טכניקה חדשה זו עבור הדמיה mesoscopic בזמן אמת של עקבות CSF פלורסנט דרך הגולגולת שלם של עכברים חיים ניתן להשתמש כדי להעריך תחבורה גלימפטית. היתרון העיקרי הוא שטכניקה זו מאפשרת מדידות דינמיות של עוקבים תוך-ריסטרנלים in-vivo בשבריר מעלותן של דרכים אחרות להדמיה. ההליכים הנדרשים כדי למקם את צלחת הראש על cisterna מגנה cannula הם פשוטים פולשניים מינימלית אבל דורשים תרגול להתבצע כראוי.
הדגמה חזותית של השלבים הקריטיים של שיטה זו נדרשת כדי למקסם את איכות התמונה ולאפשר השוואות לשחזור בין עכברים שונים וקבוצות ניסוי. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן הרטיב את הצוואר והראש במים סטריליים וגלח את הפרווה הרטובה. נגב את העור החשוף עם ספוגית אלכוהול כדי להסיר כל שיער שיורית ולה מניח את העכבר במסגרת סטראוטקטית על גבי כרית מבוקרת טמפרטורה.
יש למרוח משחה על עיני בעלי החיים ולנקות את העור החשוף בעזרת ספוגית כלורקסידין. לאחר 2 דקות להסיר את כלורהקסידין עם לנגב אלכוהול ולהחיל תותבת יוד. כאשר היודון התייבש להזריק משככי כאבים תת עוריים לתוך החלק העליון של הגולגולת והצוואר.
החל מהחלק של הצוואר המכסה את קרום העורף, לעשות חתך קו האמצע בעור overlying ממשיך rostrally לכיוון הקו התוך-אורביאלי. מרחיבים את החתך באופן משני לגבול שבו שריר הזמן מכניס לתוך הגולגולת ומסירים את כל העור של החתך fusiform לחשוף הן את העצמות הקדמיות ואת עצמותקוד. להשקות את הגולגולת עם מלוחים סטריליים, ולהשתמש ספוגיות כותנה כדי לנקות את פני השטח עד שהוא ללא פסולת ושיער.
לאחר החדרת קאנולה מגנה cisterna להחיל תערובת של מלט שיניים ודבק cyanoacrylate לצד הגחוני של צלחת הראש סביב הגבול. מניחים את צלחת הראש על הגולגולת כך שהגבול הקדמי של הצלחת מתיישר עם הקצה האחורי של עצם האף והגבול האחורי מתיישר עם ההיבט הקדמי של העצם הבין-דורית ומוודאים שהתפר הסגיטלי מרוכז וישר יחסית לחלון. חשוב לוודא כי צלחת הראש מאובטחת כי זה לא לחסום את שדה הראייה של cannulation מגנה cisterna.
השתמש כמה טיפות של מאיץ דבק כדי לתקן את המיקום של צלחת הראש ולמלא את כל הפערים הנותרים עם תערובת המלט. הדבק את מיכל מגנה cisterna לצלחת הראש ולהשתמש בצלחת הראש כדי למקם את העכבר לתוך מחזיק הראש במצב קבוע. בזהירות למקם את העכבר ואת משאבת עירוי מחובר cannula על עגלה להובלה למאקרוסקופ ולהמקם את מחזיק הראש על הבמה של המקרוסקופ.
ודא כי הקו ממשאבת המזרק אל cannula מגנה cisterna אינו מתוח, כי אין לו סטיות. שימו לב לקצב הנשימה ולצבע הוורוד של קרום הריר כדי לאשר חמצון טוב. הפעל את מצלמת המאקרוסקופ ואת דיודה פולטת האור והתחל את המצב החי.
התאימו את ההגדלה של שדה ההדמיה כך שניתן יהיה לדמיין בבירור את התפר האף-פרונטאלי בחלק העליון של השדה ואת התפר הלמבדואידי בתחתית. פעם אחת במקום קלטת מחזיק הראש לשלב מקרוסקופ ולמקד את המקרוסקופ על הגולגולת החשופה עד מישור המוקד ממוקם בצדדים הצדדיים של עצמות קודקוד אחורי לתפרים הכתר. עבור עירוי מעקב CSF להגדיר את משאבת עירוי לקצב ונפח המתאים ולהגדיר את אורך גל העירור המתאים ואת זמן החשיפה עבור tracer עבור כל ערוץ.
לאחר מכן ודא שפונקציית ההפעלה במאקרוסקופ נכונה לפני אתחול בו-זמנית של עירוי המעקב וההדמיה. במהלך ההדמיה ניתן לזהות בקלות את התפרים הקדמיים של האף, הסגיטל, קורונטל והלמבדואידים. לאחר מעקב CSF כבר החדיר לתוך מגנה cisterna הפלואורסצנטיות tracer נצפתה לראשונה בבריכות גדולות של CSF תת-אנכרוניאלי בבור האולפטופרונאלי ובבור המרובע ליד פגרת האצטרובל ובסופו של דבר מקיפה את עורקי המוח האמצעיים.
עוקבי CSF ואז להיכנס למוח שלהם לאורך חללי כלי הדם פרי של ענפי פיפל קליפת המוח של העורק המוחי האמצעי. הדמיה הובלה CSF לאחר פגיעה מוחית טראומטית מגלה מעקב בתחילה בבור olfactofrontal אבל הזרם גלימפטי לאורך המרחבים כלי הדם קליפת המוח מבוטל לחלוטין בצד של הפציעה. ניתוח כמותי בתמונות in-vivo מראה כי אזור הזרימה ipsilateral הוא ירד כמעט שליש לעומת חצי הכדור ההפוך.
כדי למנוע חפצי תנועה והשינויים במישור המוקד זכור לאבטח כראוי את לוחית הראש ואת מחזיק לוחית הראש ולבדוק את רמת ההרדמה של החיה. לאחר הניסוי בתוצאות הדמיה in-vivo ניתן לאמת עוד יותר על ידי כימות חדירת המעקב באמצעות בפועל טכניקה זו מאפשרת את המחקר של המערכת גלימפטית באופן פיזיולוגי פולשני מינימלי יכול לעזור לענות על שאלות עתידיות על הידרודינמיקה CSF בבריאות ומחלות.
