変形性膝関節症ラットの炎症と軟骨喪失を軽減するためのTuina操作

要約

石膏固定化誘発変形性膝関節症ラットに対して実行されるTuina操作のプロトコルを提示します。予備的な結果に基づいて、この方法の有効性は炎症と軟骨喪失の減少に依存していることが示唆されました。

要約

臨床試験では、Tuina操作が変形性膝関節症(KOA)の治療に効果的であることが示唆されていますが、そのメカニズムを発見するにはさらなる研究が必要です。したがって、変形性膝関節症の動物モデルの操作は重要です。このプロトコルは、KOAラットに対するTuina操作の標準的なプロセスと、KOAに対するTuinaのメカニズムの予備的な調査を提供します。プレスと混練の操作方法(体表面の特定の領域を押して混練することを指す一種のTuina操作)は、ラットの膝関節の周りの5つのツボに適用されます。操作の力および頻度は指圧記録によって標準化され、操作中のラットの位置はプロトコルに詳細に記載されている。操作の効果は、滑膜および軟骨における疼痛行動試験および顕微鏡所見によって測定することができる。KOAラットは、疼痛行動の有意な改善を示した。滑膜組織炎症浸潤はTuina群で減少し、腫瘍壊死因子(TNF)-αの発現は有意に低かった。対照群と比較して、軟骨細胞のアポトーシスはTuina群で少なかった。この研究は、KOAラットに対するTuina操作の標準化されたプロトコルと、Tuinaの治療効果が滑膜の炎症と軟骨細胞の遅延アポトーシスの軽減に関連している可能性があるという予備的な証拠を提供します。

概要

変形性膝関節症(KOA)は、主に関節痛に現れる変性疾患です。線維症、ひび割れ、潰瘍形成、関節軟骨の喪失がこの病気の主な原因です¹。KOAは有病率が高く、患者の日常生活に大きな影響を与え、重症の場合に障害を引き起こす可能性があります。45〜84歳の人々の間では、KOAの有病率は年齢とともに増加し、85歳以上の人々の有病率は15%であり、女性で優勢です^2,3。さらに、KOAは個人と社会の両方に深刻な経済的負担をもたらす可能性があります。調査によると、一人当たりのKOAの直接医療費は、年間8,858ドル±5,120ドルに達しました⁴。高齢化社会の進展に伴い、KOAは世界的な健康問題、大きな社会問題となり、科学研究の話題となっています。

エビデンスに基づく研究は、KOA⁵の治療におけるTuina操作の有効性を示しています。Tuina操作はKOA患者の痛みを和らげ、機能障害を改善する可能性があり、そのメカニズムは抗炎症効果に関連しています^6,7。学者らは、Tuina操作が炎症因子インターロイキン(IL)-βおよび....

プロトコル

この研究は、上海中医薬大学(YYLAC-2022-166)と提携している伝統的な中国と西洋の統合の岳陽病院の実験動物倫理委員会によって実施された動物倫理レビューに合格しました。

1. 実験動物の準備とグルーピング

1. 動物の準備
   1. 室温(18〜21°C)、湿度40%〜50%、12時間:12時間の概日リズム交互で200〜220gの合計10匹の健康なSPF SD雌ラットを後方投与する。動物倫理ガイドラインおよびガイドラインの関連規定に厳密に準拠して、痛みに関連する動物実験を実施します。
2. 動物のグループ化
   1. ラットをTuina群と対照群にランダムに分けます。Tuinaグループのラットをモデリング後21日間、プレスおよび混練操作で処理します。対照群のラットを同じTuinaルームに入れ、Tuinaグループが治療を受けている間、それらを黒い布袋に同時に入れます。

2. 動物のモデリング

1. 動物に麻酔をかける
   1. ガス麻酔にはイソフルランを使用してください。ラットを誘導濃度3%の誘導ボックスに入れます。ラットを寝かせた後、箱をぐらつに動かし、ラットが腹臥位に戻ろうとせずに転倒したときの麻酔を確認します。

ディスカッション

この研究は、KOAラットに対するTuina操作のプロトコルを提供します。疼痛行動試験と組織形態学的所見を通じて、KOAラットに適用されたこのような一連のTuina操作は、滑膜炎症と軟骨アポトーシスを減少させる可能性があることが示唆され、これはKOAの動物モデルにおけるTuina操作の参照となる可能性があります。

プロトコルにはいくつかの重要な手順があります。まず?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
absolute ethanol	Supelco	PHR1070	For making specimen
ALMEMO admeasuring apparatus	ahlborn	2450-1	For Mechanical Withdrawal Threshold test
Anti-Digoxin antibody	Sigma-Aldrich	SAB4200669	For HE stain IHC or TUNEL
Anti-IL-1 beta	abcam	ab283818	For HE stain IHC or TUNEL
DAB Substrate kit	Solarbio	DA1010	For HE stain IHC or TUNEL
Denture base materials	Shanghai New Century	20000356	For model making
eosin	bioswamp	PAB180016	For HE stain IHC or TUNEL
Finger pressure recordings	Suzhou Changxian Optoelectronic Technology	CX1003w	For Tuina manipulation
formic acid solution	Sigma-Aldrich	695076	For decalcification
H2O2	Sigma-Aldrich	386790-M	For HE stain IHC or TUNEL
hematoxylin	bioswamp	PAB180015	For HE stain IHC or TUNEL
Isoflurane	Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company	S10010533	For gas anesthesia
neutral resins	bioswamp	PAB180017	For HE stain IHC or TUNEL
Paraformaldehyde Fix Solution	Sigma-Aldrich	100496	For histology
PBS	Sigma-Aldrich	P3813	For HE stain IHC or TUNEL
Plantar Test Apparatus	IITC Life Science	/	For Paw Withdrawal Latency test
plaster of Paris bandage	WANDE	20150023	For model making
Proteinase K	Sigma-Aldrich	124568	For HE stain IHC or TUNEL
TNF Alpha Monoclonal antibody	Proteintech	60291-1-Ig	For HE stain IHC or TUNEL
TUNEL	Servicebio	GDP1042	For HE stain IHC or TUNEL
Wax	Sigma-Aldrich	327204	For making specimen
xylene	Shanghai Sinopharm Group	100092	For making specimen