Sıçan ortotopik renal transplantasyonu, preklinik çalışmalarda renal allogreft reddinin mekanizmasını araştırmak için önemli bir modeldir ve renal allogreftlerin uzun süreli sağkalımını iyileştirmek için yeni bir yaklaşım geliştirilmesine yardımcı olabilir. Bu ameliyatta böbrek damarlarının uçtan uca anastomozu, alt cisimde iskemi ve inferior vena kava trombozunu önlerken, uçtan uca tünel yönteminde üreter anastomozu postoperatif idrar kaçağını ve üreterin bükülmesini azaltır. Bu yöntem, böbrek nakli sonrası renal allogreftlerin immün rejeksiyon ve yaralanma mekanizmalarının araştırılması konusunda fikir vermektedir.
Simfizis pubis'ten subksifoide kadar orta hat boyunca cerrahi bir makas kullanarak karnı keserek başlayın. Ardından bir retraktör kullanarak insizyonu açın. Bağırsakları insizyonun sağ tarafından çıkarın ve kurumasını önlemek için nemlendirilmiş gazlı bezle sarın.
Sonra sol böbreği açığa çıkarın. Sol renal arter ve damarı mikroforseps ve pamuklu çubuklarla 20 kat büyütme altında ayırın. Gerekirse adrenal veni ve genital veni bağlayın ve transekte edin.
Üreteri mikro forseps yardımıyla ayırın, üretere kan akışını sağlamak için periferik bağ dokularını koruyun. Aortu sol renal arterin yaklaşık beş milimetre yukarısında vasküler bir kelepçe veya 4-0 poliamid monofilament sütür ile ayırın ve klipsleyin veya ligate. Daha sonra sol renal ven distalini sol genital ven ve adrenal venin birleşimine dönüştürün.
24 gauge neşter iğnesi kullanarak, böbreği sol renal arterin altındaki aorttan, kan rengi kaybolana kadar mililitre başına 100 ünite Heparin ile desteklenmiş buz gibi soğuk UW çözeltisi ile yıkayın. Aortun yanındaki sol renal arteri transekte edin, daha sonra mesanenin yanındaki üreteri transekte edin ve mikro forseps ve makas yardımıyla böbreği ayırın. Donörün sol böbreğini buz gibi soğuk UW çözeltisinde saklayın.
20 kat büyütmenin altında, pamuklu çubuklar ve mikro forseps kullanarak alıcı sıçanın sol renal arterini ve böbrek damarını ayırın. Gerekirse adrenal veni ve genital veni bağlayın. Sol renal arteri ve böbrek damarını mikrovasküler kelepçeler kullanarak kökte klipsleyin, ardından böbrek arterini ve böbrek damarını mikrovasküler kelepçeden üç milimetre uzağa aktarın.
Sol üreteri böbreğin yaklaşık iki ila üç santimetre altında 8-0 ile ayırın ve bağlayın poliamid monofilament sütür ve ligasyonda transekte edilir. Mikro forseps ve makas yardımıyla böbreği ayrıştırarak alıcıların doğal sol böbreğini rezeke edin. Donör böbreğini alıcı sıçanın sol böbrek fossasına implante edin ve implante edilen donör böbreğin etrafına buz koyun.
45 kat büyütmeye geçin, daha sonra 10-0 poliamid monofilament sütür kullanarak donörlerin renal arter ve renal venini alıcıların renal arterine ve renal venine uçtan uca bir paternde anastomoz edin. Renal arteri kesilmiş dikişlerle anastomoz etmek için, kalış dikişlerini anastomozun saat 12 ve altı pozisyonlarına yerleştirin. Anastomozun bir tarafını iki kalıntı dikiş arasında iki ila üç dikişle eşit uzaklıkta dikiş.
Kalış dikişlerini ters çevirin ve benzer şekilde iki kalış dikişi arasındaki anastomozun diğer tarafını iki ila üç dikişle dikin. Böbrek damarını sürekli dikişlerle anastomoz etmek için, kalış sütürlerini anastomozun saat altı ve 12 pozisyonlarına yerleştirin. Anastomozun bir tarafını saat 12 pozisyonundan akan dikişleri kullanarak dört ila beş dikişle dikin.
Kalış dikişlerini ters çevirin ve benzer şekilde, anastomozun diğer tarafını saat altı pozisyonundan dikin. Böbrek damarının non-invaziv mikrovasküler kelepçesini serbest bırakarak donör böbreğini reperfüze edin, kanama bölgelerini tanımlayın ve gerekirse ek dikişler yapın. Daha sonra, renal arterin invaziv olmayan mikrovasküler kelepçesini serbest bırakın, kanama bölgelerini tanımlayın ve gerekirse ek dikişler yapın.
20 kat büyütme altında, donör üreterin ucunu, alıcı mesanesinin tünelinden sürüklemek için bir çekme olarak 4-0 poliamid monofilament sütür ile yaslandırın veya dikin. Donör üreterin adventitia'sını, alıcı mesanesinin kas tabakası ile dışarıdaki 8-0 kullanarak dört eşit uzaklıkta dikerek donör üreterini alıcı mesanesiyle sabitleyin. poliamid monofilament sütür. Daha sonra, donör üreterin ucunu, alıcı mesanesinin dışındaki dikişle transekte edin ve donör üreterin alıcı mesanesine geri büzülmesine izin verin.
Bağırsakları tekrar karın boşluğuna yerleştirin ve kas tabakasında sürekli dikişlerle karın kesisini kapatın ve ardından cilt tabakasını 4-0 poliamid monofilament sütür ile kapatın. Transplantasyondan on hafta sonra hematoksilin ve eozin boyama ve periyodik asit kayması boyaması, izogreft böbreğin aksine renal allogreftte glomerüler skleroz, interstisyel fibrozis, tübüler atrofi ve interstisyel arteriyel skleroz saptandı. Gümüş boyama, allogreft böbrekteki glomerüler bazal membranın izogreft böbrek ile karşılaştırıldığında kalınlaştığını göstererek sıçan ortotopik böbrek transplantasyonu modelinin başarısını göstermiştir.
Böbreğin vasküler deliği çok ince olduğundan, yanlış dikişten kaçınmak için, anastomozu yüksek büyütme alanında yapmayı unutmayın.
