הפרוטוקול כאן הוא לבניית מודל חייתי מורכב של איסכמיה שריר הלב. שילוב עם טרשת עורקים וחשיפה חריפה של PM. זהו מודל חייתי אמין יותר למחקר על מחלות קשורות.
מודל בעלי חיים זה יכול לדמות טוב יותר מחלות כאלה במצב אמיתי. חוץ מזה לשיטה זו יש אחוזי הצלחה גבוהים והיא קלה לביצוע. המודל יכול לשמש למחקר פתולוגי ופיתוח תרופות של מחלות עם גורמים מורכבים.
מודל זה יכול לספק פלטפורמה למחקר טוקסיקולוגיה קרדיווסקולרית וסביבתית, והוא תורם רעיונות והפניות למחקר של המחלה הרב-גורמית. אינטובציה Orotracheal, פתח סדוק של החזה, ואת המיקום קשירה נכונה הם המפתחות להצלחה של מודל זה. זה חיוני כדי לשמור על תדריך העכבר ולמנוע דימום.
התחילו בבחירת שניים עד שלושה עכברים באופן אקראי ובדקו אם יש רובד בקשת אבי העורקים על ידי הדמיית אולטרסאונד, או על ידי תצפית אנטומית ישירה. הרדימו את העכבר שנבחר והניחו אותו במצב שכיבה על לוח העכבר. חברו את החותכות העליונות לגומי.
מקד זרקור LED קטן עם צינור גמיש על קנה הנשימה, שנמצא סביב נקודת האמצע של קו בית השחי. שים צמר גפן סטרילי קטן לתוך הפה של העכבר ולאחר מכן לגלגל את המטוש כדי לדחוף את הלשון החוצה. החזיקו את הלשון ומשכו אותה בעדינות כלפי מעלה כדי להפוך את חלל הפה, הלוע וקנה הנשימה לאותו כיוון אורכי.
את הגלוטיס, שהיא הכניסה של קנה הנשימה, ניתן לראות כנקודת אור שנפתחת ונסגרת עם כל נשימה. הכנס קנולה של 22 מד לתוך קנה הנשימה של העכבר על ידי כיוונון אל glottis, ולאחר מכן לשלוף את ליבת המחט. השתמש אקדח פיפטה עם כמות קטנה של מלח רגיל כדי לבדוק אם הצינור הוא כראוי צפצופים.
אם הצינור נמצא במיקום הנכון, עמוד הנוזל באקדח הפיפטה יקפוץ עם כל נשימה. שחרר 50 מיקרוליטר של השעיית DPM לתוך הצינור עם אקדח פיפטה. יש להסיר את מחט השכינה של חיית המחמד לאחר חשיפה ל-PM.
השאירו את העכבר על כרית החימום עד שהוא יחזור להכרה ואז החזירו את העכבר לכלוב הביתי. הנח את העכבר במצב שכיבה על פלטפורמת האינטובציה ותקן את העכבר. הסר את השיער של החזה השמאלי וחלק מהחזה הימני הסמוך עם קרם להסרת שיער.
לאחר מכן קשר את מחט המגורים של חיית המחמד עם מכונת הנשמה של בעלי חיים. נגב את העור עם יודופורם ואלכוהול לחיטוי. לעשות חתך עור במשך כסנטימטר אחד על ידי מספריים עיניים ו brace השרירים כדי לחשוף את הצלעות.
מהדקים את הצלע בפינצטה אופתלמית עם שן ועושים חתך קטן בחלל האינטרקוסטלי השלישי. הכינו חלון ניתוח עם כלי פתיחת חזה תוצרת בית ולאחר מכן קרעו את קרום הלב. החזיקו את תפר המשי הסטרילי עם מחט באמצעות מלקחיים המוסטטיים מיקרו-וסקולריים.
מעבירים את המשי דרך שריר הלב ברוחב שני מילימטרים באזור שבו נמצא העורק הכלילי. הניחו חתיכה קצרה של משי סטרילי חמישה אפס בין הליגטורה לרקמות שריר הלב כדי למנוע שבירת רקמות. קושרים את העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי ואת הצרור הקטן של שריר הלב סביבו בחוזקה.
הנציגות נחשבת מוצלחת כאשר הדופן הקדמית של החדר השמאלי הופכת חיוורת. סחטו בעדינות את האוויר מהחזה. לאחר מכן תפר את השרירים והעור הבין-קוסטליים ברצף עם משי סטרילי חמש אפס.
נקו את כל כתמי הדם לאחר הניתוח ולאחר מכן הניחו את העכבר על כרית חימום בתנוחת משענת לרוחב. נטר ללא הרף את סימני העכבר במשך כחמש עד 20 דקות עד שהם מתאוששים מההרדמה. לאחר שחזור רפלקס התיקון, העבירו את העכבר לכלוב התאוששות נקי על כרית חימום עם בקבוק המזון והמים.
המשך לפקח במשך 15 עד 30 דקות כדי להבטיח את הישרדותו של העכבר. לבסוף, להזריק נתרן פניצילין תוך שרירית על פי המינון הרצוי כדי למנוע זיהום פצע. מידת האיסכמיה נבדקה על ידי צביעת TTC.
רקמות נורמליות הופכות אדומות כאשר TTC מגיב עם סוקסינט דהידרוגנאז. בעוד הרקמות האיסכמיות נשארות חיוורות עקב ירידה בפעילות דהידרוגנאז. התמונות המייצגות מראות את רקמות הלב שלא סבלו מניתוח MI או מחשיפה ל- PM, סבלו מניתוח MI אך ללא חשיפה ל- PM, וסבלו מניתוח MI וחשיפה ל- PM.
חשיפת PM החמירה את איסכמיה שריר הלב. שמן אדום O יכול לצבוע במדויק את השומנים הנייטרליים, כגון טריגליצרידים ברקמות. הכתמים האדומים בתמונה מציינים לוחות.
הלוחות באבי העורקים של עכברים מסוג בר עם תזונה רגילה, עכברי נוקאאוט APO E עם תזונה עתירת שומן, ועכברי נוקאאוט APO E עם דיאטה עתירת שומן וסבלו מחשיפה ל- PM מוצגים כאן על ידי כתמי O אדומים בשמן. האכלה עתירת שומן הובילה לטרשת עורקים בעכברי נוקאאוט APO E וחשיפה ל-PM החמירה את טרשת העורקים. חשוב לוודא כי צינור endotracheal הוא כראוי להחדיר במהלך seromyotomy.
המפעיל צריך להשלים את פעולת האינטובציה במהירות, במדויק, ותמיד לשים לב למצב הנשימה של החיה במהלך הניתוח. השיטה שלנו מסייעת לחוקרים העוסקים במפגש בין זיהום אוויר למחלות לב וכלי דם. כאן אנו מספקים רעיון.
כמובן, חוקרים יכולים גם לבצע ישירות מחקר המבוסס על המודל החי שתיארנו.
