Per iniziare, avviare il software compatibile con il sistema di imaging in vivo. Accedere e attendere il caricamento completo del pannello della procedura guidata di imaging. Fare clic sul pulsante Initialize (Inizializza) nel pannello della procedura guidata di imaging per avviare il raffreddamento della fotocamera.
Quindi impostare la temperatura del termoforo tra 30 e 37 gradi Celsius per mantenere gli animali al caldo. Successivamente, pizzica delicatamente i cuscinetti dei piedi degli animali anestetizzati per valutare il loro riflesso di pedalata. Iniettare per via intraperitoneale 10 microlitri per grammo di peso corporeo di luciferina sodica negli animali rasati.
Ora allinea l'animale contro il centro della fotocamera come indicato dal simbolo più nello strumento di imaging. Impostare il tempo di imaging nel pannello della procedura guidata dell'immagine su tre minuti per l'imaging della luminescenza e selezionare le caselle di controllo sia per la foto che per la luminescenza. Fare clic su Acquisisci per eseguire la prima misurazione.
Dopo aver registrato tutte le misurazioni, convertire la scala dell'immagine in radianza. Ora determina le impostazioni ottimali del binning e della scala dei colori per le immagini e mantienile uniformi per tutte le immagini. Quindi fare clic sullo strumento ROI nel pannello della tavolozza degli strumenti e utilizzare l'opzione Posiziona ROI per selezionare le aree di interesse sull'immagine.
Infine, fai clic su Misura ROI e copia i dati risultanti per esportarli nel software organizzativo o statistico scelto. L'imaging in vivo dei topi THAI ha mostrato che le aree prive di pelo, come i cuscinetti dei piedi, la coda e il naso, avevano segnali basali più elevati. Il segnale della luciferasi è stato influenzato dallo stato dell'ormone tiroideo.
Sono stati osservati segnali robusti nella regione testicolare. L'azione dell'ormone tiroideo è stata significativamente intensificata nel tessuto adiposo bruno dei topi THAI sottoposti a stress freddo. Il trattamento non ha avuto alcun impatto sui segnali di luciferasi provenienti dai cuscinetti plantari e dalla coda.
Gli studi di imaging hanno anche catturato l'accumulo e la clearance del diclazuril, un composto che altera il sistema endocrino, per un periodo di tre settimane.
