Il trapianto renale ortotopico di ratto è un modello importante per studiare il meccanismo di rigetto dell'allotrapianto renale negli studi preclinici e potrebbe aiutare a sviluppare un nuovo approccio per migliorare la sopravvivenza a lungo termine degli alloinnesti renali. L'anastomosi end-to-end dei vasi renali in questo intervento chirurgico evita l'ischemia della parte inferiore del corpo e la trombosi della vena cava inferiore, mentre l'anastomosi dell'uretere in un metodo a tunnel end-to-side riduce la perdita di urina postoperatoria e la torsione dell'uretere. Questo metodo fornisce informazioni sullo studio dei meccanismi di rigetto immunitario e danno degli alloinnesti renali dopo trapianto di rene.
Inizia incidendo l'addome usando una forbice chirurgica lungo la linea mediana dalla sinfisi pubica al sottossifoide. Quindi aprire l'incisione usando un riavvolgitore. Estrarre l'intestino dal lato destro dell'incisione e avvolgerli con una garza inumidita per evitare che si secchino.
Quindi esporre il rene sinistro. Dissociare l'arteria renale sinistra e la vena usando micro-pinze e tamponi di cotone sotto 20 volte l'ingrandimento. Ligate e transect la vena surrenale e la vena genitale, se necessario.
Dissociare l'uretere con l'aiuto di micro-pinze, preservando i tessuti connettivi periferici per garantire l'afflusso di sangue all'uretere. Dissociare e tagliare o ligare l'aorta a circa cinque millimetri sopra l'arteria renale sinistra con un morsetto vascolare o 4-0 sutura monofilamento di poliammide. Quindi transettare la vena renale sinistra distale alla congiunzione della vena genitale sinistra e della vena surrenale.
Utilizzando un ago per bisturi calibro 24, lavare il rene dall'aorta sotto l'arteria renale sinistra con una soluzione UW ghiacciata integrata con 100 unità per millilitro di eparina fino a quando il sangue svanisce di colore. Transecare l'arteria renale sinistra accanto all'aorta, quindi transettare l'uretere vicino alla vescica e dissociare il rene con l'aiuto di micro-pinze e forbici. Conservare il rene sinistro del donatore in soluzione UW ghiacciata.
Sotto l'ingrandimento di 20 volte, dissociare l'arteria renale sinistra e la vena renale del ratto ricevente usando tamponi di cotone e microforze. Ligare la vena surrenale e la vena genitale, se necessario. Tagliare l'arteria renale sinistra e la vena renale alla radice usando morsetti microvascolari, quindi transecare l'arteria renale e la vena renale a tre millimetri di distanza dal morsetto microvascolare.
Dissociare e ligare l'uretere sinistro circa due o tre centimetri sotto il rene con un 8-0 sutura monofilamento in poliammide e transetto alla legatura. Resecare i riceventi rene sinistro nativo dissociando il rene con l'aiuto di micro-pinze e forbici. Impiantare il rene del donatore nella fossa renale sinistra del ratto ricevente e mettere il ghiaccio attorno al rene del donatore impiantato.
Passare all'ingrandimento 45 volte, quindi anastomosi dell'arteria renale e della vena renale dei donatori all'arteria renale e alla vena renale dei riceventi in un modello end-to-end utilizzando 10-0 suture monofilamento in poliammide. Per anastomosi l'arteria renale con suture interrotte, posizionare le suture di soggiorno a ore 12 e sei posizioni di anastomosi. Sutura equidistante un lato dell'anastomosi tra i due suture di soggiorno con due o tre punti.
Capovolgere le suture di soggiorno e allo stesso modo suturare l'altro lato dell'anastomosi tra le due suture di soggiorno con due o tre punti. Per anastomosi la vena renale con suture continue, posizionare le suture di permanenza nelle posizioni a ore sei e 12 dell'anastomosi. Suturare un lato dell'anastomosi dalla posizione a ore 12 con quattro o cinque punti usando le suture in esecuzione.
Capovolgere le suture di soggiorno e, allo stesso modo, suturare l'altro lato dell'anastomosi dalla posizione delle sei. Riperfonde il rene donatore rilasciando il morsetto microvascolare non invasivo della vena renale, identificare i siti di sanguinamento e fare ulteriori punti se necessario. Quindi, rilasciare il morsetto microvascolare non invasivo dell'arteria renale, identificare i siti di sanguinamento e fare ulteriori punti se necessario.
Sotto l'ingrandimento di 20 volte, ligate o cucire l'estremità dell'uretere donatore con una sutura monofilamento in poliammide 4-0 come rimorchio per trascinare l'estremità attraverso il tunnel della vescica ricevente. Fissare l'uretere donatore con la vescica ricevente cucendo l'avventizia dell'uretere donatore con lo strato muscolare della vescica ricevente all'esterno in quattro posizioni equidistanti usando un 8-0 sutura monofilamento in poliammide. Successivamente, trasettare l'estremità dell'uretere donatore con la sutura all'esterno della vescica ricevente e consentire all'uretere donatore di restringersi nuovamente nella vescica ricevente.
Riposizionare l'intestino nella cavità addominale e chiudere l'incisione addominale con suture continue nello strato muscolare e quindi lo strato cutaneo con una sutura monofilamento in poliammide 4-0. A dieci settimane dal trapianto, la colorazione di ematossilina ed eosina e la colorazione periodica dello spostamento acido hanno rivelato la sclerosi glomerulare, la fibrosi interstiziale, l'atrofia tubulare e la sclerosi arteriosa interstiziale nell'allotrapianto renale in contrasto con il rene isotrapianto. La colorazione dell'argento ha mostrato l'ispessimento della membrana basale glomerulare nel rene allotrapianto rispetto al rene isotrapianto, indicando il successo del modello di trapianto renale ortotopico di ratto.
Poiché il foro vascolare del rene è molto sottile, per evitare la sutura sbagliata, ricordatevi di eseguire l'anastomosi sul campo ad alto ingrandimento.
