ייצור ומיקרוסקופ הדמיה לכל החיים של תאים חיים מרובי פרמטרים (FLIM) של ספרואידים רב-תאיים

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

656 Views

•

08:43 min

•

August 9th, 2024

DOI :

10.3791/66845-v

August 9th, 2024

•

Angela C. Debruyne*¹, Gabriele Ferrari*¹, Hang Zhou*¹, Nore Van Loon¹, Nina Heymans¹, Irina A. Okkelman¹^,², Ruslan I. Dmitriev¹^,²

¹Tissue Engineering and Biomaterials Group, Department of Human Structure and Repair, Faculty of Medicine and Health Sciences, Ghent University, ²Ghent Light Microscopy Core, Ghent University

Transcript

בעבודה זו, אנו מציגים ומשווים שיטות היווצרות ספרואידים שניתן להשתמש בהן לניתוח חילוף החומרים בתאים וחלוקת חמצן באמצעות מיקרוסקופ תאים חיים. בשנים האחרונות, נעשה שימוש נרחב במיקרוסקופ הדמיה פלואורסצנטית לכל החיים כדי לחקור סמנים ביולוגיים מטבוליים כמו NADPH ו- FAD בתאים חיים, וכמה ננו-חלקיקים פלואורסצנטיים פותחו כדי להכפיל מדידות כאלה עם הדמיה של חמצון תאים ורקמות. ספרואידים רב-תאיים, אורגנואידים ואיבר-על-שבב יכולים לשכפל מיקרו-סביבה מורכבת, דמוית in-vivo, ולמזער את הצורך במחקר בבעלי חיים.

עבור ייצור ספרואידים, אנו מראים שיטות היווצרות שונות, יכול לנוע בין תפוקה נמוכה לגבוהה. הם גם מדגישים את הנגישות האופטית שלהם, תאימות עם מיקרוסקופ הדמיה לכל החיים פלואורסצנטי, ואת האפשרות לכלול רכיבי מטריצה חוץ-תאיים. לכן, למרות שמודלים תלת-ממדיים במבחנה מספקים הקשר טוב יותר בהשוואה לתרבויות דו-ממדיות, השונות הגבוהה שלהם, יכולת השחזור הנמוכה והדיווח הניסיוני החלקי שלהם נותרו בעיה.

פרמטרים כגון גודל הספרואידים, הרכב החומרים המזינים, צמיגות חוץ-תאית ואפילו שיטות היווצרות ספרואידים יכולים כולם להוביל להטרוגניות תאית מוגברת. באמצעות פרוטוקול זה, אנו שואפים ליצור הרמוניה ולתקנן את שיטות הייצור הספרואידים, תוך הדגשת היבטים מרכזיים החשובים לניתוח מתמשך ורב-פרמטרי של ספרואידים באמצעות מיקרוסקופ FLIM.

Summary

Explore More Videos

210

FLIM

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:51

High‐Throughput Generation of Multicellular Spheroids from Human Cancer Cell Line for Live 3D Imaging

4:15

Assessing the Impact of Spheroid Formation Methods in 3D Cell Culture Systems Using Live Cell Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM)

Related Videos