Questo lavoro è stato supportato dal National Institutes of Allergy e malattie infettive Concedere P01 A1078894 a CAG

<ol>
	<li>Nathan, C., Ding, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonresolving+Inflammation.">Nonresolving Inflammation.</a> Cell. 140 (6), 871-882 (2010).</li><li>Karin, M., Lawrence, T., Nizet, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immunity+gone+awry:+linking+microbial+infections+to+chronic+inflammation+and.">Innate immunity gone awry: linking microbial infections to chronic inflammation and.</a> 124, 823-835 (2006).</li><li>Connor, S. M., Taylor, C. E., Hughes, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+infectious+determinants+of+chronic+diseases.">Emerging infectious determinants of chronic diseases.</a> Emerging Infectious Diseases. 12 (7), 1051-1057 (2006).</li><li>Barth, K., Remick, D. G., Genco, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+immune+regulation+by+microbial+pathogens+and+resulting+chronic+inflammation.">Disruption of immune regulation by microbial pathogens and resulting chronic inflammation.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2012).</li><li>Hayashi, C., Gudino, C. V., Gibson, F. C., Genco, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review:+Pathogen-induced+inflammation+at+sites+distant+from+oral+infection:+bacterial+persistence+and+induction+of+cell-specific+innate+immune+inflammatory+pathways.">Review: Pathogen-induced inflammation at sites distant from oral infection: bacterial persistence and induction of cell-specific innate immune inflammatory pathways.</a> Molecular Oral Microbiology. 25 (5), 305-316 (2010).</li><li>Gibson, F. C., Ukai, T., Genco, C. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+antibody+response+to+oral+infection+precedes+but+does+not+prevent+Porphyromonas+gingivalis-induced+alveolar+bone+loss+in+mice.">Serum antibody response to oral infection precedes but does not prevent Porphyromonas gingivalis-induced alveolar bone loss in mice.</a> Oral Microbiology and Immunology. 14 (3), 194-196 (1999).</li><li>Gibson, F. C., Hong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immune+recognition+of+invasive+bacteria+accelerates+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Innate immune recognition of invasive bacteria accelerates atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Circulation. 109 (22), 2801-2806 (2004).</li><li>Hayashi, C., Viereck, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porphyromonas+gingivalis+accelerates+inflammatory+atherosclerosis+in+the+innominate+artery+of+ApoE+deficient+mice.">Porphyromonas gingivalis accelerates inflammatory atherosclerosis in the innominate artery of ApoE deficient mice.</a> Atherosclerosis. 215 (1), 52-59 (2011).</li><li>Hayashi, C., Madrigal, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen-mediated+inflammatory+atherosclerosis+is+mediated+in+part+via+Toll-like+receptor+2-induced+inflammatory+responses.">Pathogen-mediated inflammatory atherosclerosis is mediated in part via Toll-like receptor 2-induced inflammatory responses.</a> Journal of Innate Immunity. 2 (4), 334-343 (2010).</li><li>Hayashi, C., Papadopoulos, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+for+TLR4+signaling+in+atherosclerosis+progression+as+revealed+by+infection+with+a+common+oral+pathogen.">Protective role for TLR4 signaling in atherosclerosis progression as revealed by infection with a common oral pathogen.</a> Journal of Immunology (Baltimore, Md.: 1950). 189 (7), 3681-3688 (2012).</li><li>Papadopoulos, G., Weinberg, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage-Specific+TLR2+Signaling+Mediates+Pathogen-Induced+TNF-Dependent+Inflammatory+Oral+Bone+Loss.">Macrophage-Specific TLR2 Signaling Mediates Pathogen-Induced TNF-Dependent Inflammatory Oral Bone Loss.</a> The Journal of Immunology. , (2012).</li><li>Gibson, F. C., Hong , C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immune+recognition+of+invasive+bacteria+accelerates+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Innate immune recognition of invasive bacteria accelerates atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Circulation. 109 (22), 2801-2806 (2004).</li><li>Miyamoto, T., Yumoto, H., Takahashi, Y., Davey, M., Gibson, F. C., Genco, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen-accelerated+atherosclerosis+occurs+early+after+exposure+and+can+be+prevented+via+immunization.">Pathogen-accelerated atherosclerosis occurs early after exposure and can be prevented via immunization.</a> Infection and Immunity. 74 (2), 1376-1380 (2006).</li><li>Baker, P. J., Dixon, M., Roopenian, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+susceptibility+to+Porphyromonas+gingivalis-induced+alveolar+bone+loss+in+mice.">Genetic control of susceptibility to Porphyromonas gingivalis-induced alveolar bone loss in mice.</a> Infection and Immunity. 68 (10), 5864-5868 (2000).</li><li>Baker, P. J., Dixon, M., Evans, R. T., Roopenian, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+Porphyromonas+gingivalis+strains+in+the+induction+of+alveolar+bone+loss+in+mice.">Heterogeneity of Porphyromonas gingivalis strains in the induction of alveolar bone loss in mice.</a> Oral Microbiology and Immunology. 15 (1), 27-32 (2000).</li><li>Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+atherosclerosis.">Mouse models of atherosclerosis.</a> The American Journal of the Medical Sciences. 323 (1), 3-10 (2002).</li><li>Weinreb, D. B., Aguinaldo, J. G. S., Feig, J. E., Fisher, E. A., Fayad, Z. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+MRI+of+mouse+models+of+atherosclerosis.">Non-invasive MRI of mouse models of atherosclerosis.</a> NMR in Biomedicine. 20 (3), 256-264 (2007).</li></ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.

Il P. gingivalis modello di infezione orale fornisce un valido strumento per lo studio del patogeno-indotta infiammazione cronica nei siti locali e sistemiche. Questo modello unico permette la caratterizzazione di entrambi i meccanismi specifici di accoglienza e patogeni che contribuiscono a infiammazione cronica e immunopatologia. Inoltre, il modello può essere usato per individuare nuove strategie terapeutiche, comprese le vaccinazioni e intervento farmacologico. La procedura descritta in questo protocollo d...

L&#39;infiammazione cronica è una delle principali cause di danni ai tessuti patologici e una caratteristica unificante di molte malattie croniche negli esseri umani. Queste malattie includono neoplastiche, autoimmuni e malattie infiammatorie croniche 1. L&#39;eziologia di molte malattie croniche è ancora chiaro, ma è inteso come complesso e multifattoriale, che coinvolge sia la predisposizione genetica e l&#39;introduzione di fattori ambientali. Mentre i continuatori di infiammazione rimangono elusivi, i profili cellulari e molecolari di attivazione immunitaria si sovrappongono considerevolmente con quei modelli osservati in risposta dell&#39;ospite ai patogeni 2. Prove di montaggio implica infezione da agenti patogeni microbici nello sviluppo e progressione di infiammazione cronica e le sue diverse manifestazioni cliniche 2,3. Gli agenti patogeni possono indurre e sostenere l&#39;infiammazione cronica direttamente dal sovvertire il sistema immunitario dell&#39;ospite e infezioni persistenti <sup&gt; 4. In assenza di persistenza batterica, infezione può precipitare infiammazione cronica da reazioni autoimmuni innescati da mimetismo molecolare di auto-antigeni, cambiamenti di auto-antigeni che li rendono immunogenico, o danni che rilascia antigeni ospitanti precedentemente mascherati. Raramente però hanno patogeni specifici state identificate come la causa universale di una particolare malattia cronica. Piuttosto, la maggior parte dei dati disponibili suggeriscono che i patogeni usano meccanismi distinti per suscitare l&#39;infiammazione cronica con un ampio spettro di manifestazioni cliniche e gli esiti della malattia in soggetti geneticamente suscettibili 3. Così, una comprensione dettagliata dei meccanismi attraverso i quali patogeni specifici indurre l&#39;infiammazione cronica può avere importanti implicazioni per la salute pubblica, nonché il trattamento e la prevenzione di molte malattie croniche. Anche se gli ospiti e patogeni meccanismi specifici che contribuiscono alla preparazione e alla manutenzione di infiammazione cronica sonopoco conosciuti, i progressi nella modellazione di patogeno-indotta infiammazione cronica hanno iniziato ad approfondire la nostra comprensione di questi processi. Il P. gingivalis modello di infezione orale è un unico, modello ben caratterizzato topo di infiammazione cronica patogeno-indotta che permette l&#39;analisi di host e di patogeni meccanismi specifici che contribuiscono a infiammazione cronica a livello locale (perdita di tessuto osseo orale) e siti sistemiche (aterosclerosi) 5,6. P. gingivalis è un agente patogeno orale anaerobi Gram-negativi implicati nella malattia parodontale umano, una malattia infiammatoria cronica infezione-driven caratterizzata dalla distruzione di tessuti di sostegno del dente 7. Oltre alla patologia nel sito iniziale di infezione, prove accumulando implica P. gingivalis indotta infiammazione cronica nello sviluppo e nella progressione delle malattie sistemiche, tra cui l&#39;aterosclerosi 5, una malattia caratterizzata da inflammatio cronican della parete del vaso arterioso. Infezione orale di specifico patogeno topi gratuito con P. gingivalis induce una risposta infiammatoria locale che si traduce in distruzione del dente di sostegno dell&#39;osso alveolare 8. P. gingivalis può essere recuperato dalla bocca di topi infetti fino a 42 giorni dopo l&#39;infezione 8 e topi sviluppano elevati livelli di titoli anticorpali sierici specifici dell&#39;agente patogeno e 9. In un modello murino di aterosclerosi stabilita utilizzando Apolipoproteina-E - / - mice (ApoE - / -), l&#39;infezione orale con P. gingivalis induce infiammazione cronica infiammatoria che spinge la placca deposizione all&#39;interno del seno aortico 10 e l&#39;arteria innominata 11. Infiammazione progressiva all&#39;interno dell&#39;arteria innominata di P. gingivalis -infected topi possono essere monitorati in animali vivi in vivo utilizzando la risonanza magnetica. Istologico, le lesioni arteriose da P. gingivalis -infected topi mostrano una maggiore accumulo di lipidi accompagnato da attivazione dell&#39;endotelio vascolare, un aumento infiltrato di cellule immunitarie, ed elevata espressione di mediatori infiammatori 12. L&#39;uso di questo modello in topi knockout ha chiarito il ruolo di componenti di segnalazione ospitanti e mediatori infiammatori, così come la cella interazioni specifiche che guidano P. gingivalis indotta immunopatologia 12 - 14. Inoltre, esperimenti utilizzando mutanti batterici definiti hanno individuato P. critico gingivalis virulenza fattori che contribuiscono a infiammazione cronica nei siti locali e sistemiche 15. Questo articolo descrive le metodologie per la valutazione di P. gingivalis indotta infiammazione cronica nei siti locali e sistemiche. Forniamo un protocollo dettagliato per l&#39;analisi di perdita di osso alveolare da microCT utilizzando il software Amira. Inoltre, definiamo l&#39;utilità di serie in vivo vivo MRI animale per la valutazione della progressivainfiammazione all&#39;interno della arteria anonima. Includiamo metodologie per la visualizzazione e la quantificazione della placca infiammatoria nelle lesioni arteriose, e descriviamo la loro caratterizzazione istologica. L&#39;uso di topi transgenici e mutanti batterici definiti rende questo modello particolarmente adatto per l&#39;identificazione sia host e fattori microbici coinvolti nella iniziazione, progressione, e l&#39;esito della malattia. Inoltre, il modello può essere usato per individuare nuove strategie terapeutiche, tra cui la vaccinazione e di intervento farmacologico.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="924">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:508px;">Name of the Material/Eqiupment</td>
			<td style="width:196px;">Company</td>
			<td style="width:132px;">Catalogue Number</td>
			<td style="width:88px;">Comments&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amira analysis software</td>
			<td>Visualization Sciences Group</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anaerobic chamber DW Scientific Model MG500&#160;</td>
			<td>Microbiology International</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BHI&#160;</td>
			<td>Becton-Dickinson&#160;</td>
			<td>211059</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hemin&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>51280-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Menadione (Vitamin K)</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;&#160;</td>
			<td>M5625-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Yeast Extract</td>
			<td>Becton-Dickinson&#160;</td>
			<td>212750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carboxymethyl cellulose (medium viscocity)&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>C-4888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sulfamethoxazole and Trimethoprim Oral Suspension 200 mg/40 mg per 5ml</td>
			<td>Hi-Tech Pharmacal</td>
			<td>NDC 50383-823-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#956;CT 40&#160;</td>
			<td>Scanco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HistoChoice Tissue Fixative</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>H2904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sudan IV</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>S4261-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">vertical-bore 11.7T Avance spectrometer&#160;</td>
			<td>Bruker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paravision</td>
			<td>Paravision</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ImageJ</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">rat anti-mouse F4/80</td>
			<td>Serotec</td>
			<td>MCA497R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">rat anti-mouse TLR2</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>13-9021-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Leica S4 Dissecting Scope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microm HM 550 Cryostat</td>
			<td>Microm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model for pathogen-induced chronic inflammation at local and systemic sites

L&#39;infiammazione cronica è una delle principali cause di danni ai tessuti patologici e una caratteristica unificante di molte malattie croniche negli esseri umani compresi neoplastiche, autoimmuni e malattie infiammatorie croniche. Emergenti evidenze implica patogeno-indotta infiammazione cronica nello sviluppo e nella progressione delle malattie croniche con una grande varietà di manifestazioni cliniche. A causa della eziologia complessa e multifattoriale di malattia cronica, la progettazione di esperimenti per la prova della causalità e la creazione di legami meccanicistici è quasi impossibile negli esseri umani. Un vantaggio di utilizzare modelli animali è che entrambi i fattori genetici e ambientali che possono influenzare il decorso di una malattia particolare possono essere controllati. Pertanto, la progettazione di modelli animali rilevanti di infezione rappresenta un passo fondamentale nell&#39;identificazione di accoglienza e patogeni meccanismi specifici che contribuiscono a infiammazione cronica. Qui si descrive un modello murino di patogeno-indotta INFLA cronicammation a siti locali e sistemici dopo l&#39;infezione con il patogeno orale Porphyromonas gingivalis, un batterio strettamente associato alla malattia parodontale umano. Infezione orale di specifico patogeno topi libero induce una risposta infiammatoria locale con conseguente distruzione del dente di sostegno dell&#39;osso alveolare, un segno distintivo della malattia parodontale. In un modello murino di aterosclerosi consolidata, infezione da P. gingivalis accelera infiammatorio deposizione di placche all&#39;interno del seno aortico e dell&#39;arteria innominata, accompagnata dalla attivazione dell&#39;endotelio vascolare, un aumento infiltrato di cellule immunitarie, ed elevata espressione di mediatori infiammatori all&#39;interno lesioni. Siamo dettaglio le metodologie per la valutazione di infiammazione nei siti locali e sistemiche. L&#39;uso di topi transgenici e mutanti batterici definiti rende questo modello particolarmente adatto per l&#39;identificazione sia host e fattori microbici coinvolti nella iniziazione, progressione, e l&#39;esito della malattia. Additionally, il modello può essere usato per individuare nuove strategie terapeutiche, tra cui la vaccinazione e di intervento farmacologico.

Utilizzando il modello murino appropriato e regime di infezione orale, P. gingivalis induce infiammazione cronica e immunopatologia a livello locale (cavità orale) e siti sistemici (arterie) (Figura 1). Nei topi, l&#39;infezione orale con P. gingivalis induce una risposta infiammatoria locale che guida la distruzione del dente di sostegno dell&#39;osso alveolare 8. P. gingivalis -infected topi sviluppano siero risposte anticorpali a que...

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A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

Modelli animali hanno dimostrato di essere strumenti preziosi nella definizione di accoglienza e patogeni meccanismi specifici che contribuiscono allo sviluppo di infiammazione cronica. Qui si descrive un modello murino di infezione orale con il patogeno umano Porphyromonas gingivalis e le metodologie di dettaglio per valutare la progressione di infiammazione nei siti locali e sistemiche.

Un modello di topo per patogeni indotta infiammazione cronica a siti locali e sistemici

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

a-mouse-model-for-pathogen-induced-chronic-inflammation-at-local

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

17.4K Views.  Boston University School of Medicine.  Modelli animali hanno dimostrato di essere strumenti preziosi nella definizione di accoglienza e patogeni meccanismi specifici che contribuiscono allo sviluppo di infiammazione cronica. Qui si descrive un modello murino di infezione orale con il patogeno umano Porphyromonas gingivalis e le metodologie di dettaglio per valutare la progressione di infiammazione nei siti locali e sistemiche. 