Le protocole ici est pour la construction d’un modèle animal composé de l’ischémie myocardique. Combinaison avec l’athérosclérose et l’exposition aiguë aux particules. Il s’agit d’un modèle animal plus fiable pour la recherche sur les maladies connexes.
Ce modèle animal permet de mieux simuler de telles maladies en situation réelle. De plus, cette méthode a un taux de réussite élevé et elle est facile à effectuer. Le modèle peut être utilisé pour la recherche pathologique et le développement de médicaments pour des maladies à facteurs complexes.
Ce modèle peut fournir une plate-forme pour la recherche en toxicologie cardiovasculaire et environnementale, et il apporte des idées et des références pour la recherche sur la maladie multifactorielle. L’intubation orotrachéale, l’ouverture fissurée de la poitrine et la position de ligature correcte sont les clés du succès de ce modèle. Il est essentiel de maintenir le briefing de la souris et de prévenir les hémorragies.
Commencez par sélectionner deux à trois souris au hasard et vérifiez s’il y a une plaque dans l’arc aortique par imagerie échographique ou par observation anatomique directe. Anesthésiez la souris sélectionnée et placez-la en décubitus dorsal sur la planche de la souris. Accrochez les incisives supérieures à l’élastique.
Concentrez un petit projecteur LED avec un tuyau flexible sur la trachée, qui se trouve autour du milieu de la ligne axillaire. Mettez un petit coton-tige stérile dans la bouche de la souris, puis roulez l’écouvillon pour sortir la langue. Tenez la langue et tirez-la doucement vers le haut pour faire la cavité buccale, le pharynx et la trachée dans la même direction longitudinale.
La glotte, qui est l’entrée de la trachée, peut être vue comme un point lumineux qui s’ouvre et se ferme à chaque respiration. Insérez un canola de calibre 22 dans la trachée de la souris en visant la glotte, puis retirez le noyau de l’aiguille. Utilisez un pistolet à pipette avec une petite quantité de solution saline normale pour vérifier si le tube est correctement dans la respiration sifflante.
Si le tube est à la bonne position, la colonne de liquide dans le pistolet à pipette rebondira à chaque respiration. Déposez 50 microlitres de suspension DPM dans le tube avec un pistolet à pipette. Retirez l’aiguille à demeure de l’animal après une exposition aux particules.
Gardez la souris sur le coussin chauffant jusqu’à ce qu’elle reprenne conscience, puis replacez-la dans la cage de la maison. Placez la souris en décubitus dorsal sur la plate-forme d’intubation et fixez la souris. Enlevez les poils de la poitrine gauche et une partie de la poitrine droite adjacente avec une crème dépilatoire.
Ensuite, reliez l’aiguille à demeure de l’animal à un ventilateur pour animaux. Essuyez la peau avec de l’iodoforme et de l’alcool pour désinfecter. Faites une coupe de peau d’environ un centimètre à l’aide de ciseaux ophtalmiques et fixez les muscles pour exposer les côtes.
Serrez la côte avec une pince ophtalmique avec une dent et faites une petite coupe au troisième espace intercostal. Faites une fenêtre d’opération avec des outils d’ouverture de poitrine faits maison, puis déchirez les membranes péricardiques. Tenez la suture stérile six zéro soie avec une aiguille à l’aide d’une pince hémostatique microvasculaire.
Passez la soie à travers une largeur de myocarde de deux millimètres dans la zone où se trouve l’artère coronaire. Placez un petit morceau de soie stérile cinq zéro entre la ligature et les tissus myocardiques pour éviter la rupture des tissus. Attachez étroitement l’artère coronaire descendante antérieure gauche et le petit faisceau du myocarde qui l’entoure.
La légation est considérée comme réussie lorsque la paroi antérieure du ventricule gauche devient pâle. Pressez doucement l’air de la poitrine. Ensuite, suturez les muscles intercostaux et la peau séquentiellement avec de la soie stérile cinq zéro.
Nettoyez toute la tache de sang après la chirurgie, puis placez la souris sur un coussin chauffant en position couchée latérale. Surveillez continuellement les signes de la souris pendant environ cinq à 20 minutes jusqu’à ce qu’ils se rétablissent de l’anesthésie. Une fois le réflexe de redressement récupéré, transférez la souris dans une cage de récupération propre sur un coussin chauffant avec la bouteille de nourriture et d’eau.
Continuez à surveiller pendant 15 à 30 minutes pour assurer la survie de la souris. Enfin, injectez de la pénicilline sodique par voie intramusculaire selon la dose souhaitée pour prévenir l’infection de la plaie. Le degré d’ischémie a été examiné par coloration TTC.
Les tissus normaux deviennent rouges lorsque le TTC réagit avec la succinate déshydrogénase. Alors que les tissus ischémiques restent pâles en raison de la diminution de l’activité de la déshydrogénase. Les images représentatives montrent les tissus cardiaques qui n’ont subi aucune chirurgie de l’IM ou de l’exposition aux particules, qui ont subi une chirurgie de l’IM mais aucune exposition aux particules, et qui ont subi une chirurgie de l’IM et une exposition aux particules.
L’exposition aux particules a aggravé l’ischémie myocardique. Oil Red O peut colorer avec précision les graisses neutres, telles que les triglycérides dans les tissus. Les taches rouges sur l’image indiquent des plaques.
Les plaques dans l’aorte des souris de type sauvage avec un régime alimentaire régulier, des souris knockout APO E avec un régime riche en graisses et des souris knockout APO E avec un régime riche en graisses et souffrant d’exposition aux particules sont montrées ici par coloration O rouge huile. Une alimentation riche en graisses a conduit à l’athérosclérose chez les souris knockout APO E et l’exposition aux particules a aggravé l’athérosclérose. Il est important de s’assurer que le tube endotrachéal est correctement inséré pendant la séromyotomie.
L’opérateur doit effectuer l’opération d’intubation rapidement, avec précision et toujours faire attention à l’état respiratoire de l’animal pendant l’opération. Notre méthode aide les chercheurs qui sont préoccupés par l’intersection de la pollution de l’air et des maladies cardiovasculaires. Nous vous donnons ici une idée.
Bien entendu, les chercheurs peuvent également effectuer directement des recherches basées sur le modèle animal que nous avons décrit.
