La registrazione continua del flusso sanguigno renale nei ratti strumentati ci consente di determinare temporaneamente la sequenza di eventi che portano al processo patologico che stiamo studiando. Nel nostro caso, è ipertensione e stiamo cercando di determinare se una riduzione del flusso sanguigno renale, che si verifica nell'ipertensione, precede o è una conseguenza dell'ipertensione. Il sistema che dimostreremo oggi e la preparazione dell'animale è davvero progettato per consentire una determinazione continua 24 ore su 24 del flusso sanguigno renale per molte settimane alla volta per studiare eventi cronici e per studiare il ratto nel loro ambiente domestico, le gabbie.
Come per tutte le tecniche chirurgiche, la pratica, la pazienza e l'attenzione ai dettagli, saremo tenuti a padroneggiare queste procedure fino a quando l'implementazione può essere eseguita in tempo. Per iniziare a radersi l'intero addome in una regione sul pisolino intorno alla settima vertebra cervicale di un ratto anestetizzato con un tagliacapelli elettrico. Dopo la rasatura, pulire l'area tre volte alternando con 10% di iodio povidone e etanolo al 70%.
Metti il topo in posizione prona. Fai un taglio di un centimetro con il bisturi sul pisolino e sul fianco sinistro. Quindi eseguire una dissezione smussata con pinza emostatica nello spazio sottocutaneo chiaro dall'incisione del fianco alla parte posteriore del collo.
Attaccare il pulsante della pelle alla sonda di flusso e far passare la sonda di flusso attraverso questo tunnel sottocutaneo dal collo all'incisione del fianco con una pinza emostatica. Quindi posizionare il ratto in posizione supina e fare un'incisione addominale mediana da quattro a cinque centimetri. Sezionare l'area intorno all'arteria renale sinistra con una pinza curva microdissecante esponendo lo spazio sufficiente per posizionare la sonda di flusso.
Quindi, senza mezzi termini, perforare il muscolo lombare quadratus sinistro con il forcipe emostatico e tirare la testa della sonda di flusso attraverso l'arteria renale sotto il tessuto adiposo nella cavità addominale. Posizionare la rete in fibra di poliestere sulla parete addominale. Agganciare la punta della sonda di flusso all'arteria renale sinistra e collegarla al flussometro.
Aggiungi un po 'di gel intorno alla punta della sonda e il valore della portata apparirà sul flussometro. Incollare la rete in fibra di poliestere attaccata alla sonda alla parete addominale utilizzando adesivo tissutale e tenere premuto fino a quando asciutto e incollato. Una volta che la sonda è in posizione, scollegare la sonda di flusso dal flussometro e coprire l'addome con una garza imbevuta di soluzione salina.
Per suturare la sonda, girare il ratto in posizione prona. Collegare il pulsante della pelle alla sonda di flusso e fare un anello circolare della sonda di flusso sottocutanea sul fianco. Sutura l'incisione al collo e il bottone sulla pelle.
Quindi suturare il fianco con quattro suture chirurgiche ott. Collegare nuovamente la sonda di flusso al flussometro e riportare il ratto in posizione dorsale per controllare il flusso sanguigno renale. Effettuare le regolazioni finali della sonda di flusso per ottimizzare la sua posizione sull'arteria renale.
Infine, suturare il muscolo con tre ott seta nella pelle con quattro ott sutura chirurgica. Quando il ratto è completamente recuperato dall'anestesia, riportare il ratto a un sistema di gabbia di risposta al movimento collegare la sonda di flusso al misuratore di flusso sanguigno e consentire un periodo di recupero di circa una settimana per stabilizzare la sonda e la misurazione del flusso. La pressione arteriosa media e il flusso sanguigno sono stati misurati continuamente in ratti opachi sensibili al sale durante il passaggio da una dieta a basso contenuto di sale ad alta sala.
Questi dati rappresentativi di un ratto maschio sono stati registrati per un periodo di quattro settimane e sono mostrati con una media minima. Una chiara differenza diurna è stata osservata nella pressione arteriosa media e nel flusso sanguigno. Mentre la pressione sanguigna aumenta con una dieta ricca di sale, il flusso sanguigno tende a diminuire piuttosto che aumentare, suggerendo una maggiore resistenza vascolare renale.
Il grande vantaggio di questa tecnica è che può studiare il flusso sanguigno renale per lunghi periodi di tempo e, soprattutto, in condizioni non anestetizzate. Questo è di grande importanza quando si studia la risposta a vari stimoli in cui è possibile utilizzare lo stesso animale in condizioni controllate non anestetizzatezzate, e seguire lo stesso animale per brevi periodi o periodi molto lunghi per vedere qual è la risposta a qualche particolare stimolo o malattia patologica.
