסטיק 8. הם השתמשו אדנו לבטא קולטן TGF-β II סוג קטום, לעכב באופן ספציפי איתות TGF-β. פיברוזיס כבד חולדות אלה נבלם בצורה מרהיבה במהלך טיפול DMN בהשוואה לקבוצות ביקורת. מחקרים אחרים אשרו כי דיכוי TGF-β מוביל קל של פיתוח כבד סיסטיק 9,10. המודל גם שימש במחקר פרופיל גנטי העולמי לזהות סמנים סיסטיק אחרים וחלבונים אשר יכול לשמש מטרה לתרופות לטיפול אנטי-fibrotic 11. חומרים כימיים אחרים המשמשים כדי לעודד פיברוזיס בכבד כוללים thioacetamide (TAA) ו- Cטטרא arbon (CCL 4). TAA שימש לראשונה אצל חולדות מאוחר יותר בעכברים 12. היתרונות של מודל זה כוללים: קלות ההעברה כימית במי שתייה, השחזור של המודל עם שחמת micronodular מאפיין ושינויים ביוכימיים. החסרונות כוללים: תקופת הזמן של 3 חודשים עבור פיברוזיס כבד לפתח וחוסר ההבנה של המנגנון המולקולרי לזירוז של פיברוזיס בכבד. באשר CCl 4, השימוש בו ירד מהסיבות הבאות: זה לא לחקות מחל כבד אנושיות, יש השפעות מזיקות על שכבת האוזון, גורם לכאב ומצוקה לבעלי חיים, הוא מאוד רעיל לבני אדם ומחייב זהירות בטיפול שלה לרשות 13,14. חסימת דרכי המרה ממושך (על ידי התערבות כירורגית) כמודל ניסיוני עבור שחמת הכבד דווח לראשונה על ידי Kountouras et al. 15. שיטה זו היא רעילה לבני אדם ובעלי חיים. However, הזמן הנדרש הפיברוזיס לפתח משתנה. סקירה של 30 דוחות על ידי Marques et al. 16, נמצאה כי זה לקח מן שבעה ימים עד ארבעה שבועות לאחר ניתוח עבור פיברוזיס כבד לפתח. השינויים הפתולוגיים תארו לחקות את אלה של סיסטיק המר אדם כרוני המודל יהיה מתאים יותר עבור חוקרים המעוניינים בתחום זה. לסיכום, הממשל לסירוגין מינון קבוע של DMN בחולדה מעל 4 שבועות מייצר הפיברוזיס מחקת המחלה האנושית. חולדות במינון להראות התפתחות הדרגתית של הפיברוזיס נזק parenchymal 4,17. התקדמות וחומרת המחלה יכולה להיות פיקוח באמצעות דגימות דם או הקרבת בעלי חיים בנקודות ספציפיות זמן ההשפעה היא מאוד לשחזור 18. לכן המודל כבר בשימוש נרחב כדי לחקור את המנגנונים של סיסטיק הכבד שחמת וכן להקרין לסוכני פוטנציאל אנטי fibrotic 10,19,20.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dimethylnitrosamine</td>
			<td>Wako</td>
			<td>147-03781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin</td>
			<td>Sinopharm chemicals</td>
			<td>F63257009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson trichome stains</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aniline Blue</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>#42755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acid Fuschin</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>RT42685</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scarlet Red</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>#26905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphotungstic Acid Hydrate</td>
			<td>ALFA AESAR</td>
			<td>ALFA40116.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphomolybdic Acid Hydrate</td>
			<td>Sigma SG</td>
			<td>221856-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigert&#39;s Iron Hematoxilyn</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.15973.0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX Mounting Medium</td>
			<td>Merck</td>
			<td>HX066873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue processor</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica TP 1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>&#160;Sakura Tissue Tek TEC5 Embedding System</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica RM 2235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vet Test Analyzer</td>
			<td>Idexx</td>
			<td>Vet Test 8008</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the dimethylnitrosamine induced liver fibrosis model in the rat

ארבעה עד שישה בן שבוע, חולדות Wistar זכר שימשו להפקת במודלים של בעלי חיים של פיברוזיס בכבד. התהליך דורש ארבעה שבועות של הממשל של 10 מ&quot;ג / ק&quot;ג dimethylnitrosamine (DMN), נתון intraperitoneally במשך שלושה ימים רצופים בשבוע. זריקות Intraperitoneal בוצעו במנדף כמו DMN הוא hepatoxin ו מסרטן ידוע. יש מודל מספר יתרונות. ראשית, שינויים כבדים ניתן ללמוד ברצף או בשלבים מסוימים של עניין. שנית, בשלב של מחלה כבדה יכול להיות במעקב על ידי מדידה של aminotransferase אלאנין בסרום (ALT) ו aminotransferase aspartate (AST) אנזימים. שלישית, את חומרת הניזק כבד בשלבים שונים יכולה להיות מאושרת על ידי הקרבת חיות בנקודות זמן מיועד, ואחריו בדיקה היסטולוגית של הרקמות הכבדות המוכתמות היונק של מייסון. לאחר ארבעה שבועות של מינון DMN, תוצאת סיסטיק הטיפוסית היא 5 עד 6 בסולם אסחאק. המודל יכול להיות מועתק באופן עקבי כברבשימוש נרחב כדי להעריך את היעילות של תרופות אנטי-fibrotic פוטנציאליים.

חולדות DMN מטופלים לרדת במשקל ולהיות פחות נמרץ עם מעייל שיער פרוע. יש אובדן משמעותי משקולות הגוף הממוצע של חולדות שטופלו DMN; הראשון לזיהוי לאחר 2 שבועות של טיפול DMN, וההבדל הזה נשאר דרך שבועות 3 ו -4 לאחר טיפול DMN (איור 1 א). כמו החולדות לקבל DMN בשבו?...

Watch this Scientific Journal Video about The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat at JoVE.com

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

מודל הפיברוזיס Dimethylnitrosamine מושרה בחולדה

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

the-dimethylnitrosamine-induced-liver-fibrosis-model-in-the-rat

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K Views.  Temasek Polytechnic. We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

Video: The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

דגם של עירוי מזין כרוני בחולדה

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

חיתוך רוחב עצב הטיביאלי - מודל סטנדרטי לניוון שרירים שלד מושרה denervation בעכברים

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ischemia/reperfusion (I/R) injury with myriad negative consequences. Potential I/R injury in marginal organs destined for liver transplantation contributes to the current donor shortage secondary to a decreased organ utilization rate. A significant need exists to explore hepatic I/R injury in order to mediate its impact on graft function in transplantation. Rat liver hilar clamp models are used to investigate the impact of different molecules on hepatic I/R injury. Depending on the model, these molecules have been delivered using inhalation, epidural infusion, intraperitoneal injection, intravenous administration or injection into the peripheral superior mesenteric vein. A rat liver hilar clamp model has been developed for use in studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating I/R injury. The described model for rat liver hilar clamp includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic hepatic segment via a side branch of the portal vein, allowing for direct segmental hepatic delivery. Our approach is to induce ischemia in the left lateral and median lobes for 60 min, during which time the substance under study is infused. In this case, pegylated-superoxide dismutase (PEG-SOD), a free radical scavenger, is infused directly into the ischemic segment. This series of experiments demonstrates that infusion of PEG-SOD is protective against hepatic I/R injury. Advantages of this approach include direct injection of the molecule into the ischemic segment with consequent decrease in volume of distribution and reduction in systemic side effects.

A unique rat liver hilar clamp model was developed for studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating ischemia-reperfusion injury. This model includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic liver segment via a branch of the portal vein, allowing for direct hepatic delivery.

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver metastases, the amount of liver tissue left behind after liver resection has become the main limiting factor of resectability of large or multiple liver tumors. A minimal amount of functional tissue is required to avoid the severe complication of post-hepatectomy liver failure, which has high morbidity and mortality. Inducing liver growth of the prospective remnant prior to resection has become more established in liver surgery, either in the form of portal vein embolization by interventional radiologists or in the form of portal vein ligation several weeks prior to resection. Recently, it was shown that liver regeneration is more extensive and rapid, when the parenchymal transection is added to portal vein ligation in a first stage and then, after only one week of waiting, resection performed in a second stage (Associating Liver Partition and Portal vein ligation for Staged hepatectomy = ALPPS). ALPPS has rapidly become popular across the world, but has been criticized for its high perioperative mortality. The mechanism of accelerated and extensive growth induced by this procedure has not been well understood. Animal models have been developed to explore both the physiological and molecular mechanisms of accelerated liver regeneration in ALPPS. This protocol presents a rat model that allows mechanistic exploration of accelerated regeneration.

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Inducing rapid liver hypertrophy using Associating Liver Partition and Portal vein ligation for a Staged hepatectomy (ALPPS) has been proposed for resection of borderline resectable liver tumors. This model may elucidate mechanisms involved in rapid hypertrophy and allows testing of drugs that promote or block the acceleration of regeneration.

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. To better understand the mechanism behind these surgical procedures, a rat partial liver transplantation (PLTx) model was established for relevant surgical studies. Because of the complexity of the rat PLTx model, a protocol with detailed descriptions is required. An article published previously reported a protocol in which ex vivo hepatectomy was used to achieve 50% rat PLTx. In contrast to this protocol, we introduced a re-arterialized PLTx with an in vivo 70% hepatectomy. An updated vessel-oriented hepatectomy was incorporated into the rat PLTx to refine the microsurgical procedure. The portal veins and hepatic arteries of the left lateral lobe and the median lobe were individually dissected and ligated before removal of the liver parenchyma, thereby decreasing the probability of bleeding in the remnant liver stump. Furthermore, an end-to-side vessel anastomosis between the common hepatic artery and the enlarged proper hepatic artery was introduced to re-arterialize the hepatic artery. By using this end-to-side vessel anastomosis technique, the diameter of the anastomosis was enlarged, thereby decreasing the difficulty of hand suture and maintaining a high rate of anastomotic patency. Moreover, the cuff anastomosis of the infrahepatic vena cava was slightly modified. A section of circumferential liver parenchyma around the vena cava of a recipient was preserved during cuff anastomosis to maintain the three-dimensional shape of the vascular lumen. This section of liver parenchyma was removed after completing the anastomosis. With this modification, the step involving placement of stay sutures was omitted, thereby further shortening the cuff anastomosis time. By using this protocol of rat PLTx, a low liver enzyme level, an intact liver lobular architecture and a high survival rate were achieved after microsurgery.

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Here, a protocol involving re-arterialized rat partial liver transplantation is presented. Specifically, 70% liver was resected in vivo by using an updated technique of vessel-oriented hepatectomy. The hepatic artery was reconstructed in an end-to-side manner. The cuff technique was modified to shorten the anastomosis time of the infrahepatic vena cava.

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

היצרות פרפור השמאלי המושרה Arterialization ורידית ריאתית יתר לחץ דם ריאתי קבוצה 2 בעכברוש

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic fatty liver disease, metabolic liver disease, and liver cancer) requires experimental manipulation of animal models and in vitro cell cultures. Both techniques have limitations, such as the requirement of large numbers of animals for in vivo manipulation. However, in vitro cell cultures do not reproduce the structure and function of the multicellular hepatic environment. The use of precision-cut liver slices is a technique in which uniform slices of viable mouse liver are maintained in laboratory tissue culture for experimental manipulation. This technique occupies an experimental niche that exists between animal studies and in vitro cell culture methods. The presented protocol describes a straightforward and reliable method to isolate and culture precision-cut liver slices from mice. As an application of this technique, ex vivo liver slices are treated with bile acids to simulate cholestatic liver injury and ultimately assess the mechanisms of hepatic fibrogenesis.

This protocol provides a simple and reliable method for the production of viable precision-cut liver slices from mice. The ex vivo tissue samples can be maintained under laboratory tissue culture conditions for multiple days, providing a flexible model to examine liver pathobiology.

מורנה דיוק-גזור פרוסות הכבד כמודל Vivo Ex של ביולוגיה של הכבד

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, including ischemia-reperfusion injury (IRI) of extrahepatic organs. This model requires numerous experiments and devices. The duration of anhepatic phase is closely related to the time to develop IRI after transplantation. In this experiment, we used hemodynamic changes to induce extrahepatic organ damage in rats and determined the maximum tolerance time. The time until the most severe organ injury varied for different organs. This method can easily be replicated and can also be used to study IRI of the extrahepatic organs after liver transplantation.

This paper provides a detailed description of how to build an animal model of the anhepatic phase (liver ischemia) in rats to facilitate basic research into ischemia-reperfusion injury after liver transplantation.

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

מודל הפיברוזיס Dimethylnitrosamine מושרה בחולדה

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

דגם של עירוי מזין כרוני בחולדה

חיתוך רוחב עצב הטיביאלי - מודל סטנדרטי לניוון שרירים שלד מושרה denervation בעכברים

שיטה של המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

היצרות פרפור השמאלי המושרה Arterialization ורידית ריאתית יתר לחץ דם ריאתי קבוצה 2 בעכברוש

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

מורנה דיוק-גזור פרוסות הכבד כמודל Vivo Ex של ביולוגיה של הכבד

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

מודל הפיברוזיס Dimethylnitrosamine מושרה בחולדה

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

דגם של עירוי מזין כרוני בחולדה

חיתוך רוחב עצב הטיביאלי - מודל סטנדרטי לניוון שרירים שלד מושרה denervation בעכברים

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

היצרות פרפור השמאלי המושרה Arterialization ורידית ריאתית יתר לחץ דם ריאתי קבוצה 2 בעכברוש

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

מורנה דיוק-גזור פרוסות הכבד כמודל Vivo Ex של ביולוגיה של הכבד

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

שיטה של המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar