Manipulação de Tuina para Reduzir a Inflamação e Perda de Cartilagem em Ratos com Osteoartrite de Joelho

Resumo

Apresentamos um protocolo para manipulação de Tuina realizada em ratos com osteoartrite de joelho induzida por gesso imobilizado. Com base nos resultados preliminares, sugeriu-se que a eficácia do método dependia da redução da inflamação e da perda de cartilagem.

Resumo

Ensaios clínicos sugerem que a manipulação de Tuina é eficaz no tratamento da osteoartrite do joelho (OA), enquanto mais estudos são necessários para descobrir seu mecanismo. Portanto, a manipulação de modelos animais de osteoartrite de joelho é fundamental. Este protocolo fornece um processo padrão para a manipulação de Tuina em ratos KOA e uma exploração preliminar do mecanismo de Tuina para KOA. O método de manipulação de prensagem e amassamento (um tipo de manipulação de Tuina que se refere a pressionar e amassar a área específica da superfície corporal) é aplicado em 5 acupontos ao redor da articulação do joelho de ratos. A força e a frequência de manipulação foram padronizadas por meio de registros de pressão dos dedos, e a posição do rato durante a manipulação é descrita em detalhes no protocolo. O efeito da manipulação pode ser medido por testes de comportamento da dor e achados microscópicos na sinovial e cartilagem. Ratos KOA apresentaram melhora significativa no comportamento da dor. O infiltrado inflamatório do tecido sinovial foi reduzido no grupo Tuina e a expressão do fator de necrose tumoral (TNF)-α foi significativamente menor. Em comparação com o grupo controle, a apoptose de condrócitos foi menor no grupo Tuina. Este estudo fornece um protocolo padronizado para manipulação de Tuina em ratos KOA e prova preliminar de que os efeitos terapêuticos de Tuina podem estar relacionados à redução da inflamação sinovial e retardo da apoptose de condrócitos.

Introdução

A osteoartrite do joelho (OA) é uma doença degenerativa que se manifesta principalmente por dores articulares. Fibrose, fissuras, ulceração e perda de cartilagem articular são as principais causas dessa doença¹. A OA tem alta prevalência e pode resultar em profundo impacto no cotidiano dos pacientes, causando incapacidade em casos graves. Entre pessoas de 45 a 84 anos, a prevalência de OAB aumenta com a idade, e a prevalência entre pessoas com 85 anos ou mais é de 15%, com predomínio em mulheres ^2,3. Além disso, a KOA pode trazer um sério fardo econômico tanto para o indivíduo quanto pa....

Protocolo

Este estudo passou pela revisão ética animal conduzida pelo comitê de ética animal experimental do Hospital Yueyang de medicina tradicional chinesa e ocidental integrada afiliada à Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai (YYLAC-2022-166).

1. Preparação e agrupamento de animais experimentais

1. Preparo Animal
   1. Criar um total de 10 ratas saudáveis SPF SD de 200-220 g à temperatura ambiente (18-21 °C), umidade 40%-50%, 12 h: 12 h alternâncias do ritmo circadiano. Conduzir experimentos com animais relacionados à dor em estrita conformidade com as disposições relevantes das diretrizes e diretrizes éti....

Discussão

Este estudo fornece um protocolo para manipulação de Tuina em ratos KOA. Através de testes de comportamento da dor e achados histomorfológicos, sugeriu-se que tal série de manipulação de Tuina aplicada em ratos KOA poderia reduzir a inflamação sinovial e a apoptose da cartilagem, o que poderia ser uma referência da manipulação de Tuina em modelos animais de KOA.

Existem vários procedimentos críticos durante o protocolo. Primeiro, é importante escolher um método apropriado para .......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
absolute ethanol	Supelco	PHR1070	For making specimen
ALMEMO admeasuring apparatus	ahlborn	2450-1	For Mechanical Withdrawal Threshold test
Anti-Digoxin antibody	Sigma-Aldrich	SAB4200669	For HE stain IHC or TUNEL
Anti-IL-1 beta	abcam	ab283818	For HE stain IHC or TUNEL
DAB Substrate kit	Solarbio	DA1010	For HE stain IHC or TUNEL
Denture base materials	Shanghai New Century	20000356	For model making
eosin	bioswamp	PAB180016	For HE stain IHC or TUNEL
Finger pressure recordings	Suzhou Changxian Optoelectronic Technology	CX1003w	For Tuina manipulation
formic acid solution	Sigma-Aldrich	695076	For decalcification
H2O2	Sigma-Aldrich	386790-M	For HE stain IHC or TUNEL
hematoxylin	bioswamp	PAB180015	For HE stain IHC or TUNEL
Isoflurane	Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company	S10010533	For gas anesthesia
neutral resins	bioswamp	PAB180017	For HE stain IHC or TUNEL
Paraformaldehyde Fix Solution	Sigma-Aldrich	100496	For histology
PBS	Sigma-Aldrich	P3813	For HE stain IHC or TUNEL
Plantar Test Apparatus	IITC Life Science	/	For Paw Withdrawal Latency test
plaster of Paris bandage	WANDE	20150023	For model making
Proteinase K	Sigma-Aldrich	124568	For HE stain IHC or TUNEL
TNF Alpha Monoclonal antibody	Proteintech	60291-1-Ig	For HE stain IHC or TUNEL
TUNEL	Servicebio	GDP1042	For HE stain IHC or TUNEL
Wax	Sigma-Aldrich	327204	For making specimen
xylene	Shanghai Sinopharm Group	100092	For making specimen