O protocolo aqui é para construir um modelo animal composto de isquemia miocárdica. Combinando com esclerose athero e exposição aguda de PM. Este é um modelo animal mais confiável para a pesquisa sobre doenças relacionadas.
Este modelo animal pode simular melhor tais doenças em uma situação real. Além disso, este método tem uma alta taxa de sucesso e é fácil de executar. O modelo pode ser utilizado para pesquisa patológica e desenvolvimento de medicamentos de doenças com fatores complexos.
Este modelo pode fornecer uma plataforma para pesquisas cardiovasculares e toxicológicas ambientais, e contribui com ideias e referências para a pesquisa da doença multifatorial. Intubação orotraqueal, abertura rachada do peito e posição de ligadura correta são as chaves para o sucesso deste modelo. É essencial manter o briefing do mouse e evitar hemorragia.
Comece selecionando dois a três ratos aleatoriamente e verifique se há uma placa no arco aórtico por imagem de ultrassom, ou por observação anatômica direta. Anestesiar o mouse selecionado e colocá-lo em uma posição supina na placa do mouse. Ligue os incisivos superiores ao elástico.
Concentre um pequeno holofote led com um tubo flexível na traqueia, que fica em torno do ponto médio da linha axilar. Coloque um pequeno cotonete estéril na boca do rato e role o cotonete para colocar a língua para fora. Segure a língua e puxe-a suavemente para cima para fazer a cavidade oral, faringe e traqueia na mesma direção longitudinal.
O glottis, que é a entrada da traqueia, pode ser visto como um ponto brilhante que abre e fecha a cada respiração. Insira uma canola de calibre 22 na traqueia do mouse mirando no glottis e, em seguida, puxe o núcleo da agulha. Use uma arma de pipeta com uma pequena quantidade de soro fisiológico normal para testar se o tubo está corretamente no chiado.
Se o tubo estiver na posição correta, a coluna líquida da pistola pipeta estará saltando a cada respiração. Jogue 50 microliters de suspensão DPM no tubo com uma arma de pipeta. Remova a agulha de indwelling do animal de estimação após a exposição da PM.
Mantenha o mouse na almofada de aquecimento até que ele recupere a consciência e, em seguida, coloque o mouse de volta na gaiola doméstica. Coloque o mouse em uma posição supina na plataforma de intubação e conserte o mouse. Remova o cabelo do peito esquerdo e parte do peito direito adjacente com creme de depilação.
Em seguida, ligue a agulha de indwelling animal com um ventilador animal. Limpe a pele com iodoforme e álcool para desinfetar. Faça um corte de pele por aproximadamente um centímetro por tesoura oftálmica e prepare os músculos para expor as costelas.
Fixar a costela com uma pinça oftálmica com dente e fazer um pequeno corte no terceiro espaço intercostal. Faça uma janela de operação com ferramentas caseiras de abertura do peito e, em seguida, rasgue as membranas pericárviais. Segure a sutura de seda estéril de seis zero com uma agulha usando fórceps hemostáticos microvasculares.
Passe a seda através de uma largura de dois milímetros de miocárdio na área onde a artéria coronária está localizada. Coloque um pequeno pedaço de seda estéril de cinco zero entre a ligadura e os tecidos do miocárdio para evitar a quebra do tecido. Amarre a artéria coronária descendente anterior esquerda e o pequeno feixe do miocárdio ao seu redor firmemente.
A legação é considerada bem sucedida quando a parede anterior do ventrículo esquerdo fica pálida. Gentilmente esprema o ar do peito. Em seguida, suturar os músculos intercostais e a pele sequencialmente com seda estéril de cinco zero.
Limpe toda a mancha de sangue após a cirurgia e coloque o rato em uma almofada de aquecimento em uma posição lateral reclinável. Monitore continuamente os sinais do rato por aproximadamente cinco a 20 minutos até que se recuperem da anestesia. Uma vez recuperado o reflexo de redocimento, transfira o mouse para uma gaiola de recuperação limpa em uma almofada de aquecimento com a garrafa de comida e água.
Continue monitorando por 15 a 30 minutos para garantir a sobrevivência do mouse. Finalmente, injete sódio penicilina intramuscularmente de acordo com a dose desejada para prevenir a infecção por feridas. O grau de isquemia foi examinado pela coloração do TTC.
Os tecidos normais ficam vermelhos quando o TTC reage com o succinato desidrogenase. Enquanto os tecidos isquêmicos permanecem pálidos devido à diminuição da atividade desidrogenase. As imagens representativas mostram os tecidos cardíacos que não sofreram cirurgia de MI ou exposição de PM, sofreram cirurgia de MI, mas sem exposição à PM, e sofreram cirurgia mi e exposição de PM.
Exposição da PM agravou isquemia do miocárdio. Óleo Vermelho O pode colorir precisamente as gorduras neutras, como triglicerídeos nos tecidos. As manchas vermelhas na foto indicam placas.
As placas na aorta de ratos do tipo selvagem com dieta regular, APO E nocauteam camundongos com dieta rica em gordura, e camundongos eliminatórios APO E com uma dieta rica em gordura e sofrem de exposição à PM são mostrados aqui pela mancha de O vermelho óleo. A alimentação rica em gordura levou à aterosclerose em camundongos nocauteados APO E e exposição de PM aterosclerose agravada. É importante garantir que o tubo endotraqueal esteja inserido corretamente durante a seromiotomia.
O operador precisa concluir a operação de intubação de forma rápida, precisa e sempre prestar atenção à condição respiratória do animal durante a operação. Nosso método ajuda pesquisadores preocupados com a intersecção entre poluição do ar e doenças cardiovasculares. Aqui nós fornecemos uma ideia.
É claro que os pesquisadores também podem realizar diretamente pesquisas com base no modelo animal que descrevemos.
