ライトシート顕微鏡を用いた無傷の絨毛膜内の初期ゼブラフィッシュ胚のイメージングのためのサンプル調製

まず、ビードを加えた準備したアガロースチューブを摂氏37度の水浴から取り出します。10ミリリットルのアガロース全体を6センチのペトリ皿に注ぎます。温度が摂氏33度を下回ったら、10〜15個の胚をアガロース溶液に移します。

ペトリ皿を渦巻かせて、転送されるはずの小さなバッファーが十分に分散されるようにします。次に、適切なピペットチップが付いた200マイクロリットルのマイクロピペットを取り、マイクロ遠心チューブから取り出したきれいなストレートチューブをピペットチップに挿入します。マイクロピペットを使用して、チューブに少量のアガロースを吸引し、続いて2〜3個の胚を吸引します。

ピペットの圧力を逃がさずに、チューブをピペットの先端から取り外し、E3を充填したペトリ皿の蓋に置き、アガロースが固まるようにします。アガロースが固まったら、E3で満たされた2ミリリットルの微量遠心チューブにチューブを移します。