Gli studi che forniscono gli animali sono stati finanziati dal Ministero britannico per l'alimentazione, l'ambiente e gli affari rurali e dall'Unione europea (attraverso il finanziamento del laboratorio di riferimento delle TSE dell'UE). Riconosciamo il supporto dei project manager, dr.M. Simmons e Dr.M. Jeffrey.

1. Valutazione della postura
<ol><li>Valutare la postura dell'animale mentre è indisturbato.</li>
	<li>Gli animali affetti da TSE possono stare con arti a base larga, possono apparire curvo o stare con un carrello a testa bassa.</li>
</ol>2. Valutazione del comportamento
<ol><li>Studia il comportamento dell'animale, quando viene lasciato solo, quando viene avvicinato e quando viene maneggiato.</li>
	<li>Gli animali colpiti dalle TSE possono mostrare una mutazione alterata stando separati dagli altri ovini o non immediatamente dopo altri ovini.</li>
	<li>Quando l'animale viene avvicinato, può scappare e crollare, o collassa sul pavimento quando viene maneggiato. Il cerchio compulsivo in senso orario o antiorario può essere visto nelle pecore con scrapie atipica.</li>
</ol>3. Test di risposta alle minacce
<ol><li>Tieni la testa dell'animale per testare la risposta della minaccia: sposta la mano o più dita più volte verso ogni occhio dell'animale per indurre una risposta lampeggiante, ma fai attenzione a non toccare i peli del viso o creare turbolenze d'aria che possono causare l'animale a lampeggiare.</li>
	<li>La risposta alla minaccia può essere assente negli animali colpiti dalla scrapie, in particolare negli ovini con scrapie atipica. Sebbene il test della risposta alla minaccia sia l'unico test del nervo cranico utilizzato come parte del protocollo, l'ispezione visiva del viso durante questa procedura può rivelare altri segni di deficit neurologici normalmente non visti nella scrapie, ad esempio la paralisi facciale. Se l'animale non lampeggia in risposta alla minaccia, è consigliabile testare il riflesso palpebrale toccando le palpebre per garantire che l'incapacità dell'animale di lampeggiare non sia causata dalla paralisi facciale.</li>
</ol>4. Test della risposta ai graffi
<ol><li>Assicurati che l'animale sia calmo durante questa procedura perché il test non può essere interpretato in un animale in difficoltà.</li>
	<li>Graffiare le aree della schiena nelle regioni toracica, lombare e sacrale, fermandosi tra ogni episodio graffiante.</li>
	<li>Se l'animale risponde con movimenti ritmici della testa o del corpo, o si muove o lecca le labbra graffiando una particolare area, ripetere il test scratch per confermare la riproducibilità della risposta graffiante.</li>
	<li>Una risposta ripetibile viene solitamente suscitata in animali che sono pruritosi, che di solito include pecore con scrapie classica o capre con la forma pruritica di scrapie, ma generalmente non c'è risposta negli ovini con scrapie atipica a meno che non siano presenti altre condizioni cutanee pruritiche o ectoparassiti.</li>
</ol>5. Controllo della perdita di lana e delle lesioni cutanee
<ol><li>Ispezionare la pelle.</li>
	<li>Il prurito dovuto alla scrapie di solito causa la caduta dei capelli, che può essere sul sondaggio, sulla schiena, sulla groppa, sul lato del torace o sull'addome a causa di uno sfregamento eccessivo o graffio in cui la pelle sottostante appare normale.</li>
	<li>Le abrasioni possono apparire in seguito se l'animale ha l'opportunità di strofinare oggetti appuntiti. Possono apparire ferite da morso, in particolare sugli arti, a causa di un eccessivo rosicchiamento degli arti.</li>
</ol>6. Condizione del corpo di punteggio
<ol><li>Valutare le condizioni del corpo dell'animale palpando i processi dorsali e trasversali delle vertebre lombari.</li>
	<li>La scrapie può causare una progressiva perdita delle condizioni del corpo in cui i processi trasversali delle vertebre lombari possono essere facilmente sentiti individualmente e le estremità dei processi appaiono nitide.</li>
</ol>7. Bendare l'animale
<ol><li>Coprire gli occhi dell'animale con un cappuccio, che può essere fatto utilizzando qualsiasi sacchetto non trasparente in cui un angolo viene tagliato per consentire la respirazione dell'animale.</li>
	<li>Rilasciare l'animale solo se non ci sono problemi di sicurezza e non vi è alcun rischio di lesioni a causa di un animale in preda al panico; altrimenti tenere in mano gli ovini e studiare i movimenti degli animali pur mantenendo il controllo dell'animale.</li>
	<li>Bendare può esacerbare i segni di un sistema vestibolare o disfunzione cerebellare, che può essere oscurata dalla capacità dell'animale di compensare attraverso la sua visione. La perdita di equilibrio, l'incoordinazione o il circling possono essere provocati, in particolare in ovini altrimenti clinicamente insignificanti con scrapie atipica.</li>
</ol>8. Valutazione del movimento degli animali
<ol><li>Studia l'andatura e i movimenti muscolari dell'animale quando si muove liberamente.</li>
	<li>L'incoordinazione può essere caratterizzata da movimenti a base ampia degli arti posteriori, saltellando con entrambi gli arti posteriori o ondeggiando eccessivamente nei quarti posteriori, il che può causare inciampare o sedersi brevemente.</li>
	<li>La presenza di un tremore alla testa è spesso sottile quando l'animale è indisturbato ma può diventare più evidente durante o dopo il completamento dell'esame clinico.</li>
</ol>9. Interpretazione
<ol><li>Si consideri l'importanza dei risultati per quanto riguarda la scrapie.</li>
	<li>Sebbene la presenza di singoli segni, come una risposta ripetibile a graffi, tremore, comportamento anomalo, giri, episodi collassante, atassia o una risposta di minaccia assente, possa avere varie cause, il verificarsi combinato di due o più di questi segni è altamente suggestivo della scrapie nelle pecore o nelle capre.</li>
</ol>

<ol>
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Tutte le procedure riguardanti gli animali sono state eseguite in conformità con l'Animal (Scientific Procedures) Act del 1986, su licenza del ministero degli Interni del governo del Regno Unito. Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

La scrapie è una malattia elencata dall'Organizzazione mondiale della sanità per la salute degli animali (OIE), che, in assenza di un test ante mortem rapido e affidabile, si basa sulla capacità degli agricoltori o dei veterinari di riconoscere i segni clinici associati a questa malattia. La maggior parte dei casi di scrapie, in particolare quelli atipici, tuttavia, sono attualmente riscontrati mediante sorveglianza mirata delle TSE, vale a dire mediante esame cerebrale di piccoli ruminanti soggetti a macellazione o animali morti. Allevare pecore per la resistenza alla scrapie classica, che ha ridotto il numero di casi classici di scrapie, molto probabilmente ha anche ridotto la consapevolezza delle persone per la malattia in modo che sia meno spesso considerata nella diagnosi differenziale dei disturbi neurologici negli ovini. La scrapie atipica ha anche una bassa prevalenza con circa cinque casi nei mattatoi e otto casi in scorte cadute ogni 10.000 testati in Europa4. Inoltre, il prurito, solitamente evidente come alopecia con o senza escoriazione, è spesso considerato un segno caratteristico della scrapie13. Pertanto, una malattia neurologica senza prurito concomitante osservata nella scrapie atipica12 o nella forma nonpruritica della scrapie caprina11 non può sollevare sospetti di scrapie.
Questo protocollo d'esame è stato concepito per identificare i segni clinici delle TSE negli ovini valutando specifici segni clinici associati a vari tipi di scrapie (scrapie atipica e classica, quest'ultima rappresentata da un'pecora atipica inoculata all'ESB, che presentava segni classici simili a scrapie). Nella scrapie classica, la percentuale di casi che mostravano una risposta graffiata positiva ("riflesso del mordicchiare") variava da 50-77 in oltre 100 pecorestudiate 5,8. I disturbi del movimento possono essere osservati fino all'81% dei casi classici di scrapie sulla base di varistudi 18. L'incoordinazione è anche un segno importante in vari casi naturali di scrapie atipica, spesso accompagnata da cambiamenti comportamentali1, ma ulteriori segni riportati sia nelle pecore scrapie atipiche naturalmente che sperimentalmente infette stavano girando e lacompromissione visiva 12,15,16, motivo per cui la benda e il test della risposta alla minaccia sono inclusi nel protocollo d'esame. Il punteggio della condizione corporea, ad esempio utilizzando un sistema di punteggio di 6 punti14, consente la valutazione dell'emaciazione, che può essere osservata nelle pecore colpite dalla scrapie5. Sebbene in precedenza siano stati proposti criteri clinici per aiutare l'individuazione della scrapienegli ovini 2, questi riguardavano solo l'individuazione della scrapie classica e prendevano in considerazione la storia clinica, che potrebbe non essere disponibile se gli animali vengono presentati in un mattatoio.
L'attuale protocollo consente lo screening di molti animali per i segni di scrapie in un breve periodo di tempo. Inoltre, il protocollo d'esame può essere applicato a studi sperimentali sulla scrapie negli ovini e nei caprini per monitorare l'insorgenza clinica, la progressione e il punto finale. Tuttavia, non sostituisce un esame fisico e neurologico più dettagliato con un'adeguata registrazione della casistica clinica, eventualmente seguita da esami diagnostici accessori (esame del sangue e del liquido cerebrospinale; tecniche di imaging più sofisticate, se del caso), che possono essere necessarie successivamente per escludere varie altre condizioni in piccoli ruminanti che presentano segni simili , come malattie neurologiche metaboliche o infiammatorie, ascessi cerebrali o tumori.
Sebbene un esame clinico sia generalmente meno sensibile nell'individuazione degli animali affetti da TSE rispetto ai test post mortem basati sull'individuazione della proteina prione2,11, in particolare in una fase precoce del periodo di incubazione, questo è attualmente l'unico metodo di rilevamento negli animali vivi e più rilevante per quei paesi che non hanno un sistema di sorveglianza mirato per identificare i piccoli ruminanti colpiti dalle TSE.

La scrapie è un'encefalopatia spongiforme trasmissibile (EST) di ovini e caprini, che appartiene al gruppo dei disturbi da errata delle proteine, come l'encefalopatia spongiforme bovina (BSE) nei bovini, la malattia cronica da sprecare nei cervi e il morbo di Creutzfeldt-Jakob nell'uomo. La diagnosi viene fatta post mortem rilevando la forma anomala della proteina prione, che è resistente alle proteinasi, di solito nel cervello. Si possono distinguere due grandi forme di scrapie presenti in natura, che sono epidemiologicamente, patologicamente e biochimicamente diverse: scrapie classica e scrapie atipica. Inoltre, una malattia neurologica con segni clinici classici simili alla scrapie può essere indotta negli ovini e nei caprini da un'infezione sperimentalecon l'agente dell'ESB 6,10-11. In effetti, l'ESB presente in natura è stata diagnosticata nelle capre3,17. Il controllo della scrapie classica (e dell'ESB negli ovini se si è verificata naturalmente) è stato ottenuto mediante allevamento per una resistenza genetica mirata al gene delle proteine prioniche, ma ciò è più difficile per la scrapie atipica, che si ritiene sia una malattia sporadica ed è stata diagnosticata in paesi considerati esenti dalla scrapie classica, ad esempio la Nuova Zelanda7.
La scrapie è una malattia neurologica di pecore e capre adulte che porta a cambiamenti nel comportamento, nella sensazione e nel movimento, ma la malattia è lentamente progressiva e i segni clinici spesso non sono riconosciuti perché il custode o il veterinario potrebbe non avere familiarità con i segni clinici o la scrapie non è affatto considerata nella diagnosi differenziale delle malattie neurologiche nei piccoli ruminanti.
Il protocollo d'esame proposto è stato concepito per aiutare nella diagnosi clinica della scrapie con due scopi in mente: dovrebbe essere considerevolmente breve consentire la scansione di molti animali in un breve periodo di tempo, ma abbastanza specifico da consentire l'individuazione di animali colpiti da scrapie, che si ottiene valutando la presenza di segni clinici frequentemente riscontrati negli animali colpiti dalla scrapie. Questo protocollo è una leggera modifica rispetto a quello utilizzato per monitorare le capre alla ricerca di segni di scrapieclassica 11 e include la benda dell'animale, che può esacerbare i segni clinici non normalmente associati alla scrapie9.

clinical examination protocol to detect atypical and classical scrapie in sheep

La diagnosi di scrapie, un'encefalopatia spongiforme trasmissibile (EST) di ovini e caprini, si basa attualmente sull'individuazione di proteine prionali associate alla malattia mediante test post mortem. A meno che un campione casuale della popolazione ovina o caprina non sia attivamente monitorato per la scrapie, l'identificazione dei casi di scrapie si basa sulla segnalazione di sospetti clinici, che dipende dalla familiarizzazione dell'individuo con la malattia e dalla capacità di riconoscere i segni clinici associati alla scrapie. La scrapie non può essere considerata nella diagnosi differenziale delle malattie neurologiche nei piccoli ruminanti, in particolare nei paesi a bassa prevalenza di scrapie, o non riconosciuta se si presenta come forma nonpruritica come la scrapie atipica. Per aiutare nell'identificazione degli indagati clinici, viene presentato un breve protocollo di esame per valutare la visualizzazione di segni clinici specifici associati a forme pruriginotiche e nonprurito di TSE negli ovini, che potrebbero essere applicati anche alle capre. Ciò include la valutazione del comportamento, della visione (testando la risposta della minaccia), del prurito (testando la risposta ai graffi) e del movimento (con e senza benda). Ciò può portare a un esame neurologico più dettagliato della segnalazione degli animali come sospetti scrapie. Potrebbe anche essere utilizzato in studi sperimentali sulle TSE su ovini o caprini per valutare la progressione della malattia o per identificare il punto finale clinico.

Pecore clinicamente sane. Sondaggio Dorset wether da un gregge senza scrapie intracerebrally inoculato con cervello bovino di origine neozelandese ed esaminato a 49 mesi dopo l'inoculazione. Questa pecora ha una postura normale, si comporta normalmente, mostra una normale risposta di minaccia (Figura 1), non reagisce al test dei graffi, ha un pile intatto e un'ottima condizione corporea. È clinicamente insignificante quando bendata e non mostra segni di un disturbo del movimento.
Ovini scrapie atipici che presentano la forma nonpruritica delle TSE negli ovini. Cheviot wether da un gregge privo di scrapie intracerebrally inoculato con omogeneato cerebrale da un caso di campo scrapie atipico dello stesso genotipo di proteina prione (AHQ/AHQ) ed esaminato a 36 mesi dopo l'inoculazione. Questa pecora ha anche una postura normale ma si comporta in modo diverso dalle altre pecore nella penna e gira in senso orario. Non lampeggia quando viene testata la risposta di minaccia. Graffiare non suscita alcuna risposta e nessun cambiamento di pile è evidente, ma le condizioni del corpo sono solo giuste. Gira in senso orario quando è bendato (Figura 2) e perde equilibrio. L'andatura è atassica e un bel tremore alla testa è visibile.
Ovini atipici dell'ESB che presentano la forma pruritica delle TSE negli ovini, che è clinicamente simile alla presentazione clinica degli ovini classici colpiti dalla scrapie. Per questo motivo, un classico caso di scrapie non è incluso. Sondaggio Dorset wether da un gregge privo di scrapie intracerebrally inoculato con omogeneato cerebrale bovino atipico (tipo L) BSE ed esaminato a 50 mesi dopo l'inoculazione. Questa pecora è leggermente curva, tende a mantenere gli arti posteriori a base larga e cade sul pavimento quando viene catturata. La risposta della minaccia è debole. Graffiare varie aree della schiena provoca movimenti della testa o delle labbra (Figura 3), e c'è perdita di lana con un piccolo trauma cutaneo sul sondaggio. Le condizioni del corpo sono buone. Quando è bendato, è riluttante a muoversi e poggia la sua parte posteriore sull'ostacolo per mantenere l'equilibrio. La pecora è atassica e mostra ipermetria dell'arto anteriori.
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1.jpg"> Figura 1. Test di risposta alla minaccia. Un gesto minaccioso verso l'occhio dell'animale induce una risposta lampeggiante. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare l'immagine più grande.</a>
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2.jpg"> Figura 2. Bendaggio. Girando in senso orario suscitato bendando le pecore con un cappuccio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare l'immagine più grande.</a>
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3.jpg"> Figura 3. Test della risposta graffiante. Graffiare la parte posteriore provoca leccare le labbra con movimenti laterali della testa Fare clic qui <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" target="_blank">per visualizzare un'immagine più grande.</a>

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Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

Viene presentato un breve protocollo di esame clinico per aiutare nell'individuazione della scrapie classica e atipica negli ovini e nei caprini.

Protocollo di esame clinico per rilevare la scrapie atipica e classica negli ovini

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

clinical-examination-protocol-to-detect-atypical-classical-scrapie

Research

JoVE Journal

Medicine

12.8K Views.  Animal Health and Veterinary Laboratories Agency Weybridge. Viene presentato un breve protocollo di esame clinico per aiutare nell'individuazione della scrapie classica e atipica negli ovini e nei caprini.

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Using Visual and Narrative Methods to Achieve Fair Process in Clinical Care

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is respect for patient's values, preferences, and expressed needs. Yet specific approaches to gaining this understanding and translating it to quality care in the clinical setting are lacking. From a patient perspective quality is not a simple concept but is best understood in terms of five dimensions: technical outcomes; decision-making efficiency; amenities and convenience; information and emotional support; and overall patient satisfaction. Failure to consider quality from this five-pronged perspective results in a focus on medical outcomes, without considering the processes central to quality from the patient's perspective and vital to achieving good outcomes. In this paper, we argue for applying the concept of fair process in clinical settings. Fair process involves using a collaborative approach to exploring diagnostic issues and treatments with patients, explaining the rationale for decisions, setting expectations about roles and responsibilities, and implementing a core plan and ongoing evaluation. Fair process opens the door to bringing patient expertise into the clinical setting and the work of developing health care goals and strategies. This paper provides a step by step illustration of an innovative visual approach, called photovoice or photo-elicitation, to achieve fair process in clinical work with acquired brain injury survivors and others living with chronic health conditions. Applying this visual tool and methodology in the clinical setting will enhance patient-provider communication; engage patients as partners in identifying challenges, strengths, goals, and strategies; and support evaluation of progress over time. Asking patients to bring visuals of their lives into the clinical interaction can help to illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships with patients living with chronic conditions such as brain injury, and identify patient-centered goals and possibilities for healing. The process illustrated here can be used by clinicians, (primary care physicians, rehabilitation therapists, neurologists, neuropsychologists, psychologists, and others) working with people living with chronic conditions such as acquired brain injury, mental illness, physical disabilities, HIV/AIDS, substance abuse, or post-traumatic stress, and by leaders of support groups for the types of patients described above and their family members or caregivers.

This paper illustrates an innovative visual approach (photovoice or photo-elicitation) to achieve fair process in clinical care for patients living with chronic health conditions, illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships, and identify patient-centered goals and possibilities for healing.

Utilizzo dei metodi visivi e narrativi a Raggiungere processo equo in Clinical Care

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Electroencephalography (EEG) is an effective, efficient, and noninvasive method of assessing and recording brain activity. Given the excellent temporal ...

A Neuroscientific Approach to the Examination of Concussions in Student-Athletes

Concussions are occurring at alarming rates in the United States and have become a serious public health concern. The CDC estimates that 1.6 to 3.8 million concussions occur in sports and recreational activities annually. Concussion as defined by the 2013 Concussion Consensus Statement &#8220;may be caused either by a direct blow to the head, face, neck or elsewhere on the body with an &#8216;impulsive&#8217; force transmitted to the head.&#8221; Concussions leave the individual with both short- and long-term effects. The short-term effects of sport related concussions may include changes in playing ability, confusion, memory disturbance, the loss of consciousness, slowing of reaction time, loss of coordination, headaches, dizziness, vomiting, changes in sleep patterns and mood changes. These symptoms typically resolve in a matter of days. However, while some individuals recover from a single concussion rather quickly, many experience lingering effects that can last for weeks or months. The factors related to concussion susceptibility and the subsequent recovery times are not well known or understood at this time. Several factors have been suggested and they include the individual&#8217;s concussion history, the severity of the initial injury, history of migraines, history of learning disabilities, history of psychiatric comorbidities, and possibly, genetic factors. Many studies have individually investigated certain factors both the short-term and long-term effects of concussions, recovery time course, susceptibility and recovery. What has not been clearly established is an effective multifaceted approach to concussion evaluation that would yield valuable information related to the etiology, functional changes, and recovery. The purpose of this manuscript is to show one such multifaceted approached which examines concussions using computerized neurocognitive testing, event related potentials, somatosensory perceptual responses, balance assessment, gait assessment and genetic testing.

There is great variability in an individual&#8217;s risk for concussion and their corresponding recovery. A multifaceted approach to concussion evaluation is warranted; including baseline testing of athletes before participation in sport and timely evaluation post injury. The goal of this protocol is to provide an appropriate multifaceted approach to examine concussions.

Un approccio neuroscientifica all&#39;esame di traumi in studenti-atleti

Concussions are occurring at alarming rates in the United States and have become a serious public health concern. The CDC estimates that 1.6 to 3.8 ...

Diagnosis of Musculus Gastrocnemius Tightness - Key Factors for the Clinical Examination

Common foot and ankle pathologies have been linked to isolated Musculus gastrocnemius tightness (MGT). Various examination techniques have been described to assess MGT. Still, a standardized examination procedure is missing. Literature argues for weightbearing examination but the degree of knee flexion needed to eliminate the restraining effect of the M. gastrocnemius on ankle dorsiflexion (ADF) is unknown. This manuscript investigates the effect of knee flexion on ankle dorsiflexion and provides a detailed description of a standardized examination protocol. Examination on 20 healthy individuals revealed, that 20&#176; of knee flexion is sufficient to fully eliminate the influence of the M. gastrocnemius on ADF. This builds the prerequisite for a standardized examination for MGT. Non-weightbearing and weightbearing examination of ADF has to be conducted with the knee fully extended and at least 20&#176; flexed. Two investigators should conduct non-weightbearing testing with the subject in supine position. In order to obtain reliable results, the axis of the fibula should be marked. One examiner can conduct weightbearing examination with the subject in lunge stance. Isolated MGT is present if ADF is impaired with the knee fully extended and knee flexion results in a significant ADF increase. The herein presented standardized examination is the prerequisite for future studies aiming at establishing norm values.

Diagnosis of Musculus Gastrocnemius Tightness - Key Factors for the Clinical Examination

Isolated Musculus gastrocnemius tightness is a common cause for foot and ankle pathologies. Currently no standardized examination procedure exists. This manuscript demonstrates that 20 degree of knee flexion eliminates the restraining effect of the M. gastrocnemius on ankle dorsiflexion and presents a video description of a standardized examination protocol.

La diagnosi di<em&gt; Muscolo gastrocnemio</em&gt; Tenuta - fattori chiave per l&#39;esame clinico

Common foot and ankle pathologies have been linked to isolated Musculus gastrocnemius tightness (MGT). Various examination techniques have been described ...

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed in mice is high. Phenotypic characterization of these mouse models also requires the examination of cardiac function and morphology. Echocardiography and magnetic resonance imaging (MRI) are commonly used approaches to characterize cardiac function and morphology in mice. Echocardiographic and MRI equipment specialized for use in small rodents is&#160;expensive and requires a dedicated space. This protocol describes cardiac measurements in mice using a clinical echocardiographic system with a 15 MHz human vascular probe. Measurements are performed on anesthetized adult mice. At least three image sequences are recorded and analyzed for each animal in M-mode in the parasternal short-axis view. Afterwards, cardiac histological examination is performed, and cardiomyocyte diameters are determined on hematoxylin-eosin- or wheat germ agglutinin (WGA)-stained paraffin sections. Vessel density is determined morphometrically after Pecam-1 immunostaining. The protocol has been applied successfully to pharmacological studies and different genetic animal models under baseline conditions, as well as after experimental myocardial infarction by the permanent ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD). In our experience, echocardiographic investigation is limited to anesthetized animals and is feasible in adult mice weighing at least 25 g.

Echocardiographic examination is frequently used in mice. Expensive high-resolution ultrasound devices have been developed for this purpose. This protocol describes an affordable echocardiographic procedure combined with histological morphometric analyses to determine cardiac morphology.

Esame ecocardiografico ed istologico della morfologia cardiaca nel topo

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ~6.5M people and cost ~$40B/year in the US alone. Although a significant effort has been invested in understanding how chronic wounds develop in humans, fundamental questions remain unanswered. Recently, we developed a novel mouse model for diabetic chronic wounds that have many characteristics of human chronic wounds. Using db/db-/- mice, we can generate chronic wounds by inducing high levels of oxidative stress (OS) in the wound tissue immediately after wounding, using a one-time treatment with inhibitors specific to the antioxidant enzymes catalase and glutathione peroxidase. These wounds have high levels of OS, develop biofilm naturally, become fully chronic within 20 days after treatment and can remain open more for more than 60 days. This novel model has many features of diabetic chronic wounds in humans and therefore can contribute significantly to advancing fundamental understanding of how wounds become chronic. This is a major breakthrough because chronic wounds in humans cause significant pain and distress to patients and result in amputation if unresolved. Moreover, these wounds are very expensive and time-consuming to treat, and lead to significant loss of personal income to patients. Advancements in this field of study through the use of our chronic wound model can significantly improve health care for millions who suffer under this debilitating condition. In this protocol, we describe in great detail the procedure to cause acute wounds to become chronic, which has not been done before.

Chronic wounds are developed from acute wounds on a diabetic mouse model by inducing high levels of oxidative stress after a full-thickness cutaneous wound. The wound is treated with inhibitors for catalase and glutathione peroxidase, resulting in impaired healing and biofilm development by bacteria present in the skin microbiome.

Protocollo per creare ferite croniche nei topi diabetici

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based three-chamber bags (3CBs) and soybean-oil-based compounded bags (CoBs) in hospitalized adult patients. We designed a multicenter, randomized, prospective, open-label, noninferiority protocol to compare the efficacy, safety, and distribution of olive-oil-based 3CBs and soybean-oil-based CoB formulations in adult Chinese patients requiring PN during surgical intervention. Subjects were randomized to receive either one of the study treatments using an interactive voice or web-based recognition system in accordance with the randomization code. Randomization was further stratified based on the study site and surgical category. Both treatment groups received similar amounts of calories and protein. In addition, the two study treatments contained a similar composition of the amino-acid component. The only difference between the two PN formulations was the lipid constitution. The duration of administration of study treatments was a minimum of 5 days up to a maximum of 14 days after the surgical procedure. The primary efficacy endpoint was serum prealbumin levels on day 5 of the study. Noninferiority was proved if the anti-log of the lower bound of the 95% confidence interval (CI) of the treatment difference was at least 0.80. Other efficacy measures included treatment preparation time; duration to achieve tolerability of oral nutrition; associated infectious complications; length of hospitalization; and laboratory assessment of markers of nutrition, inflammation, metabolism, and oxidative stress. A total of 458 patients were enrolled in the study. The results showed that olive-oil-based 3CBs were non-inferior to soybean-based CoBs, besides being well tolerated. The infection rate was found to be significantly lower in the olive-oil-based 3CB group. Thus, this study may be used as a reference for future research on lipid emulsion and 3CBs.

Here, we present a protocol for a study comparing the efficacy, safety, and delivery of olive-oil-based 3CB and soybean-oil-based CoB formulations in adults requiring parenteral nutrition. The results revealed that olive-oil-based 3CBs is non-inferior and well tolerated compared to soybean formulations.

Uno studio clinico che valuta la sicurezza, l'efficacia e la consegna di sacchetti a tre camere a base di olio d'oliva per la nutrizione parenterale

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Observational Study Protocol for Repeated Clinical Examination and Critical Care Ultrasonography Within the Simple Intensive Care Studies

Longitudinal evaluations of critically ill patients by combinations of clinical examination, biochemical analysis and critical care ultrasonography (CCUS) may detect adverse events of interventions such as fluid overload at an early stage. The Simple Intensive Care Studies (SICS) is a research line that focuses on the prognostic and diagnostic value of combinations of clinical variables.
The SICS-I specifically focused on the use of clinical variables obtained within 24 h of acute admission for prediction of cardiac output (CO) and mortality. Its sequel, SICS-II, focuses on repeated evaluations during ICU admission. The first clinical examination by trained researchers is performed within 3 h after admission consisting of physical examination and educated guessing. The second clinical examination is performed within 24 h after admission and includes physical examination and educated guessing, biochemical analysis and CCUS assessments of heart, lungs, inferior vena cava (IVC) and kidney. This evaluation is repeated at days 3 and 5 after admission. CCUS images are validated by an independent expert, and all data is registered in an online secured database. Follow-up at 90 days includes registration of complications and survival status according to patient&#39;s medical charts and the municipal person registry. The primary focus of SICS-II is the association between venous congestion and organ dysfunction.
The purpose of publishing this protocol is to provide details on the structure and methods of this on-going prospective observational cohort study allowing answering multiple research questions. The design of the data collection of combined clinical examination and CCUS assessments in critically ill patients are explicated. The SICS-II is open for other centers to participate and is open for other research questions that can be answered with our data.

<meta charset="utf8"></head><body>Protocollo di studio osservazionale per l'esame clinico ripetuto e l'ecografia in terapia intensiva all'interno di semplici studi di terapia intensiva

Structured protocols are necessary to provide answers on research questions in critically ill patients. The Simple Intensive Care Studies (SICS) provides an infrastructure for repeated measurements in critically ill patients including clinical examination, biochemical analysis and ultrasonography. SICS projects have specific focus but the structure is flexible to other investigations.

Protocollo di studio osservazionale per l'esame clinico ripetuto e l'ecografia in terapia intensiva all'interno di semplici studi di terapia intensiva

Longitudinal evaluations of critically ill patients by combinations of clinical examination, biochemical analysis and critical care ultrasonography (CCUS) ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Esame ecocardiografico transtoracico nel modello del coniglio

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...