Il rigurgito mitralico è una malattia valvolare comune che porta all'insufficienza cardiaca. Questo modello di MR di ratto può aiutare a promuovere la nostra comprensione dei meccanismi sottostanti dell'insufficienza cardiaca. Questo modello può essere utilizzato per indurre la TM in un cuore pulsante imitando l'emodinamica osservata nei pazienti con questa lesione valvolare e rendendo questo modello clinicamente rilevante.
L'esperienza di microchirurgia e gestione aiuterà a replicare questo protocollo e la familiarità con l'imaging ecocardiografico e l'interpretazione delle immagini sono aspetti chiave per un corretto posizionamento degli aghi. Poiché si tratta di una tecnica guidata dall'immagine, la dimostrazione visiva dei metodi può aiutare a comprendere la procedura. Dopo aver eseguito una toracotomia sinistra secondo i protocolli standard in un ratto Sprague-Dawley adulto anestetizzato da 350 a 400 grammi, utilizzare una sutura PROLENE 6-0 e un supporto per microneedle per posizionare una sutura astringa sull'apice del ventricolo sinistro.
Legare delicatamente la sutura apicale per stabilizzare l'apice e inserire un ago calibro 23 lavato con soluzione salina e con un tapbo all'estremità distale al centro della sutura del cordoncino della borsa e nella cavità ventricolare sinistra. Usando una mano per guidare stabilmente l'ago, utilizzare l'altra mano per manipolare contemporaneamente la sonda eco transesofagea per ottenere una vista eco ottimale per visualizzare l'ago. Utilizzando la guida ecografico in tempo reale, far avanzare l'ago verso il lato ventricolare del foglio strale anteriore.
Una volta confermata la posizione dell'ago, far avanzare l'ago in un movimento fine attraverso il foglio illustrativo della valvola. Una volta attraverso il foglio illustrativo, ritrarre l'ago nella camera ventricolare sinistra lontano dalla valvola mitrale e fare in modo che un assistente accendi l'imaging Doppler a colori per confermare che MR regola la sonda eco in base alle esigenze per ottenere una visione migliore. Una volta confermato il MR, ritrarre completamente l'ago dalla cavità ventricolare sinistra e legare delicatamente la sutura del cordoncino.
Quindi utilizzare una garza sterile per assorbire qualsiasi sangue all'apice e nella cavità toracica. Dopo cinque o 10 minuti di funzione cardiaca stabile, utilizzare una sutura 4-0 Vicryl interrotta per approssimare le costole riducendo l'isoflurane al 2%Avanti, inserire un tubo toracico nel sesto spazio intercostale e fissare il tubo alle tende sterili per evitare l'avanzamento involontario del tubo nella cavità toracica, quindi finire di approssimare le costole. Utilizzare una sutura continua per chiudere lo strato muscolare con l'isoflurane all'1,5% e lo strato cutaneo con l'isoflurane all'1%Collegare una siringa ribaltata della valvola di blocco Luer da 10 millilitri al tubo toracico e drenare da 10 a 12 millilitri di aria dalla cavità toracica prima di rimuovere il tubo.
Una volta rimosso il tubo, somministrare una dose sottocutanea finale di Carprofene. Dopo aver spento l'isoflurane, continuare la ventilazione meccanica mentre il ratto si appoggia dall'anestesia monitorando i segni vitali. All'inizio della respirazione spontanea, spegnere la ventilazione per testare la capacità del ratto di mantenere tale respirazione e una buona saturazione di ossigeno della cavità periferica.
Una volta che il topo è in grado di mantenere i livelli di saturazione capillare periferica dell'ossigeno senza la ventilazione, tagliare le suture di ancoraggio al tubo endotracheale ed estorciare l'animale. Quando il topo è ambulatorio, trasferire l'animale in una gabbia pulita con lettiera minima e continuare a monitorare i segni vitali con un monitor di saturazione dell'ossigeno capillare periferico portatile. Entro tre ore dal risveglio, somministrare buprenorfina.
Due settimane dopo l'intervento chirurgico, posizionare il ratto anestetizzato nella giusta posizione di decubito e inserire una sonda ecografica intracardiaca da otto megahertz 8 francesi con una piccola quantità di gel applicato sulla punta nell'esofago dell'animale. Utilizzando l'imaging Doppler a colori nella vista a due camere, visualizzare il ventricolo sinistro e l'atrio sinistro e misurare l'area dell'atrio sinistro e del getto MR per consentire il calcolo della frazione dell'area del getto MR come indicato. Per approssimare l'area dell'orifizio rigurgito, utilizzare il diametro esterno dell'ago per calcolare l'area dell'ago calibro 23 utilizzando la formula.
Ottenere l'imaging Doppler ad onda continua con il gate Doppler all'orifizio del getto rigurgito e tracciare la forma d'onda per calcolare l'integrale del tempo di velocità del getto rigurgitante. Utilizzare la formula per stimare il volume mr. Quindi ruotare la sonda eco lateralmente in senso orario per ottenere l'imaging Doppler dell'onda d'impulso della vena polmonare e misurare le velocità delle onde sistoliche e diastoliche usando l'equazione per calcolare il rapporto.
In queste immagini, si può osservare la direzione dell'ago mentre viene inserito nella valvola mitrale. Qui, il foro lasciato nel foglio illustrativo della valvola mitrale in un topo rappresentativo espiantato a due settimane dalla visualizzazione della procedura. A due settimane dopo l'intervento chirurgico, i cuori dei ratti con MR sono sferici e gravemente dilatati e un vivido getto MR è evidente con un'area media di circa 21 millimetri quadrati e un integrale medio del tempo di velocità di circa 40 centimetri.
La frazione MR normalizzata è tipicamente circa il 42%, che è considerata grave secondo le linee guida della American Society of Echocardiography. La gravità dell'MR è sufficiente a indurre l'inversione del flusso polmonare con una diminuzione del rapporto sistolico/diastolico da circa 0,9 al basale a circa meno 0,7 a due settimane. L'imaging in tempo reale con ecocardiografia transesofagea e l'introduzione di un ago nel cuore pulsante per forare il volantino mitralica è una procedura chirurgica fattibile che può essere insegnata.
Il nostro modello può essere combinato con cardiomiopatie ventricolari per studiare il rimodellamento cardiaco e facilita lo studio dell'impatto dell'esordio precoce rispetto all'esordio tardivo della MR sul rimodellamento cardiaco.
