הפרוטוקול שלנו מאפשר הדמיה של המוח הזבוב כולו במהלך ההתנהגות, אשר חשוב להבנת איך נוירונים באזורים שונים במוח אינטראקציה כדי לעצב התנהגות. שלא כמו פרוטוקולים אחרים שפורסמו, זה פותח במיוחד כדי לגשת למוח כולו בזמן הזבוב מתנהג וחשה על ידי ריח, טעם או גירוי חזותי. כדי ליצור חריץ לראש.
לאחר הדפסת המחזיק במדפסת תלת-ממד, הנח פיסת סרט הדבקה דביקה מלבנית על משטח שטוח מתחת למיקרוסקופ סטריאו. ולחתוך כחמישה מילימטר בחתיכה של סנטימטר אחד. השתמש בשני אזמלים קבועים יחד במקביל כדי לחתוך חריץ הבא 400 על ידי 400 מיקרומטר באמצע הצד הארוך יותר של הקלטת, ומניחים את הקלטת על הצד המחמיא של החור בתחתית המחזיק.
השתמש במלקחיים כדי לדחוף את הקלטת כ 500 מיקרומטר סביב החור. ולהשתמש בלק שחור כדי לכסות את החלק העליון של הקלטת ואת המחזיק. לאחר שנתנו לק הציפורניים להתייבש לפחות שעה להשתמש ברקמה מגולגלת כדי להוסיף כמיקרוליטר אחד של שומן לחריץ הראש.
כדי להכין את חריץ הגוף, לחתוך חתיכת כ 2 ס"מ של סרט רחב לשתי חתיכות לחתוך 1.5 מילימטר פרוסות רחבות. לאחר מכן חותכים את כתף עמוקה 0.3 מילימטר חריץ הגוף ולוודא כי הקלטת מתאימה למחזיק. כדי לתקן זבוב לתוך המחזיק, במקום הראשון מיכל רדוד עם קרח מתחת למיקרוסקופ מנתח, ומניחים את המחזיק במהופך על פיסת רקמת מעבדה שהונחה מעל הקרח.
שאפו זבוב פירות נקבי בן יום עד ארבעה ימים מהתועב שלו, ופוצצו את הזבוב על קרח לא ממותק. כאשר הזבוב מפסיק לנוע, השתמש במלקחיים של Dell כדי לתפוס את הזבוב בבסיס הכנפיים, ולהחליק את הזבוב לתוך המחזיק עם הצוואר בתוך החריץ. העיניים צריכות להיות ממוקמות באותה מידה משני צדי החריץ.
במידת הצורך, מוסיפים מיקרוליטר אחד של שומן לחלק העליון של הראש כדי למנוע את הדבק מלהגיע לחלק האחורי של הראש. ואז לכסות את הגוף עם רקמה וקצת קרח כדי לוודא הזבוב לא זז. כדי לאבטח את הראש, מקם אותו בזווית של כ-20 מעלות ממבט אחורי מלא.
ולהשתמש רקמה מגולגלת כדי להחיל דבק UV סביב הראש תוך הימנעות לכלוך האזור החושי של עניין. לניסויי טעם, השתמשו במלקחיים כדי לשלוף את הפרובוסיס ולהוסיף דבק בבסיס הפרובוסיס כדי למנוע תנועה. אם לא מתוכנן ניסוי טעם לדחוף ולהדביק את proboscis לתוך הראש.
לרפא את הדבק עם אור UV במשך חמש שניות, ולהשתמש ברקמה מגולגלת כדי לנקות בזהירות את האזורים המקיפים את הראש, כדי להסיר כל דבק נוזלי שנותר שיכול להידבק לרגליים ודלתות הקרקע, אזורים חושיים. לאחר מכן השתמש ברצועה דקה של סרט או רקמה כדי להזיז את הרגליים לחזית לפי הצורך. כדי למקם את הגוף, להסיר את מיכל הקרח ולהפוך את המחזיק מסביב.
מוציאים את המים סביב הזבוב ופועלים במהירות לפני שהזבוב מתאושש מההרדמה מניחים את סרט חריץ הגוף מעל החור ודחפו בעדינות את גופו של הזבוב כלפי מטה, תוך דאגה לא להגזים בצוואר. מכסים את כל החורים הגדולים שנותרו עם סרט הדבקה ומוסיפים בערך מיקרוליטר אחד של שומן לחלק האחורי של הראש, כדי למנוע הדבק להידבק במיקום זה. השתמש ברקמה מגולגלת כדי לצבוע דבק UV סביב בית החזה ועל גבי הסרט ואת בית החזה, לרפא את הדבק עם אור UV במשך כחמש שניות.
בזהירות להסיר כל דבק שומן uncured עם רקמת מעבדה ולהוסיף כמיליליטר אחד של מלוחים לחלק העליון של הראש. השתמש מלקחיים כדי לדחוף הצידה את כל בועות האוויר ולבדוק דליפות על ידי הצבת תלוש כיסוי מעל מלוחים ולהפוך את המחזיק מסביב כדי לבדוק מלוחים בצד הקדמי. אם מלוחים נצפתה, להסיר את מלוחים ולתקן את החור עם דבק יותר או יותר שומן.
כדי לנתח את הראש בחר את ההגדלה הגבוהה ביותר והשתמש במלקחיים עדינים מאוד כדי לבצע שני חתכים בבסיס משולש הקוטיקל הכהה המרכזי בכל צד של הצוואר. חותכים סביב המשולש הכהה, ולהסיר את החלק הזה של הקוטיקל. שריר 16 והוושט צריכים להיות גלויים דרך החור הזה ונעים בקצב.
השתמש במלקחיים עדינים מאוד כדי לצבוט בזהירות את החלק העליון של אזור זה כדי לנתק את השריר 16 מבלי לנקב את הוושט. אם התנועה הקצבית עוצרת את השריר 16 הוסר ככל הנראה. כאשר השריר כבר נכרת החל מהקצה המדיאלי של אזור המשולש הכהה, להשתמש במלקחיים כמו זוג מספריים לחתוך בזהירות ולהסיר את הקוטיקל הנותרים בחתיכות קטנות.
לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי לתפוס ולאט ובהתמדה למשוך שק אוויר אחד בכל פעם. בסרטון זה התבטאה בדיקת סידן בכל תאי העצב של שני המוחות האלה של זבוב הפירות. ונפיחות של ריח הוצגה.
בניסוי זה, ביטוי חיישן סידן הוגבל נוירונים דופאמין וסרוטונרגי. שימו לב למתאם ההדוק בין הפעילות הסינכרונית החזקה על המוח לבין התנהגות ההליכה של הזבובים הממחישה כיצד ניתן לראות את המוח כולו במהלך התנהגות מסוימת. באמצעות ניתוח רכיבים עקרוני וניתוח רכיבים עצמאיים ניתן לחלץ אזורים פונקציונליים שונים המודגשים בצבעים שונים.
הצורה והלוקליזציה של האזורים הפונקציונליים מאפשרים למפות את האזורים לתבניות אנטומיות. כדי לזהות אזורי מוח ובמקרים מסוימים, סוגי נוירונים. לאחר יישור לערכי הפלואורסצנטיים המתאימים של התבנית האנטומית ניתן לממוצע בתוך אזורי מוח אנטומיים ספציפיים לניתוח כמותי.
לדוגמה, בניתוח זה אנו יכולים להבחין כי כל האזורים פעילים יותר במהלך ההליכה מאשר במהלך הטיפוח. היו סבלניים. ללמוד את טכניקת ניתוח הלב הזו זה קשה.
במעבדה שלי, אנשים צריכים בממוצע שלושה עד ארבעה חודשים לפני שהם שולטים בו ולקבל את ההכנות השימושיות הראשונות שלהם. בעקבות פרוטוקול זה אנו יכולים להקליט פעילות מוחית בקנה מידה גדול באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי. שיטות מהירות כגון מיקרוסקופ שדה אור מסומנות במיוחד.
