Un modello affidabile di lembo fascio-cutaneo suino per studi di bioingegneria di allotrapianti compositi vascolarizzati

Il nostro protocollo descrive i lembi fasciocutanei clinici nei suini. Il principale vantaggio di questa tecnica è l'affidabilità della vascolarizzazione della pelle. La tecnica chirurgica fornisce uno strumento adatto per studiare velivoli compositi vascolarizzati in perfusione meccanica, ingegneria tissutale e immunologia in un modello animale di grandi dimensioni.

Per iniziare, palpare il polso dell'arteria safena, che dovrebbe essere di circa tre dita di larghezza mediale dalla rotula, e taggarlo. Identificare e disegnare i limiti del lembo. Il limite superiore è un accesso parallelo alla piega inguinale, tre centimetri sotto di esso.

E il limite laterale è un asse dalla spina iliaca superiore anteriore alla parte mediale della rotula. Disegna un lembo ovale di 10 centimetri di diametro, centrato sul peduncolo safeno e contenuto nei limiti del lembo indicato. Fai un'incisione cutanea di otto centimetri nella porzione distale del peduncolo sul punto di riferimento del lembo.

Aprire la fascia e sezionare smussata per esporre l'arteria safena e le sue due vene comitanti. Eseguire una doppia legatura e separarla in un fascio. Incidi la pelle rimanente del lembo con una lama.

Utilizzare cauterizzazione per aprire il tessuto sottocutaneo e la fascia circostante. Usando una pinza bipolare, esegui un'emostasi completa. Per evitare la trazione involontaria e l'interruzione dei vasi perforanti, attaccare la componente cutanea del lembo alla fascia sottostante con tre punti di sutura non assorbibili zero.

Liberare il lembo dal gracile sezionando la fascia lontano dal muscolo. Continuare la dissezione del peduncolo seguendo i vasi safeni lungo i vasi femorali. Eseguire un'incisione perpendicolare unendo la piega inguinale alla parte prossimale del lembo.

Fai un'incisione di 12 centimetri nella piega inguinale. Sollevare la pelle di collegamento e aprire lo strato sottocutaneo. Scheletrizzare i vasi femorali e legarli distalmente al ramo safeno in due fasci separati.

Continuare la dissezione dei vasi femorali da distale a prossimale fino a raggiungere il livello del legamento inguinale. Separare l'arteria femorale dalla vena e isolarli con elastici di gomma. Per raccogliere il secondo lembo safeno, ripetere l'intero processo per l'arto posteriore controlaterale.

Iniettare l'animale con 100 unità per chilogrammo di eparina per via endovenosa cinque minuti prima di procedere alla fase successiva. Associare il peduncolo femorale il più possibile prossimale al legamento inguinale e separare il lembo dal maiale donatore. Dilatare le estremità del vaso femorale e inserire un angiocatetere di gauge 20 sia nell'arteria che nella vena.

Utilizzare tre cravatte di seta zero per fissare il catetere ai vasi. Lavare lentamente l'arteria dei lembi fasciocutanei con 10 millilitri di 100 unità per millilitro di soluzione salina di eparina fino a quando non si osserva un chiaro deflusso venoso. In questo studio sono stati raccolti un totale di 14 lembi fasciocutanei safeni.

Il tempo medio di approvvigionamento dei flap è stato di 47 minuti. I diametri medi dell'arteria e della venosa erano rispettivamente di 2,25 millimetri e 3,56 millimetri. Infine, la lunghezza media del peduncolo era di 10,8 centimetri Dopo ogni prelievo di lembi, è stata eseguita un'angiografia FCF attraverso l'iniezione intraarteriosa di 10 millimetri di prodotto di contrasto immediatamente dopo il lavaggio salino dell'eparina.

Questo passaggio ha permesso la valutazione della vascolarizzazione della pagaia cutanea. La cosa più importante da ricordare è attaccare perfettamente la componente cutanea del lembo alla fascia sottostante per evitare qualsiasi interruzione dei vasi perforanti. Questa accurata descrizione della tecnica di approvvigionamento del lembo affidabile e riproducibile offre uno strumento prezioso per gli studi di bioingegneria VCA nei suini.