Presentiamo una pipeline standard per ottenere tumori MATC e presentare dinamiche tumorali e informazioni patologiche. Questo modulo aiuterà i ricercatori a comprendere l'oncogenesi tumorale e facilitare le scoperte di farmaci. Il MATC facilita la raccolta di campioni MATC nell'intero decorso di oncogenesi tumorale, e ciascuno è un modello speculare spontaneo, con il sistema immunitario completo e il microambiente immunitario.
MATC può essere utilizzato per studiare gli effetti di specifiche funzioni geniche sull'ATC, comprendere i meccanismi di progressione del tumore tiroideo e, infine, migliorare la prognosi dei pazienti ATC. Per iniziare, pesare il tamoxifene e scioglierlo in 15 millilitri di olio di mais mediante ultrasuoni ad una concentrazione di 20 milligrammi per millilitro. Quindi conservarlo in un contenitore marrone a quattro gradi Celsius.
A circa otto settimane, pesare i topi con bilance elettroniche e quindi somministrare tamoxifene per via intraperitoneale due volte ad un intervallo di una settimana. Dopo aver preparato gli strumenti di dissezione e la soluzione di fissaggio del tessuto di topo, riempire un piatto pulito di 10 centimetri con circa 10 millilitri di PBS sterile per la conservazione temporanea del tessuto e per lavare via il sangue dalla superficie del tessuto. Per l'estrazione della tiroide, posizionare il topo eutanasia sulla scheda di dissezione.
Dopo aver disinfettato l'area del collo, utilizzare forbici e pinze sterili. Fai una piccola incisione sopra il centro della clavicola e continua a mediana fino alla bocca. Individuare la ghiandola sottomandibolare e rimuoverla per esporre la posizione anatomica della tiroide, che si trova vicino alla cartilagine tiroidea e alla trachea.
Una volta individuata la ghiandola tiroidea, sezionare accuratamente dal resto della regione del collo usando forbici sterili e metterla nel piatto precedentemente preparato contenente PBS sterile. Rimuovere il sangue dalla superficie del tessuto tiroideo e, con le forbici sterili, tagliare accuratamente la trachea. Quindi mettere il tessuto tiroideo sul panno sterile e misurare le dimensioni dei lobi sinistro e destro della ghiandola tiroidea usando i calibri Vernier.
Usando una lama sterile, dividere i lobi sinistro e destro della ghiandola tiroidea in due parti. Mettere una parte in due millilitri di soluzione di paraformaldeide al 4% per la fissazione e un'altra in azoto liquido per la conservazione. Per estrarre il polmone e il fegato, pizzicare appena sopra il pene del topo dopo aver disinfettato l'area.
Quindi fare una piccola incisione e tagliare lungo la linea mediana dell'addome fino all'osso succlavia. Esporre la cavità addominale. Dopo aver individuato il fegato nella parte superiore dell'addome, rimuoverlo con cura e inserirlo in un nuovo piatto contenente PBS sterile.
Osservare e contare grossolanamente le metastasi nel polmone e nel fegato, seguite dall'ottenimento di un'immagine. Con una lama sterile, dividere i tessuti polmonari ed epatici in due parti. Come dimostrato in precedenza, fissare una parte e conservare l'altra parte in azoto liquido.
La curva di crescita del tumore è stata tracciata per osservare l'alterazione dinamica delle dimensioni del tumore. I tumori sono cresciuti lentamente nella fase iniziale e sono diventati drammaticamente più veloci nella fase avanzata. D'altra parte, una curva di sopravvivenza è stata tracciata in base al tempo di sopravvivenza registrato.
La sopravvivenza mediana di MATC è stata di 130 giorni. Inoltre, circa il 92% di metastasi polmonari è stato trovato nella maggior parte dei MATC. Nella colorazione HE dei tumori primari e dei tessuti polmonari metastatici di MATC, i tessuti inducibili di un mese hanno mostrato caratteristiche solidificate incomplete e la coesistenza di strutture follicolari e cellule maligne, mentre le strutture follicolari tiroidee sono scomparse e il tumore si è solidificato completamente dopo un'induzione di due mesi.
Il tumore primario ha rivelato che le cellule tumorali erano morfologicamente diverse, con cellule giganti pleomorfe e cellule a forma di fuso. Inoltre, la colorazione HE dei tessuti polmonari metastatici ha mostrato che il tessuto polmonare normale era una struttura reticolare con strutture alveolari e spazi aerei chiari. Tuttavia, le metastasi polmonari hanno mostrato una perdita della normale struttura reticolare, ispessimento della cavità aerea e parenchima polmonare.
Nel frattempo, la colorazione immunoistochimica del tumore MATC con diversi anticorpi ha mostrato cellule tumorali altamente proliferative, infiltrazione linfocitaria, un'estesa infiltrazione di cellule mieloidi, che era coerente con i campioni clinici. Durante la dissezione, la posizione anatomica della ghiandola tiroidea deve essere compresa correttamente. La ghiandola tiroidea è posta vicino alla cartilagine tiroidea e alla trachea.
