著者スポットライト:蛍光寿命イメージング顕微鏡を用いた代謝および酸素化分析のためのスフェロイド形成法の標準化(英語)

本研究では、生細胞顕微鏡を用いた細胞代謝や酸素分布の解析に使用できるスフェロイド形成法を提示し、比較します。近年、蛍光寿命イメージング顕微鏡は、生細胞のNADPHやFADなどの代謝バイオマーカーの研究に広く使用されており、細胞や組織の酸素化のイメージングとそのような測定を多重化するために、いくつかの蛍光ナノ粒子が開発されています。多細胞スフェロイド、オルガノイド、Organ-on-a-chipは、複雑な生体内のような微小環境を再現できるため、動物研究の必要性を最小限に抑えることができます。

スフェロイドの製造については、低スループットから高スループットまで、さまざまな形成方法を示します。また、光学的アクセシビリティ、蛍光寿命イメージング顕微鏡との互換性、および細胞外マトリックス成分を含める可能性を強調しています。そのため、3D in vitroモデルは2D培養と比較してより優れたコンテキストを提供しますが、その高い変動性、低い再現性、および不完全な実験報告は依然として問題です。

スフェロイドのサイズ、栄養素組成、細胞外粘度、さらにはスフェロイド形成方法などのパラメータはすべて、細胞の不均一性の増加につながる可能性があります。このプロトコルにより、スフェロイドの作製方法を調和させ、標準化することを目指しており、FLIM顕微鏡を用いたスフェロイドの寿命連続およびマルチパラメトリック分析に重要な側面を強調しています。