We thank Katherine Clark for technical assistance. A.D.R.G. is funded in part by 5K01MH097957-03

混合C57BL / 6バックグラウンド上の成体（3-4ヶ月齢）雄マウスは、このプロトコルで使用しました。動物は、12時間の明/暗サイクルで維持し、食物および水に自由にアクセスさせました。このプロトコルで実行されるすべての手順は、ドレクセル大学施設内動物管理使用委員会によって承認されたプロトコルに従って行いました。 1.手術領域の準備<ol><li>吸収パッドで全体の外科ベンチをカバーし、定位に隣接する手術器具を配置し、その後、70％エタノールで手術台を消毒。 </li><li>マニピュレータアームなし定位装置を設定します。定位の加熱パッドを配置し、37℃に設定してください。動物と加熱パッドとの間のペーパータオルの小片または外科パッドを配置することによって、動物の過熱を防ぎます。 </li><li>オートクレーブはさみを使用して、REAまで0.9％滅菌生理食塩水を含む滅菌ペトリ皿にオートクレーブゲルフォームの小片をカット使用するためにDY。 注意：オートクレーブ処理機器および無菌手術用消耗品を使用して滅菌作業環境を維持します。必要に応じて、10〜15秒間ビーズ滅菌器に浸漬することにより、動物の間で処置中または手術器具を再滅菌します。消毒するために、必要に応じて、70％エタノールで手を擦ることによって作業中は清潔な手袋を維持します。 </li></ol>外科2.プレッピングマウス<ol><li>ホームケージからマウスを削除し、（g）を量ります。 </li><li>場所イソフルラン誘導チャンバ内にマウスや麻酔の外科的平面、約3〜5分を誘導するために2〜5 L /分およびイソフルラン気化器に酸素を設定します。緩徐呼吸や固定化のために監視します。マウスが完全につま先ピンチ反射を使用して鎮静されていることを確認してください。 </li><li>マウスが完全に鎮静されると、イソフルランにチューブが取り付けられているノーズコーンに鼻を確保、定位フレームに配置します。外耳道に耳棒を挿入し、締め、頭が安定して確保します。 </li><li>耳にし、目の間から耳の後ろに耳から頭を剃ります。 </li><li> 、イソプロピルアルコール及びベタジンヨウ素溶液のワイプを交互に3回ずつ肌を殺菌。 </li><li>外科手術中に乾燥からそれらを防ぐために、両眼に人工涙液を適用します。 </li></ol> 3.手術手順<ol><li>つま先や尾をつまんで麻酔深度を監視します。応答がないとき、マウスは、適切な外科的な平面であり、呼吸がゆっくりとさえあります。 </li><li>ちょうどほぼ11番手術用メスの刃を使用して、単一の、しっかりした動きで耳の間に、目の後ろから矢状皮膚切開を行います。脇の皮膚を移動し、止血剤で右側をクリップ。 </li><li> 11番メスと綿の鈍い側を使用して、上層膜の明確な頭蓋骨は、アプリケーターをひっくり返しました。必要に応じて、0.9％の食塩水に浸した綿先端のアプリケーターで頭蓋骨を拭きます。完全に乾燥することができます。 </li><li>米国小さ ​​な定規をる、1ミリメートルの冠状縫合の尾、および恒久的なマーカーと矢状縫合（ 図1）に対して横1ミリメートル、で開頭の左端に開頭術の前縁をマーク。そして、矢状および冠状縫合、それぞれ（ 図1）から4ミリメートルで開頭術の権利と尾側の境界をマークします。 </li><li> 0.5ミリメートルドリルビットを使用して、恒久的なマーカーアウトライン次ゆっくり穿孔することによって開頭を作るために開始します。完全に頭蓋骨を突破しないように注意してください。を押して、優しく第5鉗子で頭頂骨の孤立片に、弱さの領域は、圧力に道を譲るだろう。薄くなった骨が周囲全体に十分に弱い場合、骨片を除去するための準備ができています。 注：調査員が困難一体に骨を除去するが発生した場合、これは、骨が十分に掘削時に間引かれなかったことを示唆しています。 facilita以降の動物で、さらに頭蓋骨をドリル考えてみましょう骨片を容易に除去するTE。 </li><li> 23 G針を装着した10mlシリンジを用いて、単離された骨と掘削面積を浸して0.9％生理食塩水を少量を適用します。 </li><li>定位機器にマニピュレータアームを取り付けます。吻方面した刃の鋭い側とプローブホルダに新しい11番手術用メスの刃を取り付けます。 注：吻側および尾側の組織が刃の鋭く尖っていないエッジを経験しているが、それぞれ、貫通損傷によって誘発される機械的な損傷は、病変の程度全体に匹敵します。私たちは、頭側と尾部の間、GFAP発現または増殖のアップレギュレーションを含む反応性神経膠症の主な機能にはかなりの違いを観察していません。 </li><li>邪魔にならないようにマニピュレータアームを保ち、慎重5/45角度のついたピンセットを用いて、単離された骨を持ち上げます。 FUL 1に残さ骨の一部をやってのけるレバレッジを使用して、孤立した骨やリフトの側面に鉗子の先端部を挿入Lの動き。 注：脳を刺すか、頭蓋骨の下に硬膜を乱さないように注意してください。 </li><li>浸した吸収性ゲルフォームの小片を取り、乾燥からそれを防止し、存在する可能性のある血液を吸収するために覆われていない脳に置きます。 </li><li>ゲルフォームが適所に配置されると、所定の位置にマニピュレータアームを揺動し、ゲルフォーム上に開頭の中央にブレードを調整します。ゲルフォームを取り外し、先端が硬膜を穿刺せずに硬膜に接触​​するまで、ブレードを下げます。定位の垂直アームのバーニアスケールを使用してマーク背/腹座標。 </li><li>マニピュレータアームを使用して、ゆっくりと脳にブレード正確に3ミリメートルを下げます。これは、マニピュレータアームにバーニヤ目盛りを使用することによって達成されます。ブレードは5〜10秒のための場所に滞在することができます。ブレードはopposiに移動する前に、開頭の吻側および尾側の境界に到達することを可能にする3回尾側するブレード取付吻側に定位アームを移動TE終了。 注：硬膜は、ブレードを挿入する前に除去されていません。厚さ7〜80μmであるラットの硬膜とは対照的に、マウスの硬膜がかなり薄くなっている（わずか数細胞層の厚さ）、挿入時のメスの刃にかなりの抵抗を生成しません。各動物が一貫性の損傷を受けることを確実にするために、各マウスのための新しい手術用メスの刃を使用してください。 </li><li>ゆっくりと脳からブレードを取り外し、定位アームを持ち上げます。ブレードを除去した後、すぐに余分な血液や体液を吸収するために、脳の表面にゲルフォームの別の部分を配置します。 </li><li>一方、定位アームを取り外し、11番手術用メスの刃を処分。出血が停止した後、ゲルフォームを削除します。 </li><li>このようなethilonまたはプロレンとして、非吸収性縫合糸で皮膚を縫合することによって傷を閉じます。縫合糸は、手術後9-10日に削除する必要があります。 </li><li>そのホームケージにマウスを返し、マウスがheatinにゆっくりと回復することができます苦痛の兆候がないかのGパッドとモニター。イソフルラン誘発性の麻酔からの回復は、典型的には、イソフルランから除去した後、2〜5分以内に発生します。それは胸骨recumbancyを取り戻したまで無人動物を放置しないでください。 </li><li>水和を確実にするために乳酸リンゲル液の皮下0.5〜1 mlで管理します。 </li></ol> 4.手術後のケア<ol><li>密接植民地に戻る前に麻酔から回復するまで、手術後の動物を監視します。 <ol><li> 、術後の痛みや不快感を軽減直ちに手順に従って、腹腔内注射により0.05〜0.1ミリグラム/ kgのブプレノルフィンを投与すること。 </li><li>このような制限された運動、グルーミングの欠如、または体重減少などの苦痛の重症徴候について術後2〜3日間動物を観察します。苦痛のこれらの兆候のいずれかを実証する動物を安楽死させると研究から取り外します。 </li></ol></li><li>損傷組織の病理組織学的検査を検討するために、スタンにより動物を安楽死させます準の心臓内灌流。 <ol><li>簡単に述べると、ケタミン/キシラジンの過剰摂取で動物を麻酔し、心臓内の0.9％NaCl 15〜20ミリリットルで灌流、または肝臓、実験の終了時に4％パラホルムアルデヒドの60ミリリットル、続いて血液のクリアされるまで。 </li></ol></li><li> 30％ショ糖溶液に移す前に、4％パラホルムアルデヒド中で2〜4時間、脳とポストフィックスを分析。セクション40〜60ミクロンで、クライオスタットの脳、および標準的な組織学的または免疫組織化学的手順による処理、またはガルシア8,9に記載されているように。 </li></ol>

<ol>
	<li>Hamby, M. E., Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+astrocytes+as+therapeutic+targets+for+CNS+disorders.">Reactive astrocytes as therapeutic targets for CNS disorders.</a> Neurotherapeutics. 7 (4), 494-506 (2010).</li><li>Bush, T. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte+infiltration,+neuronal+degeneration,+and+neurite+outgrowth+after+ablation+of+scar-forming,+reactive+astrocytes+in+adult+transgenic+mice.">Leukocyte infiltration, neuronal degeneration, and neurite outgrowth after ablation of scar-forming, reactive astrocytes in adult transgenic mice.</a> Neuron. 23 (2), 297-308 (1999).</li><li>Faulkner, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+astrocytes+protect+tissue+and+preserve+function+after+spinal+cord+injury.">Reactive astrocytes protect tissue and preserve function after spinal cord injury.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 24 (9), 2143-2155 (2004).</li><li>Okada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+ablation+of+Stat3+or+Socs3+discloses+a+dual+role+for+reactive+astrocytes+after+spinal+cord+injury.">Conditional ablation of Stat3 or Socs3 discloses a dual role for reactive astrocytes after spinal cord injury.</a> Nature Medicine. 12 (7), 829-834 (2006).</li><li>Voskuhl, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+Astrocytes+Form+Scar-Like+Perivascular+Barriers+to+Leukocytes+during+Adaptive+Immune+Inflammation+of+the+CNS.">Reactive Astrocytes Form Scar-Like Perivascular Barriers to Leukocytes during Adaptive Immune Inflammation of the CNS.</a> Journal of Neuroscience. 29 (37), 11511-11522 (2009).</li><li>Burda, J. E., Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+Gliosis+and+the+Multicellular+Response+to+CNS+Damage+and+Disease.">Reactive Gliosis and the Multicellular Response to CNS Damage and Disease.</a> Neuron. 81 (2), 229-248 (2014).</li><li>Maikos, J. T., Elias, R. A., Shreiber, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+dura+mater+from+the+rat+brain+and+spinal+cord.">Mechanical properties of dura mater from the rat brain and spinal cord.</a> Journal of neurotrauma. 25 (1), 38-51 (2008).</li><li>Garcia, A. D., Doan, N. B., Imura, T., Bush, T. G., Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GFAP-expressing+progenitors+are+the+principal+source+of+constitutive+neurogenesis+in+adult+mouse+forebrain.">GFAP-expressing progenitors are the principal source of constitutive neurogenesis in adult mouse forebrain.</a> Nat Neurosci. 7 (11), 1233-1241 (2004).</li><li>Garcia, A. D., Petrova, R., Eng, L., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+hedgehog+regulates+discrete+populations+of+astrocytes+in+the+adult+mouse+forebrain.">Sonic hedgehog regulates discrete populations of astrocytes in the adult mouse forebrain.</a> J Neurosci. 30 (41), 13597-13608 (2010).</li><li>Amat, J. A., Ishiguro, H., Nakamura, K., Norton, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+diversity+and+kinetics+of+proliferating+microglia+and+astrocytes+following+cortical+stab+wounds.">Phenotypic diversity and kinetics of proliferating microglia and astrocytes following cortical stab wounds.</a> Glia. 16 (4), 368-382 (1996).</li><li>Hozumi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+of+prosaposin+ameliorates+spatial+learning+disturbance+and+reduces+cavity+formation+following+stab+wounds+in+rat+brain.">Administration of prosaposin ameliorates spatial learning disturbance and reduces cavity formation following stab wounds in rat brain.</a> Neuroscience letters. 267 (1), 73-76 (1999).</li><li>Ness, R., David, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptomeningeal+cells+modulate+the+neurite+growth+promoting+properties+of+astrocytes+in+vitro.">Leptomeningeal cells modulate the neurite growth promoting properties of astrocytes in vitro.</a> Glia. 19 (1), 47-57 (1997).</li><li>Byrnes, K. R., Fricke, S. T., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathological+differences+between+rats+and+mice+after+spinal+cord+injury.">Neuropathological differences between rats and mice after spinal cord injury.</a> Journal of magnetic resonance imaging : JMRI. 32 (4), 836-846 (2010).</li><li>Steward, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+approaches+to+neurotrauma+research:+opportunities+and+potential+pitfalls+of+murine+models.">Genetic approaches to neurotrauma research: opportunities and potential pitfalls of murine models.</a> Experimental neurology. 157 (1), 19-42 (1999).</li><li>Davalos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+mediates+rapid+microglial+response+to+local+brain+injury+in+vivo.">ATP mediates rapid microglial response to local brain injury in vivo.</a> Nature neuroscience. 8 (6), 752-758 (2005).</li><li>Hanisch, U. -. K., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia:+active+sensor+and+versatile+effector+cells+in+the+normal+and+pathologic+brain.">Microglia: active sensor and versatile effector cells in the normal and pathologic brain.</a> Nature neuroscience. 10 (11), 1387-1394 (2007).</li><li>Neumann, H., Kotter, M. R., Franklin, R. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Debris+clearance+by+microglia:+an+essential+link+between+degeneration+and+regeneration.">Debris clearance by microglia: an essential link between degeneration and regeneration.</a> Brain. 132 (2), 288-295 (2008).</li><li>Nimmerjahn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resting+Microglial+Cells+Are+Highly+Dynamic+Surveillants+of+Brain+Parenchyma+in+Vivo.">Resting Microglial Cells Are Highly Dynamic Surveillants of Brain Parenchyma in Vivo.</a> Science. 308 (5726), 1314-1318 (2005).</li><li>Horn, K. P., Busch, S. A., Hawthorne, A. L., van Rooijen, N., Silver, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Another+Barrier+to+Regeneration+in+the+CNS:+Activated+Macrophages+Induce+Extensive+Retraction+of+Dystrophic+Axons+through+Direct+Physical+Interactions.">Another Barrier to Regeneration in the CNS: Activated Macrophages Induce Extensive Retraction of Dystrophic Axons through Direct Physical Interactions.</a> Journal of Neuroscience. 28 (38), 9330-9341 (2008).</li><li>Ip, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Cells+Contribute+to+Myelin+Degeneration+and+Axonopathic+Changes+in+Mice+Overexpressing+Proteolipid+Protein+in+Oligodendrocytes.">Immune Cells Contribute to Myelin Degeneration and Axonopathic Changes in Mice Overexpressing Proteolipid Protein in Oligodendrocytes.</a> Journal of Neuroscience. 26 (31), 8206-8216 (2006).</li><li>Perry, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+systemic+inflammation+to+chronic+neurodegeneration.">Contribution of systemic inflammation to chronic neurodegeneration.</a> Acta neuropathologica. 120 (3), 277-286 (2010).</li><li>McKeon, R. J., Jurynec, M. J., Buck, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chondroitin+sulfate+proteoglycans+neurocan+and+phosphacan+are+expressed+by+reactive+astrocytes+in+the+chronic+CNS+glial+scar.">The chondroitin sulfate proteoglycans neurocan and phosphacan are expressed by reactive astrocytes in the chronic CNS glial scar.</a> Journal of Neuroscience. 19 (24), 10778-10788 (1999).</li><li>Silver, J., Miller, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+beyond+the+glial+scar.">Regeneration beyond the glial scar.</a> Nature reviews. Neuroscience. 5 (2), 146-156 (2004).</li><li>Zamanian, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+analysis+of+reactive+astrogliosis.">Genomic analysis of reactive astrogliosis.</a> J Neurosci. 32 (18), 6391-6410 (2012).</li><li>Buffo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+and+progeny+of+reactive+gliosis:+A+source+of+multipotent+cells+in+the+injured+brain.">Origin and progeny of reactive gliosis: A source of multipotent cells in the injured brain.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (9), 3581-3586 (2008).</li><li>Sirko, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+glia+in+the+injured+brain+acquire+stem+cell+properties+in+response+to+sonic+hedgehog.+[corrected].">Reactive glia in the injured brain acquire stem cell properties in response to sonic hedgehog. [corrected].</a> Cell stem cell. 12 (4), 426-439 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

それは、頭蓋骨や、基礎となる硬膜を掘削中に損傷していないことが重要です。頭蓋骨がパンクされていないことを確認するために掘削しながら、軽い圧力を使用してください。硬膜が骨にリフトオフされていないことを確認するために頭蓋骨片を持ち上げながら加えて、注意が必要です。 前脳刺し損傷はこちらCNSへの浸透傷害モデルを説明しました。このようなFPIやCC...

A major challenge for developing successful therapies to treat the injured CNS is an incomplete understanding of the complex multicellular events that are triggered by the trauma. Reactive astrocytes are gaining increasing recognition as a promising target for novel therapies1. Though historically regarded as hostile to neural repair, reactive astrocytes are now recognized as critical components of a complex, multicellular neuroprotective response that includes attenuation of inflammatory processes and limiting secondary damage and neurodegeneration2-6. Although the neuropathological characteristics of reactive gliosis have long been well defined, the cellular and molecular mechanisms regulating reactive gliosis, and the diverse array of downstream consequences remain poorly understood. Understanding the mechanisms that drive reactive gliosis, as well as the subsequent cellular and molecular events, is an important step towards developing strategies aimed at promoting the neuroprotective properties of reactive gliosis, while attenuating the detrimental effects. 
Here we demonstrate a method to induce severe reactive astrogliosis in the forebrain of adult mice using a stab injury. In contrast to other traumatic brain injury (TBI) models, such as controlled cortical impact (CCI) or fluid percussion injury (FPI), which require specialized equipment to produce an injury, the forebrain stab requires only a stereotaxic device to stabilize the head and a No. 11 scalpel blade. Thus the forebrain stab lesion model is more broadly accessible to a wide range of laboratories that do not have access to the specialized devices necessary for creating an FPI or CCI injury. The method described here enables investigators to reliably and reproducibly trigger a robust gliosis response to investigate subsequent cellular and molecular events. Once recovered from surgery, animals that have received a forebrain stab injury can survive for prolonged periods without the need for specialized care and can be returned to the colony for acute, intermediate, or chronic studies. Though less clinically translatable than FPI or CCI models of TBI, a forebrain lesion produced by a stab injury serves as a simple yet useful experimental model to investigate basic biological mechanisms underlying reactive gliosis and other neuropathological events following trauma to the CNS.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Stereotax</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>726049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed micro drill</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>724950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stainless steel scalpel blade, #11</td>
			<td>MedVet</td>
			<td>JOR581S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/45 angled forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam sponge 12cmx7mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>NC9841478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibodies and other reagents</td>
			<td>Manufacturer</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Dilution (brightfield) 
			Dilution (fluorescence)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rb anti-GFAP</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>&#160;Z033429-2</td>
			<td>1:20k 
			1:1k</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shp anti-BrdU</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab1893</td>
			<td>1:2k 
			1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated goat anti-rabbit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>BA-1000&#160;</td>
			<td>1:400</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated rabbit anti-sheep</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>BA-6000</td>
			<td>1:400</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexafluor 488 goat anti-rabbit</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>1:400</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexafluor 568 donkey anti-sheep</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A-21099</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Nucleic Acid Stain</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>D3571</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl Violet Acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td>1%</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

triggering reactive gliosis in vivo by a forebrain stab injury

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive astrogliosis. Reactive astrocytes exert both inflammatory and protective effects that inhibit and promote, respectively, neural repair. The mechanisms underlying the diverse functional properties of reactive astrogliosis are not well understood. Achieving a greater understanding of these mechanisms is critical to developing therapeutic strategies to treat the injured CNS. Here we demonstrate a method to trigger reactive astrogliosis in the adult mouse forebrain using a forebrain stab lesion. This lesion model is simple, reliable, and requires only a stereotaxic device and a scalpel blade to produce the injury. The use of stab lesions as an injury model in the forebrain is well established and amenable to studies addressing a broad range of neuropathological outcomes, such as neuronal degeneration, neuroinflammation, and disruptions in the blood brain barrier (BBB). Thus, the forebrain stab injury model serves as a powerful tool that can be applied for a broad range of studies on the CNS response to trauma.

この処置を受けた動物は、専門的な術後のケアを必要としないので、短期または長期の時間の生存期間は容易に損傷後の急性または慢性の病状を調査する必要性に応じて、試験に組み込まれています。このようなソーマのGFAPおよび肥大のアップレギュレーションのような反応性神経膠症の主要な特徴は、早ければ、損傷後2〜3日のように観察することができます。反応性星状細胞のための増?...

Watch this Scientific Journal Video about Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury at JoVE.com

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

This article describes a detailed protocol to produce a forebrain stab injury in adult mice. The stab injury induces severe reactive gliosis and glial scar formation which can be subsequently examined by standard immunohistochemistry methods.

反応性神経膠症のトリガ<em&gt;インビボ</em&gt;前脳刺し損傷によって

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive ...

triggering-reactive-gliosis-in-vivo-by-a-forebrain-stab-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

10.4K ビュー.  Drexel University. This article describes a detailed protocol to produce a forebrain stab injury in adult mice. The stab injury induces severe reactive gliosis and glial scar formation which can be subsequently examined by standard immunohistochemistry methods. 