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Method Article
卵巣癌の腹膜播種の多段階プロセスを明確にするために、現在の研究では、これらの腫瘍細胞と同所接種を介して元の腫瘍の開発と腹膜転移のマウス実験モデルを提示します。
それは腹膜播種を示しているので、上皮性卵巣癌(EOC)は予後不良と関連しています。予後を改善するために、腹膜播種を制御することが重要です。しかし、腫瘍細胞が原発巣から切り離し、中皮に付着するかまだ不明です。適切な動物モデルの確立は、in vivoでの腹膜播種のメカニズムの理解を得るために必要とされます。現在の研究では、腹膜や遠隔臓器などの転移の発生にマウスの卵巣表面にEOC細胞の局所注射からプロセスをご紹介します。生後8週目の雌ヌードマウス(BALB / C NU / NU)を使用しました。ビューの顕微鏡視野下では、EOC細胞(中の細胞外マトリックス(ECM)の1×10 5細胞/μlのヒドロゲル/片側性卵巣/マウスをベース)背側脇腹から後腹膜アプローチにより、マウスの卵巣に注入しました。この提案された方法は、ルですマウスのためのssの侵襲的手技とは、卵巣へのダメージを最小限に抑えることができます。ここでは、EOCの元と転移性腫瘍形成の開発における方法論の手順を説明します。
上皮性卵巣癌(EOC)は、婦人科悪性腫瘍の1の中で癌関連死亡率の最も高い割合を占めています。 EOCは、主にその後半症状に、予後不良と関連している、と多くの場合、複数の腹腔内disseminationsおよび遠隔転移2-4と関連しています。腹膜播種は、多段階プロセスです。まず、腫瘍細胞は原発巣から離れ、そして腹腔内に移動します。腫瘍細胞が腹膜中皮に付着すると、彼らは中皮5,6を介して組織に侵入し始めます。より良い腫瘍生物学( 例えば 、癌の進行と治療反応)を理解するために、マウスモデルは、豊富な情報を提供しています。ヒト癌細胞を有する異種移植片は、広く、静脈内に、腹腔内に、ヒト癌細胞を皮下に接種されたマウスモデルに使用され、同所れます。同所gを有する動物モデルrafted腫瘍は、より効率的かつ正確heterotopicallyグラフトされた腫瘍を有する動物モデルと比較して、ヒトにおける腫瘍環境を反映した結果を生成することができます。そのため、多くのヒト腫瘍については、同所移植モデルは7月11日に設立されました。
ここでは、腹側接種に比べて侵襲性が制限されている背側脇腹から後腹膜アプローチを通じて人EOC細胞の同所接種を説明します。この技術はEOCについての有用な情報、腹腔内播種の特にメカニズムの多様性を提供することができます。
治療プロトコルは名古屋大学で採択された動物実験のためのガイドラインに従います。
細胞懸濁液の調製
細胞懸濁液2.同所接種
注:手術は、専用のスイートを必要としません。手術は別個であり、最小限の活性を有する部屋の領域で実験室のベンチトップ上で実行することができます。層流フードを使用してもよいです。無菌の手術器具を使用する必要があり、鋏は、皮膚切開を作製するために使用すべきではありません。
3.手術後の処置
腫瘍および転移の4分析
注: - 接種後3週間で腫瘍が注入された卵巣2に形成されます。
六ヌードマウスは、このプロトコルに記載のように、それらの卵巣は、ヒト明細胞癌細胞株ES-2を接種していました。 図1Aに示すように、2週間後、6匹のマウスの5は、ES-2細胞を接種した卵巣の腫瘍を有していたが、反対側の卵巣には腫瘍(コントロールとして使用)を接種せずに存在しませんでした。また、5匹のマウスの2は、腹水を持つ複数の腹膜d...
動物モデルは、癌細胞に対する腫瘍発生、進行、転移、及び薬効のメカニズムを分析するために不可欠です。ヒト卵巣癌細胞を有するマウスはまた、動物モデルとして使用されてきました。ここでは、同所のサイトで卵巣腫瘍細胞の投与のための低侵襲性の手順を説明します。この手順を使用して、背側脇腹から後腹膜アプローチを通じて卵巣への接種は、他の一般的に使用される技術上の?...
著者らは、開示することは何もありません。
作者は彼らの役に立つ議論や技術支援のための産婦人科のメンバーと癌生物学に感謝します。この研究は、科学の振興(JSPS)費補助金科学研究費(; H.梶山へ15K15604)のために日本協会によってサポートされていました。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Matrigel matrix | BD | 354234 | ECM-based hydrogel |
Insulin syringe | TERUMO | SS-05M2913 | 1/2 cc, 29 G x 1/2" |
Suturing needle with suture | 11 mm, 3/8, Nylon6-0 | ||
Reflex 7 mm Wound Clip Applier | CellPoint Scientific | 204-1000 | |
Reflex 7 mm wound clips | CellPoint Scientific | 203-1000 |
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