פרוטוקול זה משתמש בניתוח היסטולוגי כדי להשיג מדידות מורפומטריות חזקות של פצעי כריתת עכבר. באמצעות טכניקה זו, אנו יכולים לנתח את הפצע כולו באמצעות תת קבוצה של חלקים סדרתיים, המאפשר לנו לזהות בצורה מדויקת יותר פגמים שעלולים להחמיץ אחרת. הדגימה של ההליך תהיה לינדסי ריאה, עמיתת מחקר מהמעבדה שלי.
לאחר אישור חוסר תגובה לרפלקס הדוושה בעכבר בוגר הרדמה, להחיל משחה על העיניים של החיה ולהשתמש קוצץ גילוח חשמלי בתנועה caudal-rostral כדי להסיר את הפרווה על גב העכבר בגובה הכתף. השתמש סכין גילוח מוחזק בזווית של 20 מעלות מאחור בתנועה rostral-caudal כדי להסיר את כל השיער שנותר מן העור החשוף, ולאחר מכן לנקות את העור עם יוד povidone אחד 70% isopropyl אלכוהול הכנה לנגב. עבור אינדוקציה פצע, לעטוף מגבת מבוססת נייר נקי על משטח שטוח מכוסה שעווה שיניים ומניחים את העכבר על המגבת במצב נוטה.
צובטים את עור העכבר בין השכמות לאורך קו האמצע הגבי ומושך את קפל העור הכריך מהגוף. מעבירים את העכבר לתקרת שכיבה צדדית, מניחים אגרוף ביופסיה בגודל הפצע הרצוי קרוב ככל האפשר לגוף ומאפשרים לעור להירגע. לחץ על האגרוף באמצעות תנועת נדנדה כדי לנקב את כל השכבות של העור ולהסיר את ביופסיות האגרוף מהפצע באמצעות מספריים סטריליים פינצטה כדי לשחרר את האגרוף מן העור שמסביב לפי הצורך.
לאחר מכן לאפשר לעכבר להתאושש עם ניטור משככי כאבים. לניתוח מורפומטרי של מיטת הפצע, פתחו תמונת פצע מוכתמת דיגיטלית. להגדרה של העדפות קנה המידה והמדידה, בחרו 'נתח', בחרו 'קבע קנה מידה' והזינו את המרחק בפיקסלים, במרחק הידוע וביחידה של האורך.
בחרו 'כללי' ו'אישור' כדי לשמור על שינוי גודל זהה לכל תמונה פתוחה ובחרו 'נתח' ו'קבע מידות' כדי לוודא שתיבה האזור מסומנת. כדי למדוד את אורך הפצע, בחר ביד חופשית, ולהשתמש בכלי כדי לעקוב אחר לאורך צומת עורי-epidermal, החל זקיק השיער האחרון של הרקמה פצוע בצד אחד של הפצע זקיק השיער הראשון של הרקמה שלא נפגעה בצד השני. אם האפידרמיס אינו מכסה את הפצע כולו, בצע את צומת עורית-אפידרמיס בצד אחד של הפצע שבו הלשון נודדת מסתיים ולהמשיך בעקבות ההיבט המעולה של רקמת הגרירה או הצומת בין רקמת הגרירה ואת הגלד עד הלשון נודדת זקיק השיער הראשון של הרקמה הבלתי פצועה בצד השני של הפצע הם הגיעו.
לאחר מכן לחץ על נתח ולמדוד. אורך המדידה יופיע באותן יחידות כמו שנקבעו בסולם. אם האפידרמיס אינו מכסה את הפצע כולו, למדוד את המרחק בין כל קצה מוביל אפידרמיס בעקבות ההיבט מעולה של רקמת הגרירה או הצומת בין רקמת הגרירה ואת גלד זקיק השיער הראשון.
כדי למדוד את אזור הפצע, השתמש בכלי ביד חופשית כדי לעקוב אחר ההיבט המעולה של האפידרמיס או ההיבט המעולה של רקמת הגרירה החל זקיק השיער האחרון של הרקמה הבלתי פצועה בצד אחד של הפצע זקיק השיער הראשון של הרקמה שלא נפגעה בצד השני. המשך לעקוב אנכית לאורך זקיק השיער לתוך רקמת ההתחסנות. לאחר זקיק השיער הנגדי רקמת השומן או השריר הם הגיעו, בצע את הגבול הנחות של רקמת הגרירה לצד הנגדי של הפצע ולהצטרף לנקודת ההתחלה לאורך זקיק השיער כדי לסגור את האזור.
אם הפצע אינו אפתלציה מלאה, עקבות לאורך ההיבט העליון של האפידרמיס עד הקצה המוביל ולחזור לנקודת ההתחלה לאחר צומת עורי-אפידרמיס. כפי שמודגם, כאשר לוקחים מדידות דו-ממדיות לאורך כל הפצע, הצלחנו לחשב פרמטרים לא אפשריים עם ניתוח דו-ממדי באמצע הפצע בלבד, שהוא שיטה נפוצה בתחום. בניסוי זה נעשה שימוש במדידות דו-ממדיות של אזור הפצע ובממוצע על כל הפצע או על תת-קבוצה אמצעית של הפצע ולא התגלה הבדל משמעותי בין קבוצות ניסוי או שיטות ניתוח.
נפח הפצע המחושב, לעומת זאת, היה שונה באופן משמעותי בין קבוצות הניסוי, והדגים את החשיבות של ניתוח היסטולוגי מעמיק של פרמטרים של ריפוי פצעים. יצירת פצעים בגודל עקבי לניתוח היסטולוגי וביצוע ניתוח סדרתי קפדני הם קריטיים לניתוח מורפומטרי מדויק. חלקים שאינם מזוהמים יכולים לשמש לשפעת חיסונית או כתם טריכרום של מאסון כדי למדוד היבטים אחרים של ריפוי פצעים בעוד פצעים קפואים הבזק ניתן להשתמש לצד מורפומטריה לניתוח חלבון כמותי.
